10-羟基喜树碱的光谱性质、抗肿瘤活性及应用于细胞标记研究

通过紫外-可见光谱、荧光光谱和红外光谱等方法研究了药物10-羟基喜树碱(HCPT)的光谱性质.采用溴化噻唑蓝四氮唑(MTT)法测定了HCPT对3种肿瘤细胞(HeLa,MCF-7和HT1080)的抗肿瘤活性,其IC50值分别为16.37,16.73和19.24μg/mL.测定了HCPT对正常细胞人胚肾细胞系HEK293T的生长抑制活性,最高抑制率达88.72%,表明正常细胞比3种肿瘤细胞对药物HCPT更敏感.以HeLa细胞为模型,利用Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒研究了HCPT的抗肿瘤作用机制,发现几乎所有细胞均同时被Annexin V-FITC和碘化丙啶(PI)染色,细胞膜为绿色,而细胞核为红色,表明HCPT诱导了HeLa细胞的晚期凋亡.通过荧光显微镜观察了HCPT在HeLa细胞中的分布,为其在细胞标记中的应用提供了科学依据.     

新型20(S)-O-取代苯甲酸-7-苯甲酰基喜树碱酯的合成及其抗肿瘤活性

以20(S)-喜树碱为起始原料,对其进行结构修饰,在7-位导入苯甲酰基,在20-位羟基上导入取代苯甲酰基,设计并合成了11个新的20(S）-O-取代苯甲酸-7-苯甲酰基喜树碱酯化合物（4a~4k）,其结构经¹H NMR, IR,MS(ESI)和元素分析表征。采用MTT法初步考察了目标化合物4a～4j对人胃癌细胞（BGC-823）、人乳腺癌细胞（MDA-MB-231）、人肺腺癌细胞（H460）及人肝癌细胞（Bel-7404）的体外抑制活性。结果表明：化合物4a、 4g和4h具有一定的体外抑瘤活性。在药物浓度为10 μmol·L^-1时,4a对MDA-MB-231细胞和H460细胞的抑制率分别为50.42%和54.40%, 4g〗对MDA-MB-231细胞的抑制率为69.91%, 4h对H460细胞抑制率为52.34%。     

荧光法研究7-乙基喜树碱、10-羟基喜树碱和牛血清白蛋白的相互作用

采用荧光光谱法、分光光度法研究7-乙基喜树碱(7-ECPT)和10-羟基喜树碱(10-HCPT)与牛血清白蛋白(BSA)相互结合反应.实验表明,喜树碱类药物与BSA的相互结合作用为单一的静态猝灭过程,在溶液中二者以摩尔比11牢固结合,其结合反应的平衡常数K0分别为K0,7-ECPT=3.69×105 L·mol-1、K0,10-HCPT=8.00×105 L·mol-1.根据F(o)rster非辐射能量转移机理,求算了给体(BSA)与受体(喜树碱类药物)间距离r和能量转移效率E分别为r7-ECPT=3.03nm、r10-HCPT=3.27 nm、E7-ECPT=0.48、E10-HCPT =0.31.并推测了二者之间的主要作用力.     

20(S)-O-取代苯甲酸-7-乙基喜树碱酯类化合物的合成及其抗肿瘤活性

在AcOH/98％ H2S04体系中,喜树碱和正丙醛经烷基化反应制得7-乙基喜树碱(2);以1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐为脱水剂,4-二甲氨基吡啶为催化剂,2与取代苯甲酸直接酯化合成了一系列新型的20(S)-O-取代苯甲酸-7-乙基喜树碱酯类化合物(4a -4k),其结构经1H NMR,IR和MS表征.采用MTT法初步考察了4a～4k对人肺癌细胞(LLC-E9FP),人肺腺癌细胞(95D),人胃癌细胞(BGC-803),人胃癌细胞( HGC-27)和人肝癌细胞(7721)的抑制活性.结果表明,4b和4e对LLC-E9FP具有明显强于喜树碱的抑制活性;4h～4k对HGC-27,95D,7721也有明显的抑制活性.     

8-羟基喹啉-7-醛缩氨基硫脲衍生物的微波合成及抗肿瘤活性研究

以8-羟基喹啉-7-醛和一系列芳基及烷基取代氨基硫脲为原料,合成了15种8-羟基喹啉缩氨基硫脲类化合物。缩合反应在绿色溶剂水中进行,微波辐射下15-30 min内反应完全,操作简单,收率高。化合物结构经1H NMR、IR和高分辨质谱确证。部分化合物经抗肿瘤活性初步测试结果表明,多数化合物对细胞周期分裂蛋白25B(CDC25B)抑制率达到90%以上,具有潜在的抗肿瘤活性。     

7(6)-羟基黄酮衍生物的合成及初步抗肿瘤活性研究

以间苯二酚和对苯二酚为起始原料,经过傅克酰化、Baker-Venkataraman重排、关环三步反应分别得到5个7-羟基黄酮和5个6-羟基黄酮类化合物.试验结果发现,这些化合物溶解性能不好,生物活性不高,因此,对这些化合物又经过苯甲酰化并将7-羟基黄酮与1-氯-3-溴丙烷首先发生亲核取代反应,然后和诺氟沙星在丙酮中反应生成化合物13,总共得到了5个结构新颖的黄酮和4个未见文献报道的β-丙二酮类化合物.通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法对19个化合物的抑制人宫颈癌细胞Hela活性进行了体外评价,结果表明:化合物13的半数抑制浓度IC50为19.4μmol/L,具有深入研究的价值.     

10-羟基喜树碱氨基酸缀合物的合成及抗肿瘤活性研究

以10-羟基喜树碱为原料,通过两碳边链链接,合成了一系列10-羟基喜树碱氨基酸缀合物和9-硝基-10-羟基喜树碱氨基酸缀合物.采用CCK-8法测试了合成化合物体外对人口腔鳞癌细胞KB、人肝癌细胞HepG2和小鼠结肠癌细胞C26三组细胞株的增殖抑制活性,结果表明部分目标化合物对所选肿瘤细胞株显示了潜在的抑制活性,其中10-羟基喜树碱氨基酸缀合物的体外活性明显优于9-硝基-10-羟基喜树碱氨基酸缀合物的体外活性.     

7-羟基-香豆素-3-羧酸衍生物的合成及抗肿瘤活性

以2,4-二羟基苯甲醛和丙二酸二乙酯为起始原料,经Knoevenagel反应得到7-羟基-香豆素-3-羧酸乙酯(2);再经曼尼希反应、酯水解、酸化,得到7-羟基-8-氨甲基-香豆素-3羧酸(4a～4e);利用其羧基与不同碳数的二溴烷烃反应得到相应的溴代酯(5a～5i),再与硝酸银反应得到9个有机硝酸酯类一氧化氮(NO)供体型7-羟基-香豆素-3羧酸衍生物(6a～6i)。目标化合物的结构经过核磁共振氢谱、碳谱和高分辨质谱确证。用MTT法评价了目标化合物对人肝癌HepG2细胞和人肺癌A549细胞增殖的影响,结果显示,所合成的目标化合物对受试的两种癌细胞均具有较强的增殖抑制作用,其中,化合物6c的活性最好。     

10-酯基高喜树碱的全合成及抗肿瘤活性研究

以2,8-二氧-3-乙基-6,6-亚乙二氧基-2,3,5,6,7,8-六氢-3-羟基吡喃(5,4-c)中氮茚为起始原料, 经五步反应得到高喜树碱, 羟甲基化后与一系列酸成酯合成了6个10-酯基高喜树碱, 并利用¹H NMR, MS及元素分析对其结构进行了表征. 采用经典的噻唑兰(Thiazoly blue tetrazolium bromide, MTT)法测定了其体外抗肿瘤活性, 活性测试结果表明3个化合物具有比阳性对照药拓扑替康增强的活性.     

新型7-O-(芳基氨基甲酸酯)-布雷菲德菌素A的合成及其抗肿瘤活性

芳胺与三光气反应制得芳基异氰酸酯(2a~2n);2a~2n分别对布雷菲德菌素A(3)的7-羟基进行结构修饰,合成了14个新型布雷菲德菌素A氨基甲酸酯类衍生物——7-O-(芳基氨基甲酸酯)-布雷菲德菌素A(4a~4n),其结构经1H NMR,13C NMR和ESI-HR-MS表征。初步的抗肿瘤活性测定结果表明,4i~4k均丧失抑制食管癌细胞株TE-1活性。分子对接研究揭示,引入3后,4的分子空间位阻增大,导致不能与靶位结合,致使抗肿瘤活性丧失。     

新型青蒿砜-哌嗪-磺酰胺类衍生物的合成及抗癌活性

以双氢青蒿素为起始原料,经胺化、氧化、烷基化、胺化和酰化反应,快速、高效地合成了青蒿砜及其衍生物,并对所有化合物进行了结构确定.采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)研究了该类化合物对人肝癌细胞株SMMC-7721的细胞毒活性,初步研究结果表明,该类化合物具有明显的抑制人肝癌细胞增殖、诱导其凋亡的细胞活性,给药72h,半抑制浓度IC50最优值为0.09μmol/mL.     

新型氨基喹唑啉化合物的合成及其抗肿瘤活性

以2-氰基-4-硝基苯胺为原料,设计并合成了6个新型的氨基喹唑啉类化合物(5a~5c和6a~6c),其结构经1H NMR,13C NMR和ESI-MS表征。初步的抗肿瘤活性测定结果表明,6-(4-甲酸甲酯苯甲酰胺基)-4-(4-甲基-3-三氟甲基苯胺基)喹唑啉(5b)对人乳腺癌细胞MDA-MB-231和人宫颈癌细胞HELA的抑制活性较好,其IC50分别为4.50μM和3.3μM,优于阳性对照药Gefitinib。     

新型丹皮酚嘧啶类化合物的合成及抗肿瘤活性

以丹皮酚为原料与1,4-二溴丁烷反应合成中间产物2-(4-溴丁烷氧基)-4-甲氧基苯乙酮(2); 2与嘧啶类化合物反应合成了11新型个丹皮酚嘧啶类化合物(4a~4k)，其结构经¹HNMR, ¹³CNMR, IR和MS（ESI）表征。采用MTT法测定目标化合物对HepG2（人肝癌细胞）、MCF-7（人乳腺癌细胞）、HCT-116（人结肠癌细胞）、A549（人肺癌细胞）和LO2（人正常肝细胞）等5种细胞的抑制活性。结果表明：部分化合物表现出一定的抗肿瘤活性，其中6-(2-氟苯基)-5-氰基-4-羟基-2-丹皮酚丁巯基嘧啶(4c)以及6-甲基-4-羟基-2-丹皮酚丁巯基嘧啶(4i)对HCT-116的IC₅₀值分别为(9.22±1.80)μg/mL、(1.32±0.71)μg/mL，优于阳性对照药顺铂。     

新型异噁唑啉类化合物的合成及其抗肿瘤活性

以3,4-二氟苯甲醛为起始物,经4步反应合成了关键中间体N-[{3-[3-氟-4-(1-哌嗪基)苯基]4,5-二氢-5-异噁唑}甲基]乙酰胺(4);4与取代苯磺酰氯经亲核取代反应合成了6个新型的异噁唑啉类化合物(6a～6f),其结构经1H NMR和MS表征.采用MTT法对6a～6f进行初步生物活性测试结果表明,部分化合...     

7-乙基-10-羟基喜树碱制备工艺改进

对7-乙基-10-羟基喜树碱的制备进行了研究,优化了合成工艺,使总收率由19.7%提高到33.2%,并对该合成路线的反应机理进行了初步的探讨.     

新型嘧啶并苦参碱衍生物的合成及抗肿瘤活性

以苦参碱为原料,经Vilsmeier-Haack反应、环加成反应和酰化反应合成了一系列嘧啶并苦参碱衍生物（2, 3a~3k）,其结构经 ¹H NMR、 ¹³C NMR和 HR-MS(ESI)表征。采用MTT 法测定了化合物2和3a~3k对人宫颈癌（HeLa）和人乳腺癌（MCF-7）瘤株的体外抑制活性。结果表明：2对人宫颈癌（HeLa）细胞的抑制活性最好,IC₅₀值为4.571 μmol·L^-1,但弱于顺铂（3.652 μmol·L^-1）; 3h对人乳腺癌（MCF-7）细胞的抑制活性最好,IC₅₀值为3.650 μmol·L^-1,与顺铂（3.506μmol·L^-1）相当。      

新型苯氧乙基三氮唑衍生物的合成及其抗肿瘤活性

对羟基苯甲醛经醚化、叠氮化、加成及缩合反应合成了新型1-[2-(4-取代)苯氧乙基]-1H-1,2,3-三氮唑衍生物(4a～4c,5b和5c),其结构经NMR,IR和MS表征.初步体外抗肿瘤活性测试结果表明,4a和5b对人肝癌细胞,人胃癌细胞和人卵巢癌细胞表现出一定的抑制活性.     

新型常春藤皂苷元衍生物的合成及其体外抗HBV活性

以常春藤皂苷元为原料,对其3,23-羟基和28-羧基进行乙酰化、醚化、苯甲酰化及酯化等反应合成了8个常春藤皂苷元衍生物(2~9),其中6个未见文献报道,其结构经¹H NMR, ¹³C NMR, IR和MS表征。采用MTT法测定了2~9的体外抗HBV活性。结果表明：3~9随浓度增大,对细胞活力的抑制率明显增加,特别是7和9抑制率最明显,用药浓度为1×10^-6mol·L^-1时,抑制率均为9.46±0.47%。对2~9抑制Hep G2.2.15细胞表达表面抗原(HBs Ag)进行了测试。结果表明：2~9对HBs Ag的分泌表达有一定的抑制作用。     

新型三氟甲基苯胺酰烷基三苯基季鏻盐的合成及其抗肿瘤活性

以对或邻三氟甲基苯胺为原料,氯烷酰氯为连接基团,合成了4个新型的含酰胺结构的季鏻盐(3a～3d),其结构经1HNMR和IR表征.采取MTT法对3进行生物活性测试结果表明,部分季磷盐具有较高的抗肿瘤活性.