基于汞离子氧化作用的硫胺素液滴光化学传感器研究

利用停留荧光反应速率法测定硫胺素 (维生素 B1,VB1)操作简便且省时 [1,2 ] ,但在测试中仍需使用流通池 ,本实验室自行研制了多通道液滴光化学传感装置 ,利用该装置已成功地进行了溶液中微量DNA[3]、硝基酚 [4 ]及金属离子 [5]的检测 ,Cr6 的绝对质量检测下限可达到飞摩尔级 .     

改进溶胶-凝胶法固定酶结构剖析及在苯酚光化学传感器中的应用

通过光学显微镜比较了用密闭老化法和浸涂法制备的溶胶凝胶膜的表面状态,从实验上证实了用密闭老化法制备的溶胶凝胶膜不会破裂;并用透射电子显微镜观察了包埋辣根过氧化物酶的溶胶凝胶膜的内部结构.结果表明,酶固定于溶胶凝胶中后,与在溶液中一样,呈均匀分布且不易流失.此敏感膜可用于制备基于化学发光强度减弱的苯酚光化学传感器;用竞争反应的原理讨论了响应机理.     

酶生物传感器中酶的固定化技术

综述了近年来国内外酶生物传感器的进展,介绍了制作酶生物传感器的关键技术——酶的固定化。固定化方法主要有吸附法、包埋法、共价键合法和交联法。固定化材料分为无机材料、有机聚合物材料、凝胶以及生物材料等。探讨了固定化方法和固定化材料对酶的固定化及酶生物传感器性能的影响,并结合自己的工作展望了酶生物传感器的发展方向和趋势。     

纳米增强型毛细管酶柱用于葡萄糖液滴生物传感器的研究

葡萄糖的检测在临床医学以及食品工业等领域中十分重要.以往的检测方法主要包括化学发光法_{[1]、吸光光度法[2]、电化学法[3]和荧光法[4]等.固定化酶柱的制作是发展葡萄糖传感器的关键技术之一.传统的固定化方法主要是将具有生物活性的酶通过物理吸附、共价键合和交联的方法固定于载体基质上或包埋于有机聚合物的基质中.近期研究[5,6]表明,采用溶胶凝胶(Sol-gel)法将蛋白质和酶等生物活性物质包埋于无机陶瓷或玻璃材料内,保持生物组分的活性,且SiO2作为基质材料具有较好的坚固性、抗磨性、化学惰性以及高的光稳定性和透过性,但目前该法多用于电化学型生物传感器[7,8].本文利用纳米颗粒的比表面积大和吸附能力强等特点,将酶吸附在SiO2纳米颗粒表面,用易成膜的聚乙烯醇缩丁醛(PVB)作辅助基质在毛细管上固定酶,并采用分立式酶柱,克服了以往混合型酶柱普遍存在的酶促效率不高和使用寿命较短的局限性.所制得的酶柱具有表面反应活性高、表面活性中心多和催化效率高等特点.结合自行设计的液滴光化学传感装置[9,10],建立了一种高效、快速、微量的葡萄糖实时检测方法.}     

液滴光池的荧光光化学传感器研究

基于荧光熄灭原理 ,自制一种液滴传感装置 ,采用蠕动泵自动进液 ,定时微机控制处理。试验发现 3,3′ ,5 ,5′ 四甲基联苯胺二盐酸盐 (TMB d)具有非常强的荧光 ,其荧光信号在不同的条件下能被过氧化氢熄灭 ,而且荧光信号的强度与样品浓度在一定范围内呈线性关系。选取最佳的试验条件 ,测得过氧化氢的线性响应范围为 3.2 2× 10 - 7～ 3.33× 10 - 4mol·L- 1,检出限为 3 3× 10 - 10 mol·L- 1。利用日立 85 0型荧光分光光度仪作静态分析比较 ,可得相似的响应现象     

改进溶胶—凝胶法固定酶结构剖析及在苯酚光化学传感器？…

通过光学显微镜比较了用密闭老化法和浸涂法制备的溶胶－凝胶膜的表面状态,从实验上证实了用密闭老化法制备的溶胶－凝胶膜不会破裂,并用透射电子显微镜了包埋根过氧化物酶的溶胶－凝胶膜的内部结构。     

溶胶-凝胶法固定化酶的问题与解决途径

综述了溶胶-凝胶固定化酶由于凝胶化时间过长，凝胶孔径偏小以及凝胶机械强度低等问题的存在引起酶构象改变、屏蔽，底物与产物的扩散速率慢以及酶与底物的不易接触。并提出了相应的解决办法：选择适宜的前驱体及固定化条件可以缩短凝胶化时间；加入聚乙二醇改性剂、非表面活性剂模板剂可以调大凝胶的孔径；微波快速干燥。加入添加剂则可以提高凝胶的机械强度。同时也提出可以避免酶变性的其他一些途径，如对凝胶老化阶段的特殊处理，选择合适的缓冲液等。     

游离和溶胶-凝胶固定化甲醛脱氢酶酶促反应动力学的研究

采用溶胶-凝胶法对甲醛脱氢酶进行固定化，酶的包埋率超过了98％．在pH7附近、37℃下，以游离酶和固定化酶作催化剂，NADH为电子供体，进行了甲酸转化为甲醛的酶促反应．游离和固定化甲醛脱氢酶酶促反应都遵循Michaelis-Menten反应机理，用Dalziel提出的双底物酶促反应动力学方程进行拟合．固定化酶酶促反应速率为游离酶酶促反应速率的50％左右．固定化酶的动力学常数φ和米氏常数K高于游离酶，估计是凝胶基质孔中存在扩散效应所致．     

电聚高分子膜固定化酶生物传感器及其进展

本文将电化学聚合高分子膜固定膜酶制备的生物传感器分为以下三种主要类型，并分别 就其发展概况和发展方向进行了评述。即：以溶解氧为电子受体的的生物传感器（第一代电流型生物传感器）；以非氧介全为电子受体的生物传感器（第二代电流型生物传感器）和电子在酶和聚合高分膜之间直接进行转移的传感器（第三代电流型生物传感器）。     

溶胶凝胶法制备固定化酶柱并应用于化学发光型的葡萄糖传感器

溶胶凝胶过程以期纯度高,均匀性强,处理温度低,反应条件易于控制等优点成为生物传感器中一种颇具前途的固化方法。利用硅酸乙酯的溶胶凝胶化过程对葡萄糖氧化酶进行固化,并制备了不同载体下的ＧＯＤ酶柱。实验结果表明ＧＯＤ可在ＳｉＯ２的溶胶凝胶体中保持较高的活性。     

A Selective Determination of Hypoxanthine,Xanthine and Inosine by Reversed-Phase Liquid Chromatography Coupled with Enzyme Reactors

Abstract

A Selective and sensitive assay of hypoxyanthine, xanthine and inosine by reversed-phase liquid chromatography coupled with immobilized enzyme reactors is described. The flourometric detection of hydrogen peroxide using immobilized peroxidase and p-hydroxyphenylacetic acid was applied to the assay of hypoxanthine, xanthine and inosine, which were oxidized to hydrogen peroxide in the presence of the immobilized enzymes (purine nucleoside phosphorylase and/or xanthine oxidase. The enzymes were immobilized the the intermolecular cross-linking method on controlled pore-glass. The method established was applied to serum and urine samples. The detection limits of hypoxanthine, xanthine and inosine were approximately 130, 300 and 650 pg per injection, respectively.     

Broad-Range Optical pH Sensor Based on Binary Mixed-Indicator Doped Sol-Gel Film and Application of Artificial Neural Network

Abstract

In this article, we constructed a pH optical sensor based on m-cresol purple/bromocresol green mixed indicators. The sensor possessed different behaviors at various pH values from ?1.04 to 8.70. The observed behaviors were modeled by means of a PC-feed-forward artificial neural network (ANN) with back-propagation training algorithm. The resulting ANN model was used to predict pH values of new measured spectra from unknown solutions. The results showed very good agreement between true and predicted pH values. The sensor revealed no leaching and excellent reversibility. Other advantages of the sensor include rapid response time, long-term stability, reversibility, high sensitivity, and little hysteresis effect.     

Lab‐on‐a‐Chip Biosensor for Glucose Based on a Packed Immobilized Enzyme Reactor

In this work, the development of a packed immobilized enzyme reactor (IMER) and its integration to a capillary electrophoresis microchip is described. The present microchip design differs from others, in the fact that the same design could be used with or without the particles and, just by changing the material used to pack the IMER, different analytes can be detected. The applied procedure involves the separation of the target analyte by capillary electrophoresis (CE), which is then coupled to a post‐column IMER that produces H₂O₂. The H₂O₂ produced is finally detected downstream at the surface of a working electrode. Glucose was detected above 100 μM by packing particles modified with glucose oxidase at the end of the separation channel. The analytical performance of the microchip‐CE has been demonstrated by performing the separation and detection of glucose and noradrenaline. Additions of fructose showed no effect on either the peak position or the peak magnitude of glucose. The microchip‐CE‐IMER was also used to quantify glucose in carbonated beverages with good agreement with other reports.     

高效液相色谱中固定酶柱后反应器的应用

本文评述了固定酶柱后反应器在高效液相色谱中的应用。阐述了高效液相色谱与固定酶柱后反应器联用的原理,介绍了固定酶柱后反应器的主要类型。评述了固定酶柱后反应器在生化分析和临床分析中的应用。引文43篇。     

基于纳米金和硫堇固定酶的过氧化氢生物传感器

在铂电极上自组装一层纳米金(GNs), 构建负电荷的界面, 然后通过金-硫、金-氮共价键合作用和静电吸附作用自组装一层阳离子电子媒介体硫堇(Thio). 再以同样的作用自组装一层GNs和辣根过氧化酶(HRP)的混合物, 最后在电极最外层滴加一层疏水性聚合物壳聚糖(Chit), 由此制备了一种新型的过氧化氢生物传感器. 研究了工作电位、检测底液pH、温度对响应电流的影响, 以及GNs和HRP之间的相互作用, 探讨了传感器的表面形态、交流阻抗、重现性和稳定性. 该传感器的酶催化反应活化能为12.4 kJ/mol, 表观米氏常数为6.5×10^－4 mo/L, 在优化的实验条件下, 所研制的传感器对H₂O₂的线性范围为5.6×10^－5～2.6×10^－3 mol/L, 检出限为1.5×10^－5 mol/L. 应用此方法制备了HRP和葡萄糖氧化酶(GOD)双酶体系葡萄糖生物传感器, 并应用于实验样品葡萄糖含量的测定.     

二醋酸纤维素-离子液体膜固定肌红蛋白制备过氧化氢传感器

将二醋酸纤维素(CDA)-(1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐离子液体)([bmim]BF4)-肌红蛋白(Mb)的复合物修饰在玻碳电极(GCE)表面,制备了一种新型Mb修饰电极(CDA-[bmim]BF4-Mb/GCE).光谱分析表明:固定在CDA- [bmim]BF4-Mb膜中的肌红蛋白保持了其天然构象和生物活性.离子...     

固定化酶反应器及其在蛋白质组研究中的应用

综述了近年来国内外酶固定化载体的研究进展,侧重于无机材料和有机聚合物材料上的固定化酶方法;此外,也介绍了固定化胰蛋白酶反应器与分离系统联用在蛋白质样品分析中的应用,并展望了固定化酶反应器的研究方向及其在蛋白质组中的应用前景。     

生物素标识酶在生物传感器中的应用研究

利用生物素与亲合素之间的特异性结合,在恒电位下,首先将亲合素吸附在电极上,然后使标识在生物素上的葡萄糖氧化酶固定于电极表面,制成具有高活性的多层固定化酶的葡萄糖传感器。电极线性范围:1.0×10^-5～1.0×10^-2mol/L,检测限:6.0×10^-6mol/L,响应时间:6s.本传感器具有线性范围宽、灵敏度高、响应速度快、可反复活化使用等优点。     

Determination of Catechol by a Novel Laccase Biosensor Based on Zinc-Oxide Sol-Gel

A biosensor was fabricated by incorporating laccase in a ZnO sol-gel with chitosan as a matrix for the determination of catechol. The ZnO nanoparticles were characterized by X-ray diffraction and atomic force microscopy. The conductivity of the chitosan/ZnO/glassy carbon electrode film was investigated by alternating current impedance. The biosensor was employed to monitor the reduction of catechol, and the peak current increased linearly with concentration between 1.0 × 10^?6 and 1.0 × 10^?4 mole per liter with a limit of detection of 2.9 × 10^?7 mole per liter. The laccase biosensor exhibited good stability, reproducibility, and some selectivity.