灰绿藜耐盐基因CgNHX转导新疆陆地棉的初步研究

以新疆陆地棉为实验材料,通过花粉管通道法向优质棉花高代材料中导入了灰绿藜耐盐基因CgNHX．经过三年连续转导的结果显示：①大田注射期间的天气状况对转导成功影响较大．当昼夜温差较大且有露水时,花和铃的状态较好,导致结铃率、卡那霉素检测阳性率增加;②棉叶基因组DNA的提取质量与棉叶采后冷藏的时间有一定相关性．采后一周内提取的棉叶DNA质量较好,PCR检测获得30％的阳性率,而两周及以后的棉叶DNA质量降低,PCR检测未获得阳性结果;③在mRNA水平上检测转基因植株的表达较为困难．本实验中PCR检测阳性的30份样品,在RT—PCR检测中均未获得目的基因的明显特异扩增条带,只有部分样品在目的条带的位置出现弥散带型．本研究初步显示外源基凶CgNHX已导入棉花受体中,但其表达情况还需进一步检测验证．     

缢蛏RAPD扩增条件的优化及遗传分析初报

对采自宁波市象山县三门湾沿海滩涂的缢蛏RAPD扩增条件进行了摸索和优化，反应体系为25μL时，缢蛏的RAPD扩增的最适条件为94℃预变性5min,94℃变性1min,37℃退火1min，72℃延伸1min，进行40个循环，然后72℃总延伸10min,Taq酶量为1.0u,dNTPs为300μmol/L，引物浓度为0.4μmol/L，DNA模板浓度为50ng,Mg^2 浓度为2.0mmol/L，对缢蛏DNA进行了初步的遗传分析。发现其遗传多样性比较丰富。     

冀棉20胚性愈伤形态发生和发育的组织细胞学研究

以陆地冀棉２０下胚轴的愈伤组织为材料,在培养过程中阶段性取材,固定,制备石蜡切片,观察并显微摄影,从组织细胞学角度了解至务组织再分化的方式,胚性愈伤组织形态发生的特点和胚状体的发育过程,为该品种抗性育种和植株再生研究打下了基础。     

莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)cbn1和cao突变基因的对比分析及CAO基因的分子定位

用电击法将带有CAO基因片段的P sp109-E 8质粒转入到莱茵衣藻cbn1-48m t 基因突变株中后,转化子中出现了叶绿素b的恢复性表达,初步验证了丧失合成叶绿素b能力的cbn1和cao突变基因具有等位性的属性;将1641-1b(cbn1-43 m t )和CC-1354(cbn1-48 m t )突变株分别与CBS5(cao5 m t-)突变株的分离子CBS5-c1和CBS5-c5进行杂交,并通过随机分析方法分离获得1842个减数分裂后代分离子,经检测其中均没有发现有野生性表型的分离子,初步证明cbn1和cao 4突变基因间有着非常紧密的连锁性;从上述杂交系分离获得的50多个四分子中也没有检测发现显示野生性表型的分离子,进一步证明了cbn1和cao突变基因具有等位性的属性;根据CAO基因的DNA序列,从5′-端和3′-端设计两个探针,分别与莱茵衣藻核基因组Ⅰ号染色体上GBP 1和RB 47分子标记之间的21个BAC克隆进行的点杂交实验结果显示,该两个探针序列与21号BAC克隆(莱茵衣藻BAC文库序列号33e2)片段均有同源区的特性,此项DNA杂交实验初步证明,CAO基因的位点是在cbn1突变基因左右两侧的GBP 1和RB 47两个分子标记之间的33e2 BAC克隆片段区.     

丙型肝炎病毒包膜蛋白E1在小鼠和家兔中免疫应答研究

探讨丙型肝炎病毒包膜蛋白E1作为丙肝候选疫苗的可行性．用大肠杆菌表达的非糖基化HCV(丙型肝炎病毒)E1包涵体蛋白免疫小鼠和家兔，分析该包涵体蛋白在小鼠和家兔中所引起的免疫应答及其安全性．该E1蛋白具有良好的免疫原性，能诱导小鼠和家兔产生针对E1的特异性体液免疫应答．小鼠CD8^ T细胞数量在免疫后有明显升高．免疫小鼠未见明显的毒副作用．推测HCV E1这种包涵体结构可能有利于E1抗原的呈递．而HCV E1蛋白的糖基化并不是其免疫原性所必须的．     

宁波市育龄女性健康状况及相关因素调查分析

采用多阶段分层整群随机抽样的方法,调查了宁波市育龄女性健康状况及其相关因素,结果表明：宁波市育龄女性家庭人口数及常住人口数的众数为3;城镇家庭月收入在1000～3000元为30．4％,3000-5000元为28．8％,农村家庭月收入在1000～3000元为40．4％,3000～5000元为24．8％;育龄女性年龄为（36．55±7．67）岁;参加妇科检查的比例为77．7％;2周患病率为5.3％,自理能力失能或残障率为3．3％,活动性失能或残障率为8．5％,疼痛和不适失能或残障率为15．9％,视力失能或残障率为15．6％,认知能力失能或残障率为16．0％,睡眠和精力失能或残障率为28．6％,情绪失能或残障率为23．9％．调查结果认为宁波市育龄女性所在家庭基本处于核心家庭形式,家庭基本卫生条件较好,整体文化水平较高,躯体健康水平较高,而心理健康水平较低．     

稀土三氟醋酸盐与邻菲罗啉(phen)混配配合物合成和表征

本文在含水溶剂中合成得到稀土三氟醋酸盐与三份邻菲罗啉配位的配合物,确定其组成为Ln(CF_3COO)_3·(Phen)_3·nH_2O.通过元素分析、红外、紫外、电导、差示扫描和热重等手段对配合物进行了表征.     

OP存在下荧光桃红B-邻菲啰啉光度法测定银的研究及应用

本文研究了在乳化剂OP存在下,银(Ⅰ)与邻菲啰啉,四氯四溴荧光素(荧光桃红B,TCTBF)的显色反应.试验表明乳化剂OP对此显色反应有明显增敏作用,形成配合物的适宜pH范围为3.80-6.00,配合物的最大吸收波长为575nm;表观摩尔吸光系数为9.43×10~4L·mol~(-1)·cm~(-1).银在0—20μg/25ml范围内服从比尔定律,显色体系至少可稳定2h.用该法测定了废水试样中微量的银,所得结果令人满意.     

丝裂霉素诱导CHO-K1细胞凋亡及对其细胞周期的影响

采用荧光探针染色法，琼脂糖凝胶电泳分析方法．流式细胞仪技术研究丝裂霉素诱导CHO-K1细胞凋亡及对其细胞周期的影响．结果显示，丝裂霉素处理CHO-K1细胞后，细胞核质收缩凝集，核碎裂及出现凋亡小体；琼脂糖电泳呈现典型的DNA梯带；流式细胞仪检测到典型的细胞凋亡峰(亚G1峰)，分别用10，15，20，25mg／L丝裂霉素处理CHO-K1细胞，其细胞凋亡率分别为4．76％，9．20％，14．51％，37．46％，且凋亡率随药物浓度的升高而升高，显示两者的正相关性；作用浓度相同而改变处理时间时．发现细胞凋亡率随处理时间的延长而呈上升趋势；流式细胞仪细胞周期分析，显示随着丝裂霉素浓度提高或作用时间延长，G1-S期细胞百分比降低，G2／M期细胞百分比升高，Ap峰与G1-S期负相关，与G2／M期正相关．     

甘蓝rDNA及C0t-1 DNA荧光原位杂交及其核型分析

为了探索一种高效可靠的芸薹属植物核型分析方法，本文以甘蓝品种黑叶小平头为实验材料，从其基因组DNA中分离出C0t-1 DNA并用生物素标记作探针，对有丝分裂中期相染色体进行原位杂交，每对染色体上均显示出了特定的荧光原位杂交带型．将植物25S和5SrDNA分别用地高辛和生物素标记作探针，单色荧光原位杂交结果显示黑叶小平头2对染色体具有25SrDNA基因座，1对染色体具有5S rDNA基因座．生物素标记的C0t-1 DNA与地高辛标记的25S rDNA等量混合作探针，双色荧光原位杂交证实了C0t-1 DNA与25S rDNA二者具有一致的染色体位置特征，表明基于rDNA及C0t-1 DNA荧光原位杂交的核型分析技术，优于目前普遍采用的只基于rDNA荧光原位杂交的核型分析方法．结合已报道的rDNA染色体定位结果，及C0t-1 DNA荧光原位杂交带型与染色体形态，更准确地构建了甘蓝的核型．