依赖PQQ的甲醇脱氢酶与甘氨酸作用后的进程曲线

从革蓝氏阴性甲基营养菌Ｎｏ．２细胞提取的甲醇脱氢酶（ＭＤＨ）是一种氧化还原酶，已证明其辅基是新辅基ＰＱＱ（吡咯喹啉醌），笔者在研究ＭＤＨ及其辅基的理化性质过程中，发现甘氨酸（ｇｌｙ）对ＭＤＨ影响极为特殊，随后，以此为出发点得到的试验数据，对解释目前国...     

低温胁迫下PQQ对黄瓜幼苗子叶防御系统的影响

报道了低温胁迫下吡咯喹啉醌（ＰｙｒｒｏｌｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅＱｕｉｎｏｎｅ，ＰＱＱ）对黄瓜幼苗子叶超氧化物岐化酶（ＳＯＤ），抗坏血酸过氧化物酶（ＡｓＡＰＯＤ）和谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量的影响，并与常规的外源活性氧清除剂８－羟基喹啉（８－ＨＱ），抗坏血酸（ＡｓＡ）进行了比较．结果表明，ＰＱＱ能提高ＳＯＤ，ＡｓＡＰＯＤ活性，增加ＧＳＨ含量．缓解电解质泄漏，减缓质脂过氧化作用．ＰＱＱ可作为活性氧清除剂，调节生物体内自由基代谢平衡，提高植物的抗逆性．     

依赖新辅基PQQ甲醇脱氢酶的研究

生长在以甲醇作唯一碳源的甲基营养菌（Ｍｅｔｈｙｌｏｔｒｏｐｈｉｃｂａｃｔｅｒｉａ）Ｎｏ．２细胞,经超声波破碎,缓冲液抽提,ＤＥＡＥ－和ＣＭ－纤维素柱层析等纯化步骤,可得到纯化的甲醇脱氢酶（ＭＤＨ）,其比活力为５．７ｕ／ｍｇ．该酶进行不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳后,用相应的试剂分别染色,其蛋白质,酶活性和醌蛋白谱带均呈现一条迁移距离相同的主带．该酶由两个β亚基（６０ｋｂ）和两个α亚基（１０ｋｂ）构成,每个α亚基束缚一个新辅基ＰＱＱ（吡咯喹啉醌）．光谱分析显示,２９０ｎｍ有一肩峰,３４５ｎｍ有一特征峰,４００ｎｍ有一平台．这些数据表明,ＭＤＨ是一种依赖ＰＱＱ的醌酶     

漆树漆酶的催化氧化作用──Ⅵ．漆酶的催化氧化反应机理研究

在静止条件下，用分光光度法研究了底物２，３－二氰基－５，６－二卤氢醌（ＤＤＸＱＨ２，Ｘ＝Ｃｌ，Ｂｒ．Ｉ）的漆酶催化氧化反应，考察了底物离解与反应的关系，考察了半醌自由基的形成和衰减动力学，测定了不同ｐＨ条件下的表现反应速度常数（ｋｏｂｓｄ）、米氏常数（ｋｍ）、半醌自由基的形成速度常数（ｋｆ）和半醌自由基的衰减速度常数（ｋ２ｄ），探讨了环境对半醌自由基形成与衰减的影响，鉴定了反应最终产物的结构．结果证明：１）、底物的一级离解种是底物参与反应的必要形式；２）、半醌自由基阴离子是酶反应的直接产物；３）、半醌自由基的衰减是非酶的歧化反应，４）、由酶反应和非酶反应两部分构成的反应全过程是通过半醌自由基的形成和衰减作纽带联系着的，两个反应部分既独立又偶联，表现为一种特殊的连串反应属性．在此基础上，提出了邻、对苯二酚的漆酶催化氧化反应机理．     

微波热辐射仪信息检测乳腺癌的研究

微波热辐射仪信息检测乳腺癌的研究李也周，阎瑞民（武汉大学计算中心武汉４３００７２）（广州军区武汉总医院武汉４３００７１）李而周，向勋贤（湖北省肿瘤医院武汉４３００７０）（华中理工大学无线电系武汉４３００７４）关键词微波诊断，乳腺癌，热辐射分类号Ｒ７３...     

吡咯喹啉醌(PQQ)合成基因对PQQ产量的影响

将携带新辅基吡咯喹啉醌合成基因的克隆载体pRK310 经三亲本杂交,分别导入M.extorquens.AM1 及其突变体3b 和D2 中,可不同程度增加pqq 基因的拷贝数. 在基因复制水平构建了8 个工程菌,使PQQ产量提高了0.84～5.6 倍. 结果表明,结构上成簇的pqq 基因在功能上是密切相关、协调作用的,单个或部分pqq基因对PQQ合成的贡献是有限的,pqq 基因之间的比例和相互作用对PQQ 的合成量是有重要意义的.pqq 基因簇中起转录衰减作用的反向重复序列可能是pqq 基因正常转录所必需的.     

试剂8Q5SA8Q5S荧光光度法测定镓（Ⅱ）

用新合成的试剂７－（８’－羟基喹啉－５’磺酸偶氮）－８－羟基喹啉－５－磺酸荧光光度法测定镓的反应条件。镓（Ⅲ）与试剂与ＰＨ１．４（ＨＣｌ）形成１：３型红色配合物并呈现象荧光，荧光性质λｅｘ／λｅｍ（ｎｍ）＝５６０／５９０，线性范围０－１０μｇ／２５ｍＬ，检测限为０．ｎｇ／ｍＬ。     

1.8—二（8‘—羟喹啉）—3.6—二氧杂辛烷与硝酸银的配位

在无水乙酸乙酯中合成了开链冠醚１．８－二（８’－羟喹啉）－３．６－二氧杂辛烷（以Ｌ表示）与硝酸银的固体配合物。研究结果表明：配合物组成为：［Ａｇ４Ｌ３］（ＮＯ３３）４．属１：４型电解质，配体Ｌ主要以喹啉氮原子和芳醚氧原子与银配位。     

镍与新试剂8Q5SA8Q5S光度法的研究与应用

本文研究了新试剂７－（８＇－羟基喹啉－５＇－磺酸偶氮）－８－羟基喹啉－５－磺酸和镍的显色反应，结果表明：在ＰＨ为９．９０时，镍与试剂形成１：３的稳定的红色配合物。     

生物体内泛醌的种类及合成条件的探讨

通过薄层层析、高效液相色谱等方法对大肠杆菌、醇洒酵母、栗酒裂殖酵母和烟草等四种不同生物所含的泛醌（即辅酶Ｑ）进行了定性分析,确定了各种生物所含的泛醌种类,并利用表达泛醌合成基因的大肠杆菌培养过程澡泛醌含量的变化以及添加前体物质对提高大肠杆菌泛醌合成量进行了初步研究,确定了稳定生长前中期是生物体中泛醌含量最高时期引进泛醌合成的外源基因以及在培养其中添加０．１ｍＭ前体物质一对羟甲酸可以提高生物体内泛醌     

PQQ对四氯化碳和乙醇引起大鼠肝损伤的保护作用

将大鼠分成5组,采用灌胃方式,连续14d分别灌入PQQ－水溶液,PQQ-乙醇溶液,乙醇溶液和生理盐水溶液（阴性和阳性对照两组）,尔后,除阴性对照组外,均灌入CCL4,检测结果表明：PQQ可明显降低大鼠血清中GPT,GOT以及肝组织中MDA的含量,可减少轻肝细胞水变性,脂肪变性和肝细胞坏死的程度,由此说明：PQQ对CCl4和乙醇引起的肝损伤有一定的保护作用。     

槲寄生蛋白注射液细胞毒活性测定的MTT方法探讨

采用MTT比色法对体外培养的肿瘤细胞进行细胞毒作用实验，验证槲寄生蛋白注射液体外抗肿瘤效果．并且鉴定这种检测方法的有效性。实验结果表明槲寄生蛋白注射液有一定的体外抗肿瘤效果；MTT比色法是一种可用的体外细胞毒作用检测法，为新药品的开发提供了实验依据。     

单细胞克隆法快速筛选重组昆虫杆状病毒

首次采用显微操作系统挑取包含有重组病毒的单细胞，成功地获得了重组杆状病毒的单细胞克隆，并得到了重组病毒的纯培养．对有多角体的和无多角体的重组病毒细胞的挑取表明，这一方法对重组杆状病毒的筛选具有普遍适用性．我们发展的这一方法比常规的空斑技术简便、快速，只需两周左右即可完成重组病毒的筛选．     

杜仲内生真菌抗氧化活性

应用TBA反应法对从杜仲(Eucommia ulmoides Olive．)叶片中分离到的内生真菌刺孢壳Chaetomella sp．培养液提取物进行的抗氧化活性的测定表明该菌能够产生抗氧化活性成分，通过TLC和HPLC对抗氧化活性成分的分析表明其活性成分为黄酮类化合物。     

不需酶切位点的重叠延伸PCR在克隆表达中的应用

利用一种不需要酶切位点的重叠延伸PCR方法,将目的内含子片段插入LacZ报告基因中的任意位点,并对插入内含子片段的LacZ报告基因的活性进行分析,同时利用RT-PCR的方法对插入内含子的剪切效率进行检测。结果显示该方法可以在不加入额外碱基的情况下在DNA序列的特定位置插入目的DNA片段。并且该方法与In-Fusion克隆相比有一定的优越性。     

小鼠自身玫瑰花环形成试验条件及带瘤小鼠自身花环形成率的动态变化

本文研究了小鼠淋巴细胞自身玫瑰花环(AR)形成试验的条件,证明淋巴细胞与红细胞的比例以7:10,37℃温育后4℃自然沉降,不需加小牛血清,用自体或同种异体红细胞皆较适宜.对比小鼠的胸腺细胞与脾脏淋巴细胞,两者AR形成率无显著差异.检测小鼠带瘤过程中AR形成率的动态变化,证明早期带瘤鼠AR的数量与正常鼠接近;带瘤中期AR的数量显著降低,带瘤晚期AR的数量与正常值之间仍表现显著差异,但不再继续下降,基本保持中期的水平.文章认为,AR可以作为机体带瘤的一个参考性测定指标.文内讨论了AR的形成细胞作为胸腺后前体细胞,它在带瘤时的动态变化与淋巴细胞不同亚群的比势变化之间存在一定关系.     

高效建立129S1/SvImJ 小鼠胚胎干细胞方法的探讨

选取超排后129S1/SvImJ品系小鼠的优质囊胚,使用辐照后冻存复苏的小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,对比高浓度酶短时间消化法和低浓度酶长时间消化法,以0.25%胰酶-0.04%EDTA高浓度酶短时间消化法高效建立了4株小鼠胚胎干细胞系,建系率为36.31%.碱性磷酸酶,核型分析,体外分化和体内分化能力以及小鼠胚胎干细胞表面特异性分子标志0ct-4和Nanog的检测等表明,4个ES细胞系均为典型的小鼠胚胎干细胞系.所建立的ES细胞系为大规模培养ES细胞,进行后续的实验建立了理想的材料平台.     

人新型肿瘤坏死因子在E.coli中的 高效表达、纯化及诱导凋亡活性

采用PCR技术获得了新型的人肿瘤坏死因子基因,在153位氨基酸处引入突变,使Gly突变为Leu.将突变体hTNF基因克隆到表达载体pQE30中,SDS-PAGE结果显示经IPTG诱导后,hTNF基因获得大量表达.通过Ni金属鳌合层析柱亲和层析获得到纯化的hTNF融合蛋白,Westernblot结果表明hTNF蛋白可与抗TNF的抗血清发生特异性反应.荧光染色实验检测了hTNF蛋白诱导细胞发生凋亡的活性.