一组小鼠白血病细胞系的建立及生物学特性的研究

本支建立了一种经PHA-脾条件培养液刺激,在体外形成白血病干细胞克隆后,再经体内传代,发病后在体外连续培养建成白血病细胞系的新方法。采用此方法成功地建立了T抑制淋巴细胞白血病L7811-85,L7212-85细胞系,非T非B淋巴白血病L1210-86,B淋巴白血病P388-86及红白血病FLCL细胞系等。对上述细胞系进行了较系统的生物学特性研究。电子显微镜观察中发现,白血病细胞的病毒颗粒在体外传代时A型颗粒消失,C型颗粒出现。并发现在L7811-85细胞系培养上清液分离的组分中,有白血病相关抑制活性的存在。     

人直肠腺癌细胞系——HR-8348的建立和生物学特性

从一例男性直肠腺癌患者手术后,取得原发癌肿组织,经离体培养建成细胞系,定名为HR-8348。对本系细胞进行生物学特性的观察分析结果是:细胞在对数增殖期的倍增时间为36.05h,细胞分裂指数在第三天达高峰,为44.5‰。细胞形态以多边形上皮样细胞为主,在电子显微镜下可见细胞核及核仁呈恶性细胞特征,细胞表面有微绒毛.细胞核形态不规则,胞浆中核蛋白体较丰富,可见分泌颗粒,在少数细胞可找见张力原纤维柬以及细胞间的桥粒结构。AB染色反应阳性,细胞在半固体琼脂中集落形成率为12.9％。细胞在1μg/ml的PHA中即有凝集反应。细胞的染色体众数范围为69—75,有长的亚近端着丝点标记染色体。用定性和定量分析均证实该细胞具有分泌CEA的能力。小鼠皮下移植形成恶性肿瘤结节,其组织结构与该病例的临床直肠癌标本相似,该细胞系经多次检查未发现支原体污染。     

人体恶性胸膜间皮瘤细胞系SMC-1的建立和生物学特性

本文报道以一例混合型人体恶性胸膜间皮瘤手术切除标本,经体外培养和建成一长期传代的细胞系,命名为SMC-1.该系细胞呈多形性,具有明显的重叠性生长特征.细胞群体倍增时间约32小时,最高分裂指数达46—50%,染色体众数为69—70.异种移植可产生类似原培养材料组织结构的肿瘤.培养细胞、异种移植之肿瘤及原培养材料三者具有同一的组织化学特征.这些说明这是一例人体恶性胸膜间皮瘤细胞系.SMC-1细胞系的建成,对研究愈后极为凶险的恶性间皮瘤提供了有利条件。     

人体肺腺癌细胞系——SPC-A-1的建立及其生物学特性

从一例男性原发性肺腺癌患者手术中,取得胸膜转移结节,经离体培养建成细胞系,定名为:SPC-A-1。对本系细胞进行生物学特性的观察分析的结果是:细胞群体的倍增时间约30小时,细胞形态以多形性上皮样细胞为主。在电子显微镜下,细胞表面具多量微绒毛,细胞核形态不规则,胞质内有粘液性分泌颗粒和类似于肺泡Ⅱ型上皮细胞的板层体,张力原纤维束以及细胞间的桥粒结构。细胞的染色体众数范围为75—80,其中均有一对异常长的具有亚中着丝点的染色体。动物异种移植形成恶性肿瘤结节,其组织结构与该病例的临床肺腺癌标本相似。PAS和粘液卡红染色反应阳性。以上特性表明:本细胞系是一个人体原发性肺腺癌细胞系。     

含羧基中药成分荧光标记方法的建立及优化

用荧光标记技术对含羧基类中药成分进行标记,探索中药成分荧光标记方法,提高其检测灵敏度、为中药药代动力学研究奠定基础。以荧光试剂8-氨基芘-1,3,6-三磺酸三钠盐(APTS)和绿原酸组成研究体系,对标记条件进行优化。反应体系中加入1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC.HCl)与N-羟基丁二酰亚胺(NHS)可使衍生反应在室温下进行。APTS标记绿原酸的较优反应条件为:绿原酸与APTS的浓度比为1∶5,EDC的浓度为5 mmol/L,NHS的浓度为0.33 mmol/L。以0.1mol/L、pH5.50的NaH2PO4-Na2HPO4为缓冲溶液,绿原酸首先与EDC、NHS避光反应4 h,再与APTS反应4h,即可达到较好的标记效果。此标记方法操作简便,灵敏度高,可以用于含羧基类中药成分的荧光标记研究。     

大豆残渣中大豆皂苷含量的分析方法

采用紫外分光光度法测定豆粕残渣中大豆皂苷的含量,结果表明,豆粕残渣中含大豆皂苷,平均回收率94.40%。此方法较准确、简便、重现性好,适用于大豆皂苷产品的质量控制,为大豆残渣的开发利用提供了依据。     

大豆异黄酮和大豆皂甙的分离纯化研究

黄酮类化合物的分离精制常用溶剂沉淀、pH梯度萃取法和柱色谱法.其中,溶剂萃取法虽然成本较低,但工艺过程繁琐,得率低且产品纯度不高.PH梯度萃取法所获得高纯度的黄酮化合物单体,可满足结构鉴定.柱色谱法是精制黄酮类化合物最常用的方法之一,Naim等曾用氧化铝柱从大豆提取物中成功分离了在C5位有羟基和在C5位没有羟基的两大类异黄酮组分,利用聚酰胺柱进一步从不含C5位羟基的异黄酮组分中分离出两种异黄酮单体.     

紫外分光光度法测定大豆中大豆异黄酮

以染料木苷为标准品,利用三波长紫外分光光度法对东北大豆的11个品种进行了异黄酮含量的测定。测定结果表明,“垦丰”和“中豆”两个品种的异黄酮含量较高,分别达到0．246％和0．221％;“东农44单株”和“东农355”两个品种的异黄酮含量较低,分别为0．101％和0．110％。     

从人食管癌细胞系分离分化基因的新方法

本文报道一种从癌细胞中分离分化基因(抑癌基因)的全过程。用维甲酸(RA)处理食管癌细胞EC8712可使后者发生终末分化和衰老。从对数生长期的和RA处理5天后的EC8712各构建一cDNA文库,命名为Lib8712和Lib8712RA,后者为可在哺乳动物细胞内表达的质粒。用RA处理5天的EC8712制备cDNA探针,先同Lib8712的质粒DNA进行反复杂交,以除去探针中与之共有的DNA序列,将余下的、富集了的探针(代表RA激活的基因)同Lib8712RA进行集落杂交,以钓取其中的RA激活的序列。已获得若干个杂交阳性克隆,Northern分析表明,它们是经RA诱导后特异表达的基因。     

高效液相色谱法测定大豆乳清中大豆低聚糖

大豆低聚糖是大豆中可溶性糖质的总称,主要成分是蔗糖(双糖)、棉子糖(三糖)、水苏糖(四糖)等.大豆低聚精对人体具有奇特的生理功效,能有效地促进人体肠道内有益菌群双歧杆菌的增殖,并且具有整肠功能.测定大豆低聚糖的方法有高效液相色谱法和气相色谱法,这两种方法都具有定性、定量分析大豆低聚糖的优点.气相色谱法采用衍生化的方法测定,具有较高的灵敏度,但操作复杂,而且进样口的高温会使糖的衍生物分解,甚至可被留在进样口的残留物所催化.高效液相色谱法可以直接测定,不必采用衍生化处理,减少了糖的损失和偶然误差,具有前处理简单、分离效果好,回收率和重现性均比气相色谱法好的优点.本文采用高效液相色法测定大豆蛋白生产过程中排放大豆乳清中的大豆低聚糖,并对测定条件及测定效果进行了探讨.     

大豆中的化学

大豆和豆制品中具有种类繁多的化学成分如大豆皂甙、大豆异黄酮、植物雌激素、大豆磷脂、大豆低聚糖等,它们具有广泛的生理功效,可防治癌症、防骨质疏松症、防心血管疾病、降低血脂、抗动脉粥样硬化症、改善妇女更年期综合症、防止鼻出血综合症等,因而决定了它可在食品、药品和化妆品中得到广泛的应用。目前国外研究较为深入,有的已用于生产实际,而国内尚无这方面的报道。我国东北素以生产优质大豆而闻名中外,倘若能充分利用豆渣、豆皮等废料加工,提取大豆中的有效成分,将有非常可观的社会和经济效益。     

适用于TATB,RDX,HMX含能材料的全原子力场的建立与验证

报道一个适用于三种常见的含能材料分子三硝基三氨基苯(TATB),环三亚甲基三硝胺(RDX),环四亚甲基四硝胺(HMX)的全原子力场.力场采用广泛使用的力场函数形式,其中键参数通过拟合量子化学密度泛函计算的数据获得,电荷参数和范德华参数通过拟合相应的分子晶体的物理性质(密度和升华焓)优化得到.通过计算分子和分子晶体的性质显示该力场可以用来准确地预测分子结构、分子振动频率和分子晶体的晶胞参数、密度和升华焓.进一步的验证显示该力场可用来较为准确地预测分子晶体的状态方程和机械模量.     

大豆素的结构修饰

大豆素是从大豆中分离出的异黄酮类成分,也是中药葛根中的活性成分之一.它具有雌激素样作用,用于治疗骨质疏松症、降低胆固醇等.异戊烯取代的某些黄酮类化合物具有很强的雌激素样作用,且有很强的抗真菌活性及细胞毒作用[1～3],因此,我们以大豆素为先导物与溴代异戊烯在碳酸钾存在下室温进行醚化反应,然后以N,N-二乙基苯胺为溶剂微波加热进行Claisen重排反应,得到几个异戊烯基取代的异黄酮类衍生物,以便进一步研究它们的生物活性.     

大豆异黄酮的LC-MS分析

大豆异黄酮是从大豆中提取的1种天然异黄酮类混合物,具有抗氧化及抗癌作用,长期服用不仅能降低胆固醇,减少心脏病的发生,而且可以降低癌症的发病率[1,2].此外,大豆异黄酮还具有内分泌调节功能,用于缓解妇女更年期症状.随着人们保健意识的加强,大豆异黄酮将成为医药、保健、食物等方面多功能产品.由于其组份多,缺少标准对照物质,定性定量分析该类化合物比较困难.文献报导[3]的方法只分析了其中的几个组份,我们采用LC-MS方法,首次同时分析了大豆异黄酮中的12个成分,并用归一化法测定了各组份的相对含量,为控制该产品的质量提供了可靠的分析手段.     

大豆糖蛋白的结构研究

应用NaClO2-HOAc提取结合层析柱提纯, 从大豆细胞壁物质(膳食纤维)中分离出PRF3纯组分。这是一种富含羟脯氨酸的糖蛋白, 本文对其结构特征作详尽剖析。结果表明, PRF3多糖部分的主链结构是由β(1→4)糖苷键连接的半乳聚糖,主链通过3-C分支点连接由α(1→3)键连的低聚阿拉伯糖侧链, 多糖与多肽之间通过HPr-Ara和Ser-Gal糖苷键连接在一起。     

不同硒制剂对白血病细胞系体外生长的抑制作用

观察了４种不同硒制剂对白血病细胞系体外生长的抑制作用．结果表明．各种硒制剂对Ｕ９３７和Ｋ５６２白血病细胞的生长和增殖均有不同程度的抑制作用．其抑制作用随药物浓度的增加而增强，其半数抑制浓度（ＩＣ５０）的顺序为：硒代二半胱氨酸＜亚硒酸钠＜硒蛋氨酸＜硒胱氨酸．     

含能盐和含能离子液体

近年来含能盐和含能离子液体由于其独特的性质而受到广泛关注。本文综述了多种含能盐和含能离子液体（阳离子包括三唑、四唑、双环唑、六次甲基四胺等;阴离子包括硝酸根、高氯酸根、硝基唑、叠氮根、四硝基铝、多腈基化合物、二硝基尿素等）的合成;结合其表征结果分析了阳离子上的取代基以及阴阳离子对它们的性能如熔点、生成焓、密度等的影响。对含能盐和含能离子液体在炸药和推进剂方面的应用进行了展望。     

芸苔属作物Ri T-DNA转化根对根肿菌(plasmodiophora brassicae)的侵染反应

通过发根农杆菌的转化作用,在甘蓝、油菜和花椰菜幼苗的下胚轴切段上诱发产生了许多Ri T-DNA转化根.用根肿菌休眠孢子悬浮液接种转化根,分别在固体、液体和半固体MS培养基上培养. 在固体培养基上,根肿菌只侵入根毛内,不侵入根皮层组织,因而不表现根肿病的任何症状.在液体培养基内,根肿菌侵入根皮层,导致根皮层组织异常的增生和膨大,直至形成肿根症状.在半固体培养基内,根肿菌侵入根段切口处的细胞内,并很快使切口处膨大起来.     

大豆施硒试验研究

大豆叶面喷硒可明显提高籽粒硒含量。鼓粒期一次喷施亚硒酸钠水溶液效果最佳，籽粒硒含量最高可比对照提高31.71倍。叶面喷硒对大豆植株生长及产量无不良影响。     

31P-NMR研究白血病细胞系Molt-4细胞内pH

用31P-NMR建立了无损伤性测定人淋巴瘤白血病细胞系Molt-4细胞胞内pH的方法.Molt-4细胞的31P核磁共振谱由无机磷(Pi)、ATP等的共振峰组成.通过测定Molt-4细胞内Pi化学位移进而能间接确定细胞内的pH,细胞内无机磷(Pi)的化学位移对pH非常敏感,随pH变化而变化.Molt-4细胞内Pi峰的化学位移为5.65±0.08(n=3),计算得到细胞内pH值为6.68±0.05.31P核磁共振能在测定细胞胞内pH的同时,观测到细胞内多种含磷小分子代谢物,是一种无损伤研究细胞内pH及代谢的有效方法.