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以人血清白蛋白为固定相的分子生物色谱分析几种中药活性成分的研究 总被引:11,自引:0,他引:11
提出用人血清白蛋白分子生物色谱分析中药活性成分的方法,分别比较了当归等4种单味中药的分离结果,考察了提取当归的3种溶剂及提取时间对活性物质提取量的影响,同时建立了当归中阿魏酸与藁本内酯的定量分析方法. 相似文献
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研究中药活性成分与血清白蛋白的相互作用对考察中药成分在人体中的吸收、分布、代谢、排泄和毒性具有重要的意义.本文综述了近几年来该领域的研究成果和进展及所采用的主要技术和方法(包括紫外可见吸收光谱法、荧光光谱法、圆二色谱法、红外光谱法及分子模拟法等)在这方面的应用情况.对两者之间相互作用的机理、结合常数和作用力类型及中药活... 相似文献
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以大孔硅胶为基质,采用羰基咪唑法合成了人血清白蛋白(HSA)生物色谱填料。详细评价了该填料对药物的分离性能,温度和pH对药物保留的影响。结果表明,该种生物色谱填料的分离性能优良,可以在短时间内基线分离4种药物分子。用HSA色谱柱对铁棒锤中有效成分进行了分离,通过LC-MS分析结果显示,该色谱柱可以分离出其中4种活性成分(脱乙酰去氧乌头碱、苯甲酰脱氧乌头碱、乌头原碱、16-O-去甲基乌头次碱)。 相似文献
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基因工程技术已经成为研究和生产重组人血清白蛋白(rHSA)替代人血清白蛋白(HSA)的重点技术,而白蛋白的纯化则是该技术的关键。本文主要介绍了从转基因猪血中纯化rHSA的一种新方法,即热乙醇沉淀与多级色谱分离相结合的rHSA纯化方法。热乙醇沉淀法可从猪血浆中获得rHSA粗提取液,此时rHSA的纯度可达69.5%,回收率达51.3%。进一步采用多级色谱分离法,即阴离子交换色谱和反相色谱法进一步纯化,得到rHSA的最终纯度约为100.0%,总回收率为41.1%。该方法为从转基因猪血浆中大规模纯化用于临床和生化研究的高纯度rHSA提供可能,同时也为rHSA替代HSA奠定了基础。 相似文献
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一种新的PEG凝聚人血清白蛋白液相压电免疫传感器 总被引:4,自引:0,他引:4
以PEG为乳剂,建立了一种基于PEG凝集的液相压电免疫分析法,并用于人血清白蛋白(Alb)的测定。详细考察了PEG浓度,抗体稀释度、PEG分子量及反应温度等因素对频移的影响,采用终点法和初始速率法测得Alb线性范围分别为47.83-103.1mg/L和40.62-101.2mg/L。对7个血清样本的分析,其结果与双缩脲法基本一致。用一简单的方法合晶振再生后可获得重视的结果。 相似文献
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人血清白蛋白柱上药物的手性拆分 总被引:3,自引:0,他引:3
考察了4种酸性药物和1种中性药物对映体在人血清白蛋白手性固定相上的保留行为。这5种药物与人血清白蛋白结合的亲和力高,难于实现快速分离,作者提出在流动相中加入短链脂肪酸-正己酸,可快速手性拆分非诺洛芬、萘普生和布洛芬。酮基布洛芬对映体分离选择性随乙腈浓度升高而增大,流动相中加入适量异丙醇可使对映体选择性大大增加(α~1.23),华法令同样可取得很好分离。 相似文献
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人血清白蛋白是人体中一种最丰富的血浆蛋白质,是主要的脂肪酸和外源性分子如药物等的转运载体。由于大多数药物需要结合白蛋白被运输到靶组织和器官,白蛋白对于药物的代谢动力学和递送起到关键作用。40多年来,白蛋白与小分子化合物的相互作用一直是国内、外的研究热点。此外,白蛋白作为药物载体被广泛地研究和应用。因此,本文将从蛋白质结构层面上综述白蛋白和白蛋白复合物的相关知识,提出白蛋白相关研究领域的一些未来挑战。 相似文献
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金属—血清白蛋白的结构研究(Ⅷ):HSA和BSA中锌离子中心的… 总被引:4,自引:0,他引:4
荧光EXAFS数据证实,在HSA和BSA中,锌离子与第一配位层原子的核间距分别为0.201jm和0.203nm,配位数近似为4,很可能为4个氮原子配位,胱氨酸硫原子参与配位的可能性基本排除。 相似文献
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抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶与人血清白蛋白相互作用的热力学研究 总被引:1,自引:0,他引:1
在298.15 K下,根据本结合过程的假设和Langmuir结合理论, 用等温滴定微量热和圆二色谱分析法研究了抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶(5-FU)与人血清白蛋白(HSA)的相互作用. 研究结果表明, 蛋白质(HSA)与药物配体5-氟尿嘧啶的相互作用存在两类结合位点. 第一类结合, 结合位点数N=71±0.1, 结合常数 K=(1.46±0.016)×105 L•mol-1, 结合焓ΔH=(39.61±0.220) kJ•mol-1, 结合熵ΔS=(231.68±0.025) J•mol-1•K-1, 结合自由能ΔG=(-29.48±0.030) kJ•mol-1. 结合过程为熵驱动过程, 疏水相互作用是过程的主要推动力;第二类结合, 结合位点数N=140±0.2, 结合常数 K=(1.49±0.032)×105 L•mol-1, 结合焓ΔH=(-19.31±0.103) kJ•mol-1, 结合熵ΔS=(34.30±0.055) J•mol-1•K-1, 结合自由能ΔG=(-29.53±0.041) kJ•mol-1, 结合过程为焓-熵协同驱动过程, 氢键和静电相互作用是过程的主要推动力. 圆二色谱分析结果表明, 在两类结合过程中, 药物5-氟尿嘧啶(5-FU)的作用致使蛋白质(HSA)二级结构单元的相对含量发生了变化. 相似文献
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采用离心超滤质谱技术从川乌总生物碱提取物中筛选与人血清白蛋白相互作用的乌头类生物碱成分,并用LC-MSn技术对筛选出的活性成分进行了分离鉴定.结果表明,从川乌总生物碱中筛选并鉴定出9种与人血清白蛋白存在相互作用的乌头类生物碱:苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、10-OH-中乌头碱、中乌头碱、10-OH-乌头碱、乌头碱、次乌头碱、脱氧乌头碱和3,13-脱氧乌头碱. 相似文献
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采用毛细管区带电泳(CZE)技术,研究了盐酸普罗帕酮(propafenone hydrochloride)与人血清白蛋白(HSA)的结合作用机制。在以硼砂-碳酸氢钠(pH10,50mmol/L)为运行缓冲溶液,运行电压17kV,进样时间12s,紫外检测器(214 nm)的条件下检测,结合常数和结合位点数在298K和310K分别为心。=2.24×10^7 L·mol^-1,n298k=1.2及K310k=3.12×10^7 L·mol^-1,n310K=1.3。同时运用荧光光谱研究了盐酸普罗帕酮与人血清白蛋白的结合作用机制;并从热力学参数推得了药物分子与人血清白蛋白分子间的作用力类型等分子间的相互作用信息。 相似文献
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采用荧光光谱法,紫外光谱法以及圆二色谱法研究了具抗凝血作用的水杨酸钕((NdL′3.2H2O,L′=水杨酸离子))、华法灵钕(NdL3.2H2O,L=华法灵离子)和华法灵水杨酸钕(NdL2L′.2H2O)3种配合物与人血清白蛋白的相互作用。结果表明:配合物对人血清白蛋白(HSA)的荧光产生猝灭现象;配合物的存在使得HSA紫外吸收光谱的强度增加;配合物的存在也对HSA的构象产生影响。水杨酸钕的猝灭方式为动态与静态猝灭,而华法灵钕和华法灵水杨酸钕的猝灭方式属于两者之间生成了不发荧光的复合物而导致的静态猝灭。并分别确定了它们的结合力类型:华法灵钕与HSA之间主要作用力是静电作用力;水杨酸钕与HSA之间主要作用力为典型的疏水作用力;华法灵水杨酸钕与HSA之间为氢键和范德华力。计算了配合物与人血清白蛋白的结合常数K和结合位点数n。 相似文献
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用荧光、紫外等分子光谱法研究了美他环素(MC)与人血清白蛋白(HSA)的相互作用,考察了不同温度下MC与HSA的结合常数KA和结合位点数n,同时研究了Cu2+,Al3+,Pb2+,Ca2+和K+等金属离子对MC与HSA的结合性质的影响.基于F rster偶极-偶极非辐射能量转移机理确定了荧光给体HSA与受体MC间的结合距离. 相似文献
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本文通过用差示扫描量热法(DSC)、动态光散射(DLS)和圆二色谱(CD)检测不同p H下人血清白蛋白(HSA)的结构,并观察其随p H变化的可逆性,以探讨不同p H对HSA结构的影响及HSA结构在p H变化下的可逆性。结果表明,p H7.0条件下HSA的热稳定性最好,热变性温度(Tm)为68.17±0.06℃,不同p H条件下HSA三级结构均发生了一定程度的改变,酸性和碱性条件下的HSA调回p H7.0后变性温度接近于p H7.0条件下的Tm值。不同p H条件下的粒径相对于p H7.0条件下增大,调回p H7.0后减小。CD实验表明了p H对HSA二级结构的影响。HSA结构在不同p H下调回中性条件时会重新折叠,但不能恢复中性条件下的结构状态。 相似文献