基于酶催化沉积质量放大的压电免疫传感器的研究

提出了一种酶催化沉积质量放大的高灵敏压电免疫传感器. 采用1,6-二巯基己烷在石英晶振上自组装一单分子层, 再通过另一端巯基连接胶体金, 利用胶体金的高比表面积和强吸附作用力增加抗IgG抗体的固定量, 同时借助胶体金优良的生物亲和性保持抗IgG抗体的活性. 在H2O2存在下, 通过标记在抗人IgG抗体上的HRP酶催化底物DAB(3,3′-联苯二胺), 反应中生成的不溶性产物沉积到石英晶振的Au电极表面, 达到质量放大的目的. 结果表明, 检测人IgG在16 ng/mL-100 μg/mL范围内有很好的线性关系, 检测下限为10 ng/mL, 在用于实际试样的回收率测定中, 结果良好.     

基于PEG凝集的压电免疫传感器用于日本血吸虫抗体的测定

以ＰＥＧ为乳剂，建立了一种新的液相压电免疫分析法，并用于日本血吸虫感染兔血清的测定。初步探讨了这种ＰＥＧ液相压电免疫传顺的响应机理，详细考察了ＰＥＧ浓度，ＰＥＧ－ＡＷＡ复合时间及测试温度等因素对频移的影响，对５个兔血样的测试结果表明，应用该方法不仅对日本血吸虫的阳性判别率可达１００％，而且能定量测定感染血清中血吸虫抗体的含量。     

基于Nafion膜修饰的血吸虫抗体压电免疫传感器研究

将Nafion膜包埋血吸虫抗原固定在石英晶体微天平表面上，构制了用于测定血清中血吸虫抗体的压电免疫传感器。这种生物敏感膜由涂敷在石英晶片表面上的一滴Nafion＋血吸虫抗原磷酸盐缓冲液干燥而成，它的构制和再生过程具有良好的重现性。用扫描电镜观察了这种生物敏感膜的形貌，并对传感器的构制参数、测量条件进行了优化，优化的传感器埘血吸虫抗体的检测范围为0．2～6．0mg／L。本传感器具有仪器简单、操作方便、灵敏度高、重现性好等优点，可判断血吸虫感染情况。     

基于Nafion膜修饰的血吸虫抗体压电免疫传感器研究

将Nafion膜包埋血吸虫抗原固定在石英晶体微天平表面上,构制了用于测定血清中血吸虫抗体的压电免疫传感器.这种生物敏感膜由涂敷在石英晶片表面上的一滴Nafion+血吸虫抗原磷酸盐缓冲液干燥而成,它的构制和再生过程具有良好的重现性.用扫描电镜观察了这种生物敏感膜的形貌,并对传感器的构制参数、测量条件进行了优化,优化的传感器对血吸虫抗体的检测范围为0.2～6.0 mg/L.本传感器具有仪器简单、操作方便、灵敏度高、重现性好等优点,可判断血吸虫感染情况.     

基于等离子体聚合膜的日本血吸虫压电免疫传感器的研究

提出了一种测定日本血吸虫抗体的可逆压电免疫传感器。先在石英晶振上沉积正丁胺等离子体聚合膜,再自组装聚电解质,用以静电吸附固定日本血吸虫抗原。然后采用BSA和NRS作封闭剂,以封闭晶振上非特异必吸附位点,实现对日本血吸虫感染兔血清的测定。探讨了聚电解质(PSS和AASS)自组装、抗原包被和免疫反应等实难条件的影响;考察了该传感器的响应特性与再生性能,并与采用戊二醛共价键合固定法进行比较。发现该传感器具有灵敏度高、重现性好、非物异性吸附低、再生简便等优点。将它用于测定一系列不同感染程度的兔血清样本,结果表明,该传感系统是临床定性和定量诊断日本血吸虫病的一种有效工具。     

白血病细胞酶联免疫酶催化银沉积于插指电极阵列电化学免疫分析新方法

建立了一种检测白血病细胞表面抗原的细胞酶联免疫电化学分析新方法. 该方法兼有细胞酶联免疫分析抗原、抗体结合的特异性和插指电极阵列酶催化银沉积电化学分析的灵敏性. 在聚苯乙烯微孔板中包被白血病细胞, 先后加入鼠抗人抗体及碱性磷酸酶(ALP)标记的马抗鼠抗体, ALP催化抗坏血酸磷酸酯(AAP)水解成抗坏血酸(AA), AA使银离子还原成银单质并沉积到插指电极阵列表面, 导致插指电极阵列上相邻两个梳齿导通. 通过对电导率的测定, 可实现对细胞表面抗原的高灵敏分析. 此分析方法灵敏度高(可检测出50个左右的HL-60细胞)、特异性好, 且可用于大量样品的分析, 为白血病等肿瘤疾病的早期诊断和免疫分型提供了新技术. 此外, 该方法也可用于细胞表面分子基因工程抗体活性的检测.     

甲胎蛋白压电免疫传感器的研究

以合成的甲基丙烯酸甲酯和甲基丙烯酸羟乙酯共聚作载体，在压电石英晶体表面涂覆共聚物涂层，经ＣＮＢｒ活化后固定ＡＦＰ抗体，研制成ＡＦＰ压电晶体免疫传感器，研究了固定化方法，载体量，抗原抗体结合时间，重现性选择性等实验条件和参数的影响，压电晶体的频移值与ＡＦＰ浓度在１００ｎｇ／ｍＬ～８００ｎｇ／ｍＬ的范围内有良好的线性关系，将此传感器初步用于人体血清样品的测定，并与放射免疫法对照，结果令人满意。     

基于免疫磁分离和酶催化放大的化学发光免疫传感器测定人血清中癌胚抗原的含量北大核心CSCD

基于免疫磁分离和酶催化放大策略,构建了一种用于测定人血清中癌胚肮原(CEA)含量的化学发光免疫传感器。利用抗原-抗体的特异性结合,将磁球作为免疫反应的固相载体去捕获癌胚抗原(CEA),并通过在免疫磁球表面负载辣根过氧化酶(HRP)作为检测标记物,形成磁性免疫夹心复合物。通过HRP对过氧化氢的催化作用,氧化鲁米诺产生较强的化学发光信号,根据化学发光强度来定量CEA。结果显示:CEA的质量浓度在0.05~80.00μg·L^(-1)内与其对应的化学发光强度呈线性关系,检出限为4.5 ng·L^(-1);对样品进行回收试验,回收率为97.0%~100%。与其他固相载体和化学发光免疫传感器相比,该方法检测CEA的化学发光强度更强,并且具有更宽的线性范围和更低的检出限。     

银纳米树的选择性沉积及其催化性质

<正>纳米银由于体积小、比表面积大及物理和化学性能独特而受到广泛关注[1,2].研究结果表明,纳米银的光学、电学和催化活性与粒子的粒径、形貌和结构之间存在强烈的依赖关系[3].银纳米树的制备     

生物素-亲和素系统在压电免疫传感器中质量放大作用研究

生物素-亲和素系统(BiotinAvidinSystem,BAS)是70年代后期迅速发展起来的一种新型生物放大系统,具有高灵敏度、高特异性以及简便、经济、快速等优点,在现代生物免疫学领域中已得到广泛的应用^[1].     

一种基于纳米二氧化硅增强凝集反应的压电免疫传感器

本文提出了一种基于抗体包被纳米粒子的简单快速的压电免疫凝集法,用于蛋白质检测。该方法原理是利用羊抗人IgG（G-anti-hIgG）包被的二氧化硅（或金）纳米粒子和人IgG（hIgG）发生免疫凝集反应而使得压电晶体频率发生改变进行测定。当凝集反应发生时,修饰在探针表面的G-anti-hIgG通过hIgG与G-anti-hIgG包被的纳米粒子结合,将质量效应和粘弹性因素叠加作用于压电晶体。结果表明这使得背景值大幅减小而信号明显增强。另外,对修饰后了抗体及结合免疫复合物的探针表面进行了SEM表征,对使用聚乙二醇作为增敏剂和实验最佳离子强度、pH值进行了优化选择。该传感器检测hIgG线性范围是0.26-16.7 mg mL-1,最低检出限为84 ng mL-1。     

基于酪胺信号放大的新型免疫传感器

将酪胺应用于酶联免疫分析,建立了一种新的高灵敏伏安型免疫传感器。利用纳米金的静电吸咐和己二硫醇、巯基乙胺的自组装,将羊抗人IgG抗体固定到金电极表面上,以辣根过氧化物酶标记羊抗人IgG抗体为酶标抗体,以生物素化酪胺为酶底物,利用催化酪胺沉积反应,在传感界面沉积大量生物素,使原始信号得到几何级数的放大。结果表明,通过生物素化酪胺催化放大后,制得的免疫传感器对H2O2的催化能力增大近20倍,检测hIgG在1.5μg/L～22 mg/L范围内有良好的线性关系,检出限为0.1μg/L。用于实际试样的回收率的测定,结果良好。     

基于胱氨自组装膜的压电免疫传感器检测抗凝血酶Ⅲ

提出了一种基于胱氨自组装膜和采用聚电解质吸附法固定活性物质的压电免疫传感器，用于检测人血浆中抗凝血酶Ⅲ（AT－Ⅲ）。先在压电石英晶振的金电极表面自组装一层带疏基的胱氨单分子膜，再在膜上组装一层聚电解质褐藻酸钠（AAS），通过静电吸附作用，将AT－Ⅲ抗体固定于石英晶体表面，在含有3.5%聚乙二醇（PEG）的缓冲溶液中检测AT－Ⅲ。比较了传感器分别采用AAS吸附法和戊二醛键合法固定AT－Ⅲ抗体的响应性能，发现前者固定的抗体的活性较高，反应响应的频移值较大，检测的线性范围也较宽。实验采用PEG作免疫反应的促进剂，进一步改善了传感器的检测灵敏度和检测限。采用Piranha试剂作洗脱液可实现传感器的反复再生。干扰与回收率实验结果表明，该传感系统可用于人血浆中AT－Ⅲ的临床检测。     

一种新的转铁蛋白压电免疫传感器的研究

报道了一种基于等离子体聚合膜、结合聚电解质设计的转铁蛋白压电免疫传感器.采用辉光放电等离子体聚合技术,在石英晶体上沉积一层正丁胺聚合膜,再在膜上自组装一层易再生的、带负电的聚电解质,调节抗体溶液的pH值使其带正电,经静电吸附包被抗体后用以测定抗原.探讨了自组装聚电解质的浓度和自组装时间,抗体的包被浓度、包被时间和pH值以及免疫反应的酸度、温度及响应频率与时间的关系等实验条件的影响.考察了传感器的灵敏度、选择性、重现性和再生性能.用传感器测定人血清中转铁蛋白的线性范围为0.10～12.65μg/mL.将其用于实际样品中转铁蛋白的测定,结果与酶联免疫法基本一致.     

蛋白A定向固定抗体的纤维蛋白压电免疫传感器的研究

将9MHz双面镀金石英晶体浸入蛋白A溶液中,在晶体电极表面形成一层均匀的蛋白A薄层,用于定向固定人体纤维蛋白抗体.在蛋白A层上形成一层有序致密的自组装抗体分子膜,研制成一种新型的用于人体纤维蛋白检测的压电免疫传感器.比较了3种固定抗体方法的效果,从传感器的灵敏度、稳定性、重现性等考虑,蛋白A吸附法优于聚乙烯亚胺及牛血清白蛋白固定抗体的方法.研究了蛋白A浓度、抗体效价以及抗原抗体反应时间等对传感器灵敏度的影响,考察了电极的选择性和再生能力.纤维蛋白在1×10^-4～1×10^-2g/L浓度范围内有良好响应.