细胞固定化条件对紫草细胞生产紫草色素的影响

以海藻胶做包埋剂,研究了固化液构成、细胞包埋量和胞龄对紫草色素合成的影响.结果表明:固定化细胞合成紫草色素的合适固化液为含有0.1 mol/L CaCl2的紫草色素生产培养基,该固化条件比较温和,并可长久保持固定化细胞活性;最适宜的细胞包埋质量分数为10%～20%;用于细胞包埋的最佳细胞生长时间为17 d.对紫草细胞固定化培养生产紫草色素过程的动力学特征进行了分析,建立了基质消耗和色素合成的动力学模型,并用该模型对实验数据进行了回归分析,实验数据与理论值之间具有比较令人满意的一致性.     

分子筛色谱法快速分离纯化细胞色素C

本法改变了透析法脱盐和离子交换柱层析等传统的分离纯化细胞色素Ｃ的繁琐过程，采用了分子筛色谱法脱盐和纯化．它具有简单、快速及纯度高的特点．     

细胞色素C的分子静电势研究

本文利用自制的计算机程序,计算了金枪鱼亚铁细胞色素C的分子静电势,并据此讨论了细胞色素C的结构和性能,得出了一些有意义的结果.     

细胞色素C/L-半胱氨酸修饰电极的电化学行为研究

采用自组装修饰法将细胞色素C修饰到以L-半胱氨酸为连接剂的金电极上,并运用循环伏安法(CV)、电化学阻抗法(EIS)等方法研究了该电极的电化学行为.测定了细胞色素C有关的电化学参数.     

细胞色素C修饰电极的制备和性能研究

通过自组装法,把血红蛋白细胞色素C固定于导电聚合物(聚谷氨酸)层,制作成一种微型生物传感器,检测其对过氧化氢和亚硝酸钠的响应.实验发现谷氨酸具有一定的电化学活性,循环伏安图在-0.35 V和-0.05 V出现一对氧化还原峰,而且细胞色素C修饰电极对亚硝酸钠响应所得循环伏安图表明,随着亚硝酸钠加入量增大,还原峰增大.通过吸附法修饰电极,把血红蛋白细胞色素C固定于电极表面,探究修饰电极在对苯二胺中的钝化情况.实验表明:细胞色素C修饰电极可以避免电极钝化的发生.细胞色素C作为一种蛋白酶,使对苯二胺处于氧化状态,从而防止电极表面膜的形成,避免电极钝化的发生.     

活性氧自由基对细胞色素C和肌红蛋白的作用

研究了过硫酸铵－Ｎ，Ｎ，Ｎ＇，Ｎ＇四甲基乙二胺（ＡＰ－ＴＥＭＥＤ）体系产生的活性氧自由基（超氧阴离子自由基（Ｏ２－）、羟基自由基（·ＯＨ））对细胞色素Ｃ和肌红蛋白的作用．结果表明，Ｏ２－可以将细胞色素Ｃ中的三价铁离子还原为二价铁离子，延长作用时间可使铁卟啉基团脱落；亦可使肌红蛋白中的铁卟啉脱落．与此同时，紫外可见吸收光谱发生了变化．圆二色谱的变化说明蛋白分子中的α－螺旋遭到破坏．植物Ｌ－ＳＯＤ对于该损伤有保护作用．     

细胞色素C的快速测定研究

用756分光光度计扫描测定细胞色素C，发现在315nm、415nm、520nm和550nm波长处有特征吸收峰；以细胞色素C的不同浓度分别对该四种波长下的光密度值回归，方程均为^↑y=a bx,a、b值各不相同；线性相关系数分别为r315=0.9915、r415=0.9835、r550=0.9977；从扫描波谱图形和线性相关系数比较，均以415nm波长效果最好，该法操作简便、快速、用药量小。     

反胶团法提取细胞色素－C

以细胞色素ｃ（ｃｙｔ－Ｃ）为对象，研究了水相ｐＨ值和离子强度对反胶团法萃取和反萃取ｃｙｔ－Ｃ的影响；讨论了不同种类的表面活性剂的萃取机理。研究结果表明，选择合适的体系及条件，反胶团提取是实现蛋白质分离提纯的有效方法。     

AOT／异辛烷萃取猪心细胞色素C的方法研究初探

用５０ｍｍｏｌ／ＬＡＯＴ反胶团系统在添加０．１ｍｏｌ／ＬＫＣｌ，ｐＨ７．５条件下萃取了猪心糜粗提液（Ⅰ）、ｐＨ７．５沉淀杂质蛋白后的提取液的滤液（Ⅱ）、硫酸铵（５００ｇ／Ｌ）盐析除杂蛋白的清液透析液（Ⅲ）、硫酸矮（５０ｇ／Ｌ）除杂蛋白的滤液并透析除盐的溶液（Ⅳ）、细胞色素Ｃ的三氯乙酸的沉淀物的饱和硫酸铵溶液透析除盐细胞色素Ｃ溶液（Ⅴ）中的细胞色素Ｃ。用１ｍｏｌ／ＬＫＣｌ、ｐＨ１３．０的水溶液对萃取有机相中的细胞色素Ｃ进行反萃取获得细胞色素Ｃ溶液。结果显示，ＡＯＴ反胶团系统能够将细胞色素Ｃ从猪心提取液中萃取到有机相中，并经调节离子强度和ｐＨ值又能将细胞色素Ｃ从有机相中反萃取到水溶液中。其萃取效率（％）分别为８６．９、７８．１、６３．１、４３．１和６。     

细胞色素C在葡聚糖修饰金电极上的直接电化学

本文对细胞色素C在葡聚糖修饰金电极上的直接电化学进行了研究,发现萄聚糖是细胞色素C电化学反应的有效促进剂,并对影响萄聚糖修饰金电极的稳定性的因素作了探讨.     

静电作用对细胞色素b5与细胞色素c之间电子传递的影响

研究了细胞色素b5 E44A,E56A,E44/56A,E44/48/56A/D60A及F35Y突变体蛋白与细胞色素c的结合和电子传递反应.细胞色素b5 E44/48/56A/D60A与细胞色素c结合反应没有显示出特征的紫外-可见差谱峰,这表明静电作用的改变对特征峰的形成产生了明显影响.对野生型细胞色素b5及其突变体蛋白与细胞色素c在不同温度和离子强度下电子传递速率的研究中发现,其电子传递速率的递变规律为:F35Y＞野生型＞E56A＞E44A＞E44/56A＞E44/48/56A/D60A.反应的活化熵和活化焓均无明显变化,表明这些残基突变没有给两蛋白间电子传递的结构造成大的改变.通过对电子传递速率随离子强度的变化趋势的研究表明,静电作用明显影响了电子传递过程.突变体蛋白F35Y以及E44/48/56A/D60A和野生型蛋白反应结果的显著差别,进一步确证了静电作用在电子传递过程中的重要作用.     

乙醇对细胞色素c和脱辅基细胞色素c的结构转换影响

用紫外－可见吸收光谱,荧光光谱和圆二色谱对细胞色素c和脱辅基细胞色素c在不同的φ（乙醇）溶液中的结构进行了表征。结果表明,乙醇对细胞色素c的α－螺旋二级结构影响很小,而对血红素配位的影响十分明显,可导致血红素Fe-Met80配位键断裂,另一方面,乙醇对脱辅基细胞色素c有明显的结构转换诱导作用,在φ（C2H5OH）＝0．55（乙醇／水）溶液中,脱辅基细胞色素c的α－螺旋结构含量可以达到全蛋白的89％,研究结果表明：负电荷微环境的诱导对脱辅基细胞色素c的结构转换并不是必要的,改变溶剂与脱辅基细胞色素c之间的疏水和氢键相互作用力也可以诱导脱辅基细胞色素cα-螺旋的形成。     

细胞色素C在醇修饰金电极上的直接电化学

细胞色素Ｃ是一种金属蛋白酶，在生物体内起着电子传递体的作用，细胞色素Ｃ在金属电极上的氧化还原反应极不可逆，但是它在促进剂修饰的电极上却显示出较高的可逆性。本对细胞色素Ｃ在丙三醇，乙二醇，甲醇等醇修饰金电极上的直接电化学反应进行了研究，发现不同的醇分子对细胞色素Ｃ的促进作用各不相同，结合糖分子的促进作用，探讨了醇上羟在数的多少对其促进作用的影响。     

鲇细胞色素b基因序列分析

对4个种群的鲇（Silurus asotus）的线粒体DNA（mitochondrial DNA,mtDNA）细胞色素b（cytochrome b,Cytb）基因片段的500bp序列进行测定,经Clustal X同源排序后得400bp序列．结果表明：鲇种群内碱基的变异较低,雅砻江和涣阳河种群均为0,岷江种群为0．25％,乌江种群为1．25％．雅砻江和澳阳河种群只有1种单倍型,岷江和乌江种群有2种单倍型但单倍型间变异位点很少．雅砻江和涣阳河种群内无变异位点,岷江种群仅有1个变异位点,乌江种群有5个变异位点．结论：细胞色素b基因在鲇种群内是比较保守的,种群间的变异较大．     

pH值对细胞色素C的反胶团萃取的影响

以AOT／异辛烷反胶团萃取不同pH值的猪心提取液中的cytC。结果表明：pH4－10范围内有不同的萃取效果，其中pH8－9的萃取率达到60％－75％，萃取水相中细胞色素C的特征吸收峰值下降或消失，萃取有机相的吸收光谱与提取原液的吸收光谱相似，并具有相同的吸收峰。说明在pH4-10之间均能用AOT／异辛烷萃取分离细胞色素C。