以碘-RB缔合物为荧光探针的药剂中青霉素含量的检测

碘(I~-_3)对罗丹明B(RB)具有荧光猝灭作用,可使RB的荧光信号强度减弱甚至消失,而青霉素碱性水解产物青霉噻唑酸可将I~-_3还原为I~-,使体系荧光信号再现,据此建立了以RB-I~-_3缔合物为荧光探针测定药剂中青霉素含量的新方法。在激发波长365 nm,发射波长580 nm条件下进行了青霉素的荧光测定。结果表明,在0～6μmol/L范围内,青霉素浓度与荧光强度变化值呈良好的线性关系,检出限为1.88×10~(-9) mol/L。方法的加标回收率为97.0%～106%,相对标准偏差(n=6)为2.6%～3.1%。该方法简便快速、准确可靠、灵敏度高,可用于药剂中青霉素的含量分析。     

罗丹明B荧光猝灭法测定消毒液中过氧乙酸的含量

在总体积为50.0mL的溶液中加入0.1mol·L~(-1)硫酸溶液2.0mL,0.1mol·L~(-1)碘化钾溶液2.0mL及1.0×10-4 mol·L~(-1)罗丹明B溶液5.0mL,以荧光激发波长为365nm,在荧光最大发射波长580nm处可测得罗丹明B发出的明显荧光。当在此条件下,加入过氧乙酸能使其荧光强度迅速减弱,且其减弱程度与过氧乙酸的浓度在4.2×10-7～5.0×10-5 mol·L~(-1)内呈线性关系,并根据10次空白溶液的平行测定计算得到此方法的检出限(3s/k)为2.0×10-8 mol·L~(-1)。据此提出了罗丹明B荧光猝灭法测定消毒液中过氧乙酸的含量。分析时取样品溶液0.25mL,滴加0.01mol·L~(-1)高锰酸钾溶液至溶液呈稳定的浅粉红色,加水稀释至500.0mL,制得样品待测液。取此溶液1.0mL,加入于上述反应溶液中(在加入碘化钾溶液之后),放置15min后按上述方法操作。在3件不同来源的样品按此方法进行分析并进行加标回收试验,测得回收率在96.5%～97.5%之间,测定总量的相对标准偏差(n=6)在1.3%～2.6%之间。所测得此3个样品的过氧乙酸含量均与其标示量相符。由于过氧乙酸标准溶液的不稳定性导致所测得回收率均低于100%。     

“关-开”型荧光探针测定人体尿液中丙酮

碘(I3-)与罗丹明B(RhB)缔合作用使罗丹明B荧光信号强度减弱,丙酮碘仿反应使体系荧光信号再现,再现程度与丙酮浓度成线性关系。据此建立了以RhB-I-3缔合物为荧光探针测定尿液中丙酮浓度的方法,在激发波长365 nm、发射波长580 nm条件下进行了丙酮的荧光测定。结果表明,在0~5μmol/L和5~12μmol/L范围内存在线性方程:△F=-0.0428+3.77c(μmol/L);△F=-86.42+19.68c(μmol/L),检出限为7.96 nmol/L。丙酮与酸性KMnO4溶液不反应,酸性KMnO4处理尿液将有效克服共存还原性物质的干扰,方法用于尿液丙酮含量分析,加标回收率在94.8%~97.5%之间,正常人和糖尿病患者尿液丙酮含量有明显差异。     

罗丹明B-碘灵敏度荧光探针测定盐酸羟胺

碘(I3-)对罗丹明B(RhB)具有荧光猝灭作用,可使Rh B的荧光信号强度减弱甚至消失,而盐酸羟胺可将I_3~-还原为I~-,使体系荧光信号再现,据此建立了以Rh B+I_3~-缔合物为荧光探针测定盐酸羟胺含量的新方法。在发射波长580 nm处,测量试液荧光强度(F),根据荧光强度变化值(△F)与溶液中的盐酸羟胺浓度线性关系,完成盐酸羟胺荧光测定。结果表明,在0～20μmol/L范围内,线性方程△F=-7. 7822+10. 6325c(μmol/L),其相关系数r=0. 9914,检出限为3. 67 nmol/L。该方法可用于盐酸羟胺含量分析。     

荧光猝灭法测定维生素C片和果汁饮料中抗坏血酸的含量

罗丹明B溶液在激发波长(λex)为365nm时,在发射波长(λem)580nm处有最大荧光发射强度。如向罗丹明B溶液中加入碘溶液(I3-),由于两者之间反应生成缔合物而使其荧光猝灭,但罗丹明B发射荧光的峰位未变。如在此猝灭反应之前加入一定量的抗坏血酸(AA),则上述猝灭作用由于I3^-被AA还原而失效,使荧光得以重现。进一步试验表明,在总体积为50mL中,1×10^-3 mol·L^-1碘溶液为2.0mL,1.0×10^-4 mmol·L^-1罗丹明B溶液为5.00mL,pH 4.7的乙酸-乙酸钠缓冲溶液为5.0mL,在常温下反应10min的条件下,抗坏血酸的浓度在40μmol·L^-1内与其对应的荧光强度之间呈线性关系(注:抗坏血酸反应在碘溶液及罗丹B溶液之前加入),其检出限(3s/k)为5.6×10^-9 mol·L^-1。根据以上事实,提出了应用上述荧光猝灭法间接测定维生素C片剂及注射液中抗坏血酸的含量。分析时取片剂样品5片,研磨混匀后称取25.0mg溶于水中,并定容至250.0mL,取1.00mL溶液按上述方法测定。注射液样品则取0.10mL,加水定容至250.0mL,取1.00mL溶液进行测定。在实际样品基础上进行加标回收试验,测得回收率为97.4%(片剂)和98.4%(注射液),测定值的相对标准偏差(n=6)依次为2.3%,1.7%。还应用此方法测定了3种果汁饮料,所测得结果与用碘量法校对的结果相符。     

基于对曙红Y和罗丹明B之间的能量转移反应的荧光光谱法测定痕量锰

在pH 5.5的乙酸盐缓冲溶液中,并在十二烷基苯磺酸钠的存在下,曙红Y与罗丹明B之间发生能量转移,导致罗丹明B的荧光增强;而在40℃温度条件下,当有锰(Ⅱ)存在时,罗丹明B在波长576nm处的荧光发射发生猝灭现象。进一步试验表明,当在激发波长为508nm和发射波长为576nm的条件下,上述荧光猝灭的强度ΔF,即试液中无锰(Ⅱ)及有锰(Ⅱ)存在时所测得的荧光强度F1及F2之差,与锰(Ⅱ)的浓度在1.0×10-8~2.0×10-7 mol·L~(-1)范围内呈线性关系,检出限(3s/k)为4.0×10-9 mol·L~(-1)。据此提出了测定样品中痕量锰(Ⅱ)的荧光光谱法。应用此方法对同一试样中痕量锰作了测定,并以此样品作基体,用标准加入法进行回收试验,测得回收率为106%,样品测定值的相对标准偏差(n=11)为4.8%。     

基于双重增敏剂荧光法测定食品包装材料中痕量双酚A

利用β-环糊精和曲通X-100为双重增敏剂,建立了荧光光谱法测定食品包装材料中痕量双酚A的方法。在0.05 mol·L~(-1)磷酸缓冲溶液(p H=4.0)体系中,优化了β-环糊精(5 mmol·L~(-1))和曲通X-100(0.005%)的含量,选定激发波长为283 nm、发射波长为313 nm进行荧光强度测定。结果表明,在2.0~50.0μg·L~(-1)的线性范围内,所得线性方程为F=1.0636C+246.51,相关系数r=0.9993,相对标准偏差为1.40%,检出限为0.042μg·L~(-1)。该方法检测鲜奶奶盒及塑料矿泉水瓶浸泡水样中双酚A的含量,回收率为95.8~101.4%,获得满意结果。     

罗丹明染料共振散射光谱法测定肝素钠注射液中肝素钠

在酸性介质中,2种罗丹明染料[罗丹明6G(Rh6G)和丁基罗丹明B(b-RhB)]可通过静电引力作用与肝素钠(Hep)形成离子缔合物,使2种体系(Hep-Rh6G和Hep-b-RhB)的共振散射信号增强,且增强程度(ΔI)与Hep的质量浓度在定范围内呈线性关系,据此建立了罗丹明染料共振散射光谱法测定Hep含量的方法。试验优化了Hep-Rh6G和Hep-b-RhB体系的分析条件:试剂的加入顺序为罗丹明染料、Hep和缓冲溶液;Hep-Rh6G体系的反应介质为三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)-HCl缓冲溶液(pH 5.0),其用量为0.50 mL,1.0×10~(-3)mol·L~(-1) Rh6G溶液的用量为0.50mL,分析波长为377nm;Hep-b-RhB体系的反应介质为Britton-Robinson(B-R)缓冲溶液(pH 5.5),用量为0.50 mL,1.0×10~(-3) mol·L~(-1) b-RhB溶液的用量为0.80 mL,分析波长为380nm。结果表明:Hep-Rh6G和Hep-b-RhB等2种体系的线性范围分别为0.020～2.0mg·L~(-1)和0.10～1.6mg·L~(-1),检出限(3s/k)分别为1.10,3.47μg·L~(-1),可见Hep-Rh6G体系的线性范围更宽,检出限更低。因此,采用Hep-Rh6G体系对2个批次的Hep注射液进行了分析,加标回收率分别为96.0%,101%;测定值的相对标准偏差(n=5)分别为4.9%,3.9%。     

荧光反猝灭法测定药剂中卡托普利

建立荧光反猝灭法测定卡托普利(CAT)的体系.碘(I-3)与罗丹明B(RhB)缔合作用使罗丹明B荧光信号强度减弱直至荧光猝灭,而卡托普利可将I-3还原为I-,使体系荧光信号再现.在2～20μmol·L-1范围内荧光强度再现值ΔF与卡托普利浓度有线性关系:ΔF=-8.438+10.774c(r=0.9986),检出限为3...     

氯化血红素催化-荧光光谱法测定染发剂中的过氧化氢

利用过氧化氢能够在氯化血红素作为模拟酶催化条件下将对羟基苯乙酸氧化成具有较强荧光的二聚体的特点,建立了荧光光谱法测定染发剂中过氧化氢的方法。氯化血红素的浓度为10μmol·L~(-1),对羟基苯乙酸浓度为1mmol·L~(-1),pH 10,反应温度为室温,反应时间5min,激发波长为310nmm,发射波长为400nm,体系的荧光强度达到最大。过氧化氢的浓度在0.05~50μmol·L~(-1)范围内与体系的荧光强度呈线性关系,检出限(3S/N)为0.3μg·kg~(-1)。加标回收率在94.5%~105%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)小于2%。     

能量转移荧光猝灭法测定加替沙星

在λ_(ex)/λ_(em)=470/566 nm、BR缓冲溶液(pH=5.72)、十二烷基苯磺酸钠介质中,吖啶橙(AO)与罗丹明6G(R6G)间能发生有效的能量转移,使R6G的荧光强度显著增强;加替沙星的加入,使R6G的荧光发生猝灭.应用AO-R6G能量转移荧光猝灭法测定加替沙星含量,提高了测定的灵敏度和选择性.加替沙星的浓度在0.6～9.0 μmol·L~(-1)范围内与R6G荧光猝灭程度呈线性关系;方法检出限为0.52 μmol·L~(-1);平行6次测定样品相对标准偏差为0.62%～0.84%;回收率为90.0%～105%.常见金属离子及药物敷料对测定无干扰,不经分离直接用于药物中加替沙星的测定.     

无氧化剂化学发光体系对空气中二氧化硫的定量测定

采用无氧化剂化学发光体系对空气中二氧化硫进行定量测定。用0.06%碳酸钠溶液作为吸收剂吸收空气中的二氧化硫,该吸收液与酸性的罗丹明6G-吐温80溶液相遇时,会产生强烈的化学发光信号,根据光信号的大小可定量测定空气中二氧化硫的含量。工作曲线线性范围为5.0×10~(-7)～1.0×10~(-4)mol·L~(-1),检出限为1.0×10~(-7)mol·L~(-1)。对浓度为1.0×10~(-5)mol·L~(-1 )的亚硫酸钠溶液连续测定5次,相对标准偏差RSD为3.8%。该测定方法用于空气中二氧化硫含量的测定,结果令人满意。     

荧光光谱法测定氧氟沙星的含量

室温下,4.0×10~(-6)mol·L~(-1)氧氟沙星溶液5mL与8.0×10~(-6)mol·L~(-1)茜素红溶液5mL发生电荷转移反应30min后生成稳定的络合物,并能产生荧光,络合物的最大激发波长为303nm,最大发射波长为508nm,络合物的组成为1比1。基于此建立了测定氧氟沙星的荧光光谱法。氧氟沙星的浓度在2.0×10~(-7)~4.0×10~(-6)mol·L~(-1)范围内与络合物的荧光强度呈线性关系,方法的检出限为9.1×10-9 mol·L~(-1)。加标回收率在96.0%~101%之间,测定值的相对标准偏差(n=5)小于2%。利用本法测定氧氟沙星药片中氧氟沙星的含量,测定值与标示值相符。     

免疫亲和柱净化-光化学柱后衍生-高效液相色谱法测定柏子仁中的黄曲霉毒素

采用免疫亲和柱净化-光化学柱后衍生-高效液相色谱法测定中药材柏子仁中的黄曲霉毒素G_2、G_1、B_2和B_1。样品经甲醇(7+3)溶液提取,提取液经免疫亲和柱净化,用甲醇洗脱,洗脱液经黄曲霉毒素专用C18色谱柱分离,以甲醇(45+55)溶液为流动相进行洗脱,柱后光化学衍生波长为254nm,荧光检测器的激发波长为365nm,发射波长为440nm。黄曲霉毒素G2、B2的线性范围均为0.125~5.0μg·L~(-1),黄曲霉毒素G_1、B_1的线性范围均为0.50~20μg·L~(-1),检出限(3S/N)在0.012~0.047μg·L~(-1)之间。加标回收率81.4%~105%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在1.6%~6.9%之间。     

4-氨基-N-丁基-1,8-萘酰亚胺荧光猝灭法测定NO_2~-的研究

在酸性介质中,4-氨基-N-丁基-1,8萘酰亚胺(ABN)具有强荧光,NO_2~-可以猝灭其荧光,加入十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)能使猝灭程度显著增大,据此建立了一种以ABN为探针,胶束增敏荧光猝灭法测定NO_2~-的新方法。在0.09mol·L~(-1)的HCl及3.0mmol·L~(-1) CTAB存在下,分别以438nm和535nm为激发和发射波长进行检测,测定的线性范围是0.1~1.9×10-7 mol·L~(-1),检测限为7.1nmol·L~(-1)。该方法具有探针易得,可较长波长下测定,Stokes位移大,选择性好及灵敏度高的优点,用于水样中NO_2~-的含量测定,加标回收率为101.1%~103.4%,相对标准偏差在4.3%以内。     

柱前衍生-毛细管电泳法测定尿液中的羟脯氨酸

以对甲氧基苯磺酰氯作为柱前衍生化试剂,采用毛细管电泳法测定尿液中羟脯氨酸的含量。优化的试验条件如下:1以含有25mmol·L~(-1)十二烷基磺酸钠的pH 10.00的20mmol·L~(-1)硼酸缓冲溶液为缓冲介质;2衍生反应温度为50℃;3衍生时间为15 min;4测定波长为235nm。羟脯氨酸的浓度在2.5~200μmol·L~(-1)范围内与其峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为1.25μmol·L~(-1)。对5mmol·L~(-1)羟脯氨酸标准溶液连续测定6次,测定值的相对标准偏差为2.1%。方法用于尿液的分析,加标回收率在97.8%~103%之间。     

藻红B分光光度法测定罗红霉素胶囊中罗红霉素

在乙酸介质中,罗红霉素与藻红B反应生成电荷转移络合物,其最大吸收波长为520nm,采用分光光度法测定罗红霉素胶囊中罗红霉素的含量。优化的试验条件如下:①4.0×10~(-4)mol·L~(-1)的乙酸溶液作为反应介质;②反应温度为25℃;③反应时间为20min;④2.0×10~(-4)mol·L~(-1)藻红B溶液的用量为1.2mL。罗红霉素的质量浓度在0.020～0.500mg·L~(-1)内与反应体系的吸光度差值呈线性关系,检出限(3s/k)为0.014mg·L~(-1)。方法用于罗红霉素胶囊样品的分析,加标回收率为101%～107%,测定值的相对标准偏差(n=5)为0.84%～1.6%。     

双臂罗丹明类荧光探针应用于Hg~(2+)的识别

合成了一种基于罗丹明衍生物的荧光探针F1,用于识别Hg~(2+)。当在乙腈(1+1)溶液中加入1倍当量(10μmol·L~(-1))的Hg~(2+)时,探针F1在波长561nm处出现明显的吸收峰,其荧光强度(λ_(ex)=550nm,λ_(em)=580nm)增加7.5倍,溶液由无色变为粉红色,这是由于Hg~(2+)和罗丹明螺内酰胺螯合引发开环所致。其他常见的金属离子对探针F1识别Hg~(2+)不产生干扰。在较宽的酸度范围内,Hg~(2+)浓度在0.2~8μmol·L~(-1)内与荧光强度呈线性关系,检出限(3σ/s)为0.15μmol·L~(-1)。     

自制的苄氧基葫芦脲[6]应用于荧光光度法测定商业制剂中头孢曲松钠的含量

制备了苄氧基葫芦脲[6]([BnO]_2CB6),并应用于商业制剂中头孢曲松钠(CTRX)的荧光光度法测定。在pH 6.5的Britton-Robinson缓冲溶液中,[BnO]2CB6与CTRX形成包结物(包结比为1∶1),使体系发生光诱导的电子转移作用,导致明显的荧光猝灭现象。荧光反应的激发波长和发射波长依次为405,495nm。CTRX的浓度在40μmol·L~(-1)以内与其对应的荧光猝灭程度呈线性关系,检出限(3S/N)为17nmol·L~(-1)。方法用于CTRX商业制剂样品的分析,CTRX的测定值与高效液相色谱法(HPLC)测得的结果相符,加标回收率为98.0%~101%,测定值的相对标准偏差(n=6)为3.0%~7.2%。     

催化动力学光度法测定栗子和香菇中痕量Se(Ⅳ)

探讨了Se(Ⅳ)在HNO_3介质中催化KBrO3氧化罗丹明B的褪色反应及最优的动力学条件,由此建立了动力学荧光光度法测定痕量Se(Ⅳ)的新方法。测定Se(Ⅳ)的线性范围为0.2~2.2μg·L~(-1),检出限为0.004μg·L~(-1)。方法用于测定栗子和蘑菇中的痕量Se(Ⅳ),获得了满意的结果。