一株α－乙酰乳酸脱羧酶产生菌株的筛选及初步鉴定

α－乙酰乳脱酸羧酶在促进啤酒的风味成熟方面有广阔的应用前景．本文介绍一株纯培养的α－乙酸乳酸脱羧酶产生菌ＡＤ６的分离及筛选过程；并对该菌的特征及部分生理生化指标作了初步描述．     

乙酰乳酸合成酶与抑制剂ZJ0777及CIE的分子对接和分子动力学模拟

乙酰乳酸合成酶(Acetohydroxyacid synthase,AHAS)是植物和微生物体内3种支链氨基酸生物合成过程中影响第1阶段的关键性酶,已被广泛证实为除草剂的靶标.ZJ0777是一种新型的除草剂,具有与传统商业除草剂相当的除草活性,且具有低毒、低残留、高选择性等优点.使用分子对接方法研究了AHAS-ZJ0777复合物体系的作用模式,并与AHAS-CIE复合物晶体结构的作用模式作比较,发现二者的作用模式相似,对结合起关键作用的氨基酸均为Arg377,Trp574和Ser653.AHAS-CIE体系小分子蛋白质之间主要通过氢键相互作用,AHAS-ZJ0777体系中小分子蛋白质之间主要通过π-π堆积相互作用.对分子对接得到的复合物AHAS-ZJ0777及AHAS-CIE使用Amber程序进行1 135ps的MD模拟实验,随后使用MM-GBSA方法计算了抑制剂与蛋白质的结合能.结果表明,真空中的范德华力、静电作用和非极性溶剂化作用有利于抑制剂与AHAS的结合.本研究从理论上解释了新型ZJ0777分子的高效生物活性,为进一步设计和开发嘧啶苄胺类抑制剂提供了一定的理论指导.     

甲壳素脱乙酰酶产生菌的筛选及产酶条件

采用固体平板培养和液体发酵筛选产生甲壳素脱乙酰酶的真菌,并且研究了产酶条件.结果显示在42株真菌中有26株有甲壳素脱乙酰酶活性,最终确定了构巢曲霉和蓝色犁头霉两株产酶活性较高的菌株,它们产生的酶活性分别是343U.mL-1和289U.mL-1.不同的菌株的产酶培养基中的碳源均为含乙酰基的碳源,最适氮源分别为酵母粉和蛋白胨,产酶能力都受Mn2 和Co2 促进,受Cu2 、Fe2 、Fe3 的抑制;构巢曲霉的最适温度、最适pH分别为29℃,7.0~7.5,蓝色犁头霉的最适温度、最适pH分别为31℃,6.5~7.0,最适发酵时间均为96h.     

寡聚乳酸改性葡聚糖的合成及表征

设计了两种基于寡聚L-乳酸(OLL)改性葡聚糖的工艺路线:路线Ⅰ为OLL末端羟基活化后接枝葡聚糖;路线Ⅱ为在亲核试剂及偶合剂的存在下,OLL末端羧基接枝葡聚糖.研究表明,固定OLL与葡聚糖摩尔比,延长反应时间有利于提高路线Ⅰ的产品得率,而对路线Ⅱ中的产品得率几乎没有影响.1HNMR,IR,UV表征改性后产物显示OLL在葡聚糖上的接枝率(葡聚塘的100个葡萄糖单元上OLL的数目)可以通过调节反应物摩尔比得到有效的控制.     

聚二甲基二烯丙基氯化铵的合成,表征及抗菌性能

65％的二甲基二烯丙基氯化铵（DADMAC）单体水溶液通过自由基聚合得到分子量约为5000的聚二甲基二烯丙基氯化铵（PDADMAC）均聚物。用红外光谱，核磁共振，X射线衍射仪，粘度法和扫描电镜对PDADMAC进行结构分析和表征。合成聚合物的抗霉菌实验表明，PDADMAC对多种霉菌有抑制作用，具有较宽的抑菌谱；抗细菌实验表明，PDADMAC对金黄色葡萄球菌，大肠杆菌，枯草芽孢杆菌具有不同程度的抑制作用。     

青木香挥发油的化学成分分析及抗菌活性

采用GC-MS技术利用3种不同极性的毛细管柱分析了青木香挥发油的化学组成，确定了26种成分的化学结构与相埘含量，结果表明其挥发油主要由单萜组成，其中莰烯（23．98％）、异甲酸龙脑脂（19．40％）、Selina-1，3，7（11）-trien-8-one（10．24％）和龙脑（6．82％）是主要成分．对3种真菌和13种细菌（包括7种临床致病菌）的药敏实验表明，挥发油埘大部分微牛物均具有很好的抗菌作用，尤其埘革兰氏阳性菌的抗菌活性更强，其最低抑菌浓度（MIC）为0．04～0．31g／L，最低杀菌浓度（MBC）为0．08～2．5g／L．     

酸性矿坑水中一株兼性菌及其胞内聚合物的分离及表征

从取自江西德兴铜矿的酸性矿坑废水中分离出一株菌株（DX1-1），对其形态特征、生理生化、底物利用等特性进行了分析，结果表明该菌具有兼性菌的典型特征．该菌的生长温度范围是20～35℃，pH范围是2．0～5．0．提取该菌基因组DNA，扩增其16SRNA基因并进行序列测定，经系统发育分析确定该菌是一株Acidiphilium菌，进一步分析了其全细胞脂肪酸和DNA G＋C含量，中国典型培养物保藏中心将其定为隐藏嗜酸菌（Acidiphilium cryptum）．透射电镜显示该菌胞内可积累大量颗粒状聚合物．取该聚合物并进行红外、紫外吸收光谱检测，结果显示该聚合物具有聚-β-羟基丁酸酯（PHB）的典型特征．研究表明DX1-1菌株具有生产生物可降解材料（PHB）的潜力．     

阿牙克库木湖嗜盐菌的分离及功能酶的筛选

从新疆阿尔金山国家自然保护区阿牙克库木湖采集的泥样和水样中,分离培养了90株嗜盐菌,其中多数为中度和极端嗜盐菌,颜色以红色和白色为主,细胞形态多为杆状、球状,97％呈革兰氏阴性,研究结果表明该湖有着丰富的嗜盐微生物资源．对分离菌株进行了几种重要工业用酶的筛选,发现其中淀粉酶产生菌有4株,菌株AJ225和AJ243淀粉酶活性较高;蛋白酶产生菌有7株;脂肪酶生产菌有13株,菌株AJ238和AJ265具有较高的酶产量;在分离菌株中未检测到纤维素酶和木聚糖酶活性．     

羽裂蟹甲草挥发油的化学成分分析及抗菌活性研究

采用GC—MS技术，利用2种不同极性的毛细管柱分析了羽裂蟹甲草挥发油的化学组成，确定了31种成分的化学结构与相对含量，结果表明其挥发油主要由单萜、氧化单萜和倍半萜组成，其中倍半萜的含量32．1％尤其显著α-姜烯（13．49％）、大牦牛儿烯D（10．76％）、α-蒎烯（8．54％）、顺式丁香烯（6．36%）、芳樟醇（6．16％）、β-月桂烯（4．89％）、顺式β-罗勒烯（4．40％）和顺式罗勒烯酮（3．58％）是其主要成分．同时采用滤纸片琼脂平板扩散法和肉汤稀释法测试了其挥发油对2种真菌和12种细菌（包括6种临床致病菌）的抗菌活性．结果表明挥发油对大部分微生物均具有很好的抗菌作用，尤其对酵母菌、革兰氏阳性菌作用更强，其最低抑菌浓度（MIC）为0．16～5．00g／L，最低杀菌浓度（MBC）为0．16～5．00g／L．     

嗜盐古生菌AJ6的分离及系统发育分析

从新疆阿尔金山国家自然保护区阿牙克库木湖分离纯化得到嗜盐古生菌AJ6,革兰氏染色呈阴性、杆状、少数球形、菌体大小为0.2～0.6 μm×1.6～4.2 μm,最适NaCl和Mg2+质量浓度分别为15%和0.6%,在pH为6.0～7.0条件下生长良好.在此基础上,进一步通过PCR方法扩增了菌株AJ6的16S rRNA基因(16S rDNA),测定了该基因的核苷酸序列,并利用"Clustalw"软件和"PHYLIP"软件包分析16S rDNA序列,对其进行同源性比较和系统发育学分析,建立了嗜盐古细菌的系统发育树.结果表明菌株AJ6与Nnm.pallidum、Nnm.pellirubrum和Nnm.versiforme分在同一类群中,16S rDNA序列同源性分别为97.47%,96.44%和98.12%,菌株AJ6是Na-trinema属中的一个新成员,命名为Natrinema altuensis.菌株AJ6的1 6S rDNA序列已登陆到GenBank,其序列号为AY277584.     

密码子优化的人溶菌酶基因在毕赤酵母中的分泌表达及抗菌活性分析

人溶菌酶（human lysozyme,hLYZ）是一种天然活性蛋白质,具有抗菌性,目前主要应用于食品添加剂、动物饲料、药物治疗领域。根据毕赤酵母表达偏爱密码子特点,通过优化hlyz基因密码子,人工合成目的基因,构建了分泌表达载体pPIC9K-hlyz。通过电击转化法将pPIC9K-hly质粒重组至毕赤酵母GS115染色体中,经筛选得到重组毕赤酵母GS115-pPIC9K-hlyz。在28 ℃、pH 6.0、转速240 r·min^-1、1%甲醇诱导下表达120 h,发酵液上清酶活达到最高,为（2 414.9±108.1）U·mL^-1,蛋白浓度为166.7 μg·mL^-1。发酵液上清经过Sephadex G50纯化,获得较纯的hLYZ,经SDS-PAGE分析,在近14.7 kDa处显示单一条带。抗菌实验结果表明,重组hLYZ对革兰氏阳性菌的抗菌效果大于革兰氏阴性菌;重组hLYZ的抗菌效果是hLYZ标准品的10~20倍。     

临床使用抗生素存在的问题及对策--附154例围手术期抗菌药物使用情况分析

目的：通过观察医院术前 术后未使用抗菌药、仅术前使用抗菌药和术前 术后均使用抗菌药3组病人清洁手术的切口愈合情况,分析临床抗菌素应用情况,并对严格控制预防性应用抗生素的临床重要性作一探讨．方法：将3组病人术后情况进行统计分析．结果：3组病人切口愈合情况无显著性差异、结论：不合理使用抗生素的情况普遍存在,目前如何合理使用抗生素已成为各医院面临的严峻课题．     

图簇GS*(i)j1j2…jt(p,tkm)的伴随多项式的因式分解及色性分析

令S1,k表示k+1个顶点的星,Pm表示m个顶点的路,G是任意的p阶连通图.设V(Pm)={V1,V2,…,Vm-1,Vm}及相应的度序列为(1,2,…,2,1).SP(i)km+1表示把kPm的每个分支的第i个顶点Vi分别与星S1,k的k个1度点重迭后得到的图,用GS*(i)j1j2…jt(p,tkm)表示把tSP(i)km+1的每个分支的k度点分别与图G的顶点uj1,uj2,…,ujt(t≤p)重迭后得到的图,这里p≥1,k≥2,m≥3,1≤i≤m,t≥1.我们通过讨论图簇SP(i)km+1∪(k-1)K1、SP(i)2rm+1,SP(i)(2r-1)m+1以及GS*(i)j1j2…jt(p,2rmt),GS*(i)j1j2…jt(p,(2r-1)mt)的伴随多项式的因式分解,证明了它们的补图的色等价图的结构定理.推广了张秉儒证明的文[8]中的定理2和定理4.     

图Ψ*S*（4δ,nδ）∪tSδ*的伴随多项式的分解及色等价性分析

设Pn是具有n个顶点的路,Ψ*(4,n)表示把2P3的两个2度点分别与Pn的两个1度点重迭后得到的图,Sδ*(δ=rm+1)表示把rPm+1的每个分支的一个1度点重迭在一起得到的图。用PnSδ*表示把Pn的n个顶点与nSδ*的每一个分支的r度顶点依次重迭后得到的图,并用Ψ*S*(4δ,nδ)表示把图Ψ*(4,n)的n+4个顶点与(n+4)Sδ*的每一个分支的r度顶点依次重迭后得到的图。运用图的伴随多项式的性质,证明了图PnSδ*∪tSδ*与Ψ*S*(4δ,nδ)∪tSδ*的伴随多项式的因式分解定理,进而得到了这类图的补图的色等价图的结构特征。