一株产纤维素酶温泉高温菌的分离鉴定及发酵条件优化

为获得高产高温纤维素酶菌株,从云南元江瓦纳温泉中筛选分离得到一株产纤维素酶的高温菌ZZS-12.该菌在固体培养基上形成白色半透明圆形菌落,边缘圆滑,表面黏稠,经生理生化及16S rRNA序列分析,鉴定为Paenibacillus属的一个新种细菌.该菌最佳碳源、氮源及无机盐分别为麸皮、NaNO3及NaCl.最佳产酶培养时间为60 h,最适温度为45℃,最适pH为7.     

纤维素酶固体发酵条件的优化

对以稻草—麸皮为原料、以诱变后的黑曲霉LH2446为菌种固态发酵生产纤维素酶的条件进行了研究。试验确定所试因素的最佳组合为:稻草、麸皮比3∶2,硫酸铵2.0%,培养基起始pH值为自然pH,250mL三角瓶中装培养基10g,培养时间3d,温度35℃,表面活性剂Tween20 0.5%。在此条件下产纤维素酶的最高酶活为20100U/g,平均为19920U/g。     

一株产纤维素酶绿色木霉的筛选及发酵条件优化

从土壤中筛选到一株具有较高纤维素酶活性的绿色木霉，对其液态发酵条件进行了优化．以羧甲基纤维素钠为碳源，含量0．75％，(NH4)2SO4为氮源，含量0．4％，250mL三角瓶20％装量，5％接种量，培养基初始pH为4，28℃，180r／min培养96h，优化后发酵液中Cx酶活达到277.7U／mL发酵液．     

一株产纤维素酶的暹罗芽孢杆菌筛选及产酶条件优化

以一株来自海鱼肠道的暹罗芽孢杆菌(Bacillus siamensis)为出发菌株,进行紫外线诱变,诱变后通过平板初筛和摇瓶复筛,获得了五株纤维素酶高产菌株,其中菌株UV-30酶活最高,为0.082 1 U/g,较出发菌株(酶活为0.052 4 U/g)提高了56.68%.通过采用单因素和正交试验对该菌株产酶条件进行优化,结果表明最优发酵条件为:羧甲基纤维素钠1.25%,蛋白胨6%,产酶温度30℃,起始pH值8.0,装液量30%,接种量2.5%.以此条件发酵,酶活可达到0.168 6 U/g,为出发菌株的3.22倍,酶活显著提高,为该酶的进一步分离纯化及性质研究奠定了基础.     

高效表达AIM工程菌的发酵培养基及发酵条件优化

为了进一步提高工程菌的载脂蛋白AI米兰突变体(AIM)的表达量,降低发酵成本,通过碳氮源优化实验并结合正交实验筛选出该工程菌产AIM的最适培养基为(g/L):蔗糖10,酵母粉10,硫酸铵6和NaCl 10;最适发酵条件为:装液量30 mL,接种量8%,诱导时机A600 1.0,诱导剂浓度0.8 mmol/L,诱导时间6 h.在此优化的条件下,AIM的表达量为2.26 g/L,是未优化条件下的1.58倍.     

一株虫草类真菌的液体发酵产胞内多糖培养基的优化

采用液体发酵法培养虫草真菌菌丝体。以虫草真菌胞内多糖量为指标,通过单因素试验,表明玉米淀粉为最佳碳源,酵母粉为最佳氮源,酵母膏为最佳生物素,最适pH为7.0;正交试验表明最适虫草真菌产胞内多糖培养基配方为:玉米淀粉5%,酵母粉2%,酵母膏0.1%,KH2PO4 0.1%,MgSO4.7H2O 0.05%,pH 7.0。     

纤维素酶产生菌发酵条件研究

本试验以具有纤维素酶活力的黑曲霉诱变菌株为材料,研究了碳源、氮源、碳氮比、培养基起始pH值、接种量及发酵时间对该菌株产植酸酶活力的影响。结果表明,该菌株最适产酶pH为6.0;最佳接种量为10%（v/v）;最适碳源和氮源分别为麸皮和黄豆粉,且它们的最优比例为5∶1,最适发酵时间为60h。在最优的发酵条件下,筛选菌株产纤维素酶活可达168U/g。     

灰色链霉菌产链霉素发酵培养基的优化

通过单因素试验考察了发酵培养基中不同的碳、氮源对灰色链霉菌产链霉素的影响,在此基础上通过正交试验对发酵培养基中4种主要组分即复合碳源（葡萄糖和玉米淀粉混合物）、黄豆饼粉、硫酸铵、磷酸氢二钾的用量配比进行优化筛选。结果表明,发酵培养基中碳、氮源及主要无机盐的用量对发酵液中链霉素的产量均有显著影响,4种因素中对产量影响最大的是复合碳源浓度,其次是K2HPO4浓度,再次是氮源即黄豆饼粉和硫酸铵的浓度。优化得到的最佳发酵培养基组成为：黄豆饼粉2%、复合碳源4%（葡萄糖与玉米淀粉质量比为5:1）、硫酸铵0.6%、K2HPO4 0.05%、MgSO4•7H2O 0.075%、NaCl 0.2%、CaCO3 0.7%,pH7.8。     

产纤维素酶粗糙脉孢菌1602产酶条件优化

通过优化设计,确定纤维素高产菌株Neurosporacrassa1602摇瓶发酵最佳产酶条件为:培养液初始pH值为5.5,培养温度为28℃,摇瓶转速为150rpm,培养96h;300玉米芯粉、0.500麸皮酸水解液(0.6mol/L)能够促进产酶,最适宜的有机氮源为黄豆粉;最适宜的无机氮源为NH4HSO4.在最适发酵条件下,其纤维酶的活力CMCase为10.34IU/ml,FPase为0.71IU/ml.     

康氏木霉产酶发酵固体培养基优化研究

为利用廉价的培养基生产纤维素酶复合制剂，本实验采用培养基配方选择试验和双温度培养法对康氏木霉F244产酶特性进行了研究．在测定滤纸酶(FPA)、棉花酶、羧甲基纤维素酶(CMCase)、β-葡萄糖苷酶和果胶酶活力的基础上利用SPSS建立回归方程，全相关系数分别达到0．852，0．941，0．964，0．703，0．899，而后通过无约束规划求解找到最佳配方，并对酶活进行了预报和对比．结果表明：各酶活最大时对培养基各成分的含量要求不同；应用稻草粉质量分数20．3％，麸皮质量分数26．1％，(NH4)2SO4质量分数7．9％，水分质量分数45．7％的配方发酵时，F244的FPA、棉花酶、CMCase、β-葡萄糖苷酶、果胶酶活可望达14．1，20．1，43．9，21．6，16．8IU／g，基本与里氏木霉Q9414在其推荐培养基上的产酶水平相当，而且该配方用料来源广泛，成本低廉，工艺简单，产品安全无毒．     

黑曲霉液体发酵生产纤维素酶的研究

从土壤中分离得到一株产纤维素酶的黑曲霉菌株Ａｓｐ．ｎ－１３,采用二级液体发酵生产纤维酶;对液体发酵条件进行了研究,确定了发酵培养基配方。试验结果表明,滤纸酶活力最高达１６４Ｕ／ｍＬ,ＣＭＣ酶活力最高达２７２Ｕ／ｍＬ,最适发酵周期为７６－８４ｈ。     

根霉Rhizopus sp.TC1产酶条件的研究

根据要因实验原则,选择影响因子较大的因素进行实验,初步研究了根霉Rhizopussp.TC1的产酶条件.经实验确定优化产酶条件为:稻草∶麸皮=1∶1;固液比=1∶3;接种量9 mL种子液/100 g湿基;温度28℃,在此条件下发酵96 h,FPA和CMC酶活分别达到17.8 IU/g、187.0 IU/g,较优化前的12.3 IU/g、131.6 IU/g分别提高了45%和42%.     

响应面法优化萎缩芽孢杆菌BsR05发酵培养基

为了提高萎缩芽孢杆菌Bacillus atrophaeus BsR05发酵液的芽孢产量,采用响应面法对BsR05发酵培养基的最佳工艺条件进行了优化。通过Plackett-Burman实验,筛选出玉米粉、(NH_4)_2SO_4和MgSO_4·7H_2O为影响产孢的主要因子。采用最陡爬坡路径法确定3个因素的响应中心点及最适浓度范围,最后,通过Box-Behnken设计建立主要培养基成分与芽孢产量之间的回归关系,并确定发酵培养基最佳配方为葡萄糖5 g/L、玉米粉15.9 g/L、豆粕40.0 g/L、K_2HPO_4 3.0 g/L、KH_2PO_4 1.0 g/L、(NH_4)_2SO_4 2.1 g/L、MgSO_4·7H_2O 0.40 g/L、MnSO_4 0.02 g/L。经重复实验验证,平均芽孢含量与预测芽孢含量基本一致,发酵液中BsR05的芽孢产量从优化前的4.73×10~9 CFU/m L提高到6.02×10~9 CFU/m L。     

液态混合菌发酵优化纤维素酶组分

在里氏木霉和黑曲霉液态混合条件下培养纤维素酶,分析两个菌种的接种比和延迟黑曲霉的接种时间对产酶的影响,探讨两个菌种发挥协同作用的最佳条件。结果表明:黑曲霉延迟接种48 h及里氏木霉与黑曲霉接种质量比1∶1时,所产纤维素酶的滤纸酶活为1.163μmol/(min.mL);β-葡萄糖苷酶活为0.606μmol/(min.mL),β-葡萄糖苷酶活与滤纸酶活比值为0.521,比单一里氏木霉产纤维素酶的酶活高,并在后续的酶解效果对比中表现最佳。48 h时的酶解得率为65.61%,高于里氏木霉单一培养时所产纤维素酶的得率53.91%和商品纤维素酶的得率49.64%。说明通过混合发酵,纤维素酶的组分得到了优化。     

两性霉素B生产菌培养基成分及发酵条件

 两性霉素B是多烯类广谱抗真菌抗生素,已广泛应用于深部真菌感染。以结节链霉菌Streptomyces nodosus ZJB15076为出发菌种,对其发酵生产两性霉素B的培养基成分进行了优化,确定了较优的碳源和氮源及最适浓度：质量分数为葡萄糖4.5%、牛肉膏4%;在此基础上继续进行发酵条件的研究,确定了较优的发酵条件：发酵初始pH值为7.0,培养温度为28℃,装液量为40 mL/250 mL,接种量（体积分数）为2%。分析了在摇瓶内添加玻璃珠对两性霉素B产量的影响,研究结果表明,添加玻璃珠后能显著改善菌丝聚集情况并显著提高两性霉素B的产量,产量与对照组相比提高了341.1%,达到4563.2 mg/L。     

一株纤维素酶产生菌的固态发酵初步研究

用预处理的天然纤维素为碳源，从土壤中筛选出8株产纤维素酶能力较强的真菌，选取其中CMC糖化力(CMCase)和滤纸糖化力(FPA)均较高的JZ—H进行固态发酵实验，初步研究表明，该菌以杂草为碳源，(NH4)2S04和蛋白胨为氮源，500mL三角瓶装干料10g，自然pH，30℃培养96h，发酵物的CMcase达128．5IU／g，FPA达75．8U／g，蛋白质增加13．5％．     

不同条件对黑曲霉2产纤维素酶活性的影响

黑曲霉2是本实验筛选的一株具有降解有机废弃物的功能微生物,为进一步深入研究其产酶条件,提高应用效果,本研究基于现有研究结果,采用液体发酵培养法,分别测定了培养时间、接种菌龄、通气状况、初始pH、不同碳源底物对其产酶活性的影响。实验结果表明:黑曲霉2在采用原始菌株接种、基础培养基初始pH为6.5、每500mL摇瓶装量为150mL、发酵48h条件下产纤维素酶活性相对较高;同时采用不同碳源底物影响产纤维素酶活性,活性从高到低依次为木薯渣、中药渣、稻秸和糖泥。     

产碱性纤维素酶真菌产酶条件的研究

研究了碱性纤维素酶生产菌株镰刀霉菌(Fusarum Sp.)的产酶条件.结果表明:该菌株产碱性纤维素酶的适宜碳源为1%麦杆粉+1%可溶性淀粉,最适氮源为O.2%的(NH_4)_2SO_4加0.1%的酵母粉,接种量为5%,培养时间为72 h,培养温度为46℃,培养基初始pH为8.0.在最适宜的条件下,培养液中内切葡聚糖酶活力可达到1.29 IU/mL,而天然纤维素酶活力和滤纸酶活力却很低.具有这种组分结构的碱性纤维素酶系统在棉织品的生物整理及洗涤剂工业中具有良好的应用前景.     

重组脂肪酶自诱导发酵培养基优化

【目的】优化自动诱导发酵培养基,提高脂肪酶产量。【方法】通过对构建的一株转座子整合型脂肪酶重组菌株,采用自动诱导发酵表达方法,并结合CCD响应面实验设计方法,对自动诱导培养基中的碳源进行优化,获得了1个二次模型用于描述发酵培养基中碳源对产脂肪酶的影响。【结果】优化后的最适自动诱导培养基(W/V)组成为glycerol 2.596,glucose 0.035,lactose 1.289,tryptone 1.0,yeast extract 0.5,Na_2HPO_4·12H_2O 1.79,KH_2PO_4 0.68,NH_4Cl 0.267 5,Na_2SO_4 0.071,MgSO_4·7H_2O 0.05。【结论】发酵试验表明,最优碳源培养基的比活力为R_1=6.35U/mg,比初始发酵培养基提高近3倍。     

植酸酶工程菌产酶条件优化研究

为研究影响植酸酶酵母工程菌的产酶因素，利用摇瓶发酵对毕赤酵母工程菌产植酸酶的最佳甲醇诱导量、诱导时间等因素进行实验分析。结果显示，残留甘油、甲醇浓度、诱导培养时间对植酸酶生产具有重要影响，其中甘油残留会使植酸酶分泌时间延迟，1.5% 甲醇具有最佳诱导效果，在第2天酶活可以达到约1 100 U/mL，低浓度甲醇诱导产酶缓慢积累，而高浓度甲醇对菌体产生毒害。该研究为进一步优化植酸酶工程菌高密度发酵工艺奠定了基础。