柱后衍生-高效液相色谱-荧光检测法测定面粉中的过氧化苯甲酰

利用过氧化苯甲酰能够在氯化血红素的催化下将底物对羟基苯乙酸氧化成具有荧光的二聚体的性质,建立了柱后衍生-高效液相色谱-荧光检测法测定面粉中过氧化苯甲酰的方法。优化了色谱分离条件和柱后衍生条件,结果表明:催化剂氯化血红素的浓度为8μmol/L,底物对羟基苯乙酸的浓度为80μmol/L,衍生化试剂的pH 10.5,衍生温度为35℃时衍生效率最高。在优化条件下,过氧化苯甲酰的线性范围为0.5～100 mg/L;样品的检出限为1 mg/kg,样品的加标回收率为98.5%～99.5%。本方法与现有的高效液相色谱法相比,检测面粉中过氧化苯甲酰具有抗干扰能力强,灵敏度高。     

高效液相色谱柱后衍生测定脱水蔬菜中的亚硫酸盐

建立了检测脱水蔬菜中亚硫酸盐的反相硅胶柱净化-柱后衍生-高效液相色谱方法.样品经甲醛提取,通过反相硅胶固相萃取小柱净化,采用Discover ODS-C18柱,流动相为0.005 mol/L氢氧化四丁基铵和乙腈,在碱性条件下以5,5’-二硫代双(2-硝基苯甲酸)为柱后衍生化试剂,445 nm检测.实验结果表明,在0.050～50.00 mg/L浓度范围内,相关系数为0.9987,方法的检出限和定量限分别为1 mg/kg和2 mg/kg,添加浓度在2～900mg/kg范围内,平均添加回收率为62％～88％,相对标准偏差不大于7.8％.该法能有效地避免脱水蔬菜中亚硫酸盐测定的假阳性结果,可满足实际检测工作的需要.     

动物组织中金霉素残留测定的高效液相色谱柱后衍生反应研究

建立了动物组织中金霉素残留测定的高效液相色谱柱后衍生法,研究了镁离子和草酸体系对金霉素荧光强度的影响。结果表明,镁离子浓度和草酸浓度为1∶1.2时,金霉素的荧光强度最强。动物组织样品以5%高氯酸提取,正己烷脱脂,C18净化,Hy-persil ODS C18(250×4.6 mm,5μm)分离,流动相为甲醇∶0.05 mol/L草酸=80∶20(V/V),流速为0.7 mL/min,柱后0.05 mol/L乙酸镁衍生,流速为0.1 mL/min,紫外检测器和荧光检测器同时测定,提高了金霉素残留定量灵敏度。紫外检测波长365nm,荧光检测波长eλx=360 nm,eλm=520 nm。     

柱后衍生-高效液相色谱法测定烟草中游离氨基酸

建立了柱后衍生-高效液相色谱法分离检测烟草中19种游离氨基酸的方法。样品经0.005 mol/L的盐酸超声提取,高效锂阳离子交换柱分离后,采用OPA柱后衍生,荧光检测器检测。各氨基酸在样品含量范围内呈良好的线性关系,相关系数(R2)均大于0.999,在烤烟中的加标回收率为87.73%～100.02%,相对标准偏差在2.7%～6.0%之间,检出限0.13～2.00μmol/L。方法可用于烟草中游离氨基酸的分析。     

高效液相色谱柱后衍生法测定蜂王浆中的链霉素

采用高效液相色谱柱后衍生法测定蜂王浆中的链霉素。样品用庚烷磺酸钠的酸性溶液进行提取,通过LC-18柱和WCX柱两次固相萃 取达到净化的目的。该方法采用反相C8柱,以0.01 mol/L的庚烷磺酸钠溶液和乙腈为流动相,在碱性条件下以1,2-萘醌-4-磺酸钠溶液 为柱后衍生化试剂,用荧光检测器检测。该方法的线性范围为0.02～0.5 mg/L,相关系数为0.9958,方法的检出限和定量限分别为为 0.005 mg/kg和0.01 mg/kg,回收率范围为84.0%～104.0%,相对标准偏差不大于7.9%。结果表明,该方法能有效地减少蜂王浆中链霉素 检测的假阳性结果,符合目前检测工作的需要。     

Fmoc柱前衍生法用于高效反相色谱测定氨基酸

HPLC测定氨基酸,目前最为普及的衍生方法是邻苯二甲醛柱前衍生法,此方法最大的缺点是测不出具有亚胺基的氨基酸,如脯氨酸。 氯甲酸芴甲酯(9-芴甲氧羰酰Fmoc-Cl)是近年来用于多肽合成的新型氨基保护剂,它可以和全部氨基酸反应并生成荧光化合物,因此有可能做为分析全部氨基酸的荧光衍生剂。本文报告了以Fmoc-Cl对氨基酸做柱前衍生及反相色谱分离条件,并定量地测定了水解多肽中全部氨基酸的残基数。     

柱后衍生高效液相色谱法测定鸡肉中莫能菌素残留量

样品用甲醇－水溶液匀浆、提取后过滤,再用二氯甲烷进行液－液萃取,然后通过Ｓｅｐ－Ｐａｋ柱进一步净化。净化后的样液与香兰素衍生试剂在酸性和加热条件下进行柱后衍生,反应产物在５２０ｎｍ波长处测定。衍生剂：香兰素３０．０ｇ＋浓硫酸２０ｍＬ＋甲醇９５０ｍＬ,流速：０．７ｍＬ／ｍｉｎ;色谱柱：μ－ＢｏｎｄａｐａｋＴＭＣ１８３．９ｍｍｉ．ｄ．×３００ｍｍ,或相当的色谱柱;流动相：Ｖ（甲醇）Ｖ（水）Ｖ（磷酸）＝９４０６０１,流速０．７ｍＬ／ｍｉｎ;柱后反应室：体积大于１．４ｍＬ的不锈钢管（３００ｃｍ×１ｍｍｉ．ｄ．）。     

柱前衍生-高效液相色谱法测定鱼类中组胺

建立测定鱼类中组胺含量的柱前衍生-高效液相色谱（HPLC）联合紫外检测分析方法。样品均质后先用三氯乙酸水溶液震荡超声提取,再用丹磺酰氯衍生,采用HPLC-紫外检测器在254 nm处对组胺衍生物进行检测,以色谱峰面积外标法定量。组胺的质量浓度在1.0～50.0μg/mL范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数为0.999 7,方法检出限为7.2μg/kg,定量限为24μg/kg。样品加标回收率为96.8%～99.2%,测定结果的相对标准偏差为1.6%～3.7%(n=6)。该方法快速准确、灵敏度高、重复性好,可用于鱼类产品中组胺的定量分析。     

高效液相色谱-柱后衍生法检测养殖水体及沉积物中11种磺胺药物残留

建立了养殖水体及沉积物中11种磺胺化合物的高效液相色谱-柱后衍生分析方法。养殖水体过滤后采用HLB固相萃取柱进行净化、富集;沉积物采用甲醇/EDTA-Mcllvaine缓冲液(1:1, v/v)提取,HLB固相萃取柱净化富集。经高效液相色谱分离,用荧光胺衍生试剂进行柱后衍生,荧光检测器检测。对柱后衍生系统参数进行了优化,确定了荧光胺溶液的浓度、流速和反应温度分别为0.2 g/L、0.15 mL/min和50 ℃,磺胺化合物在0.01~1.0 mg/L范围内线性显著,其相关系数r²值大于0.99995。11种磺胺类药物在养殖水体和沉积物中的加标回收率分别为79.3%~100.7%和74.6%~95.3%,相对标准偏差为2.2%~11.0%和2.6%~10.3%,检出限(LOD, S/N=3)为0.9~5.5 ng/L和0.3~1.3 μg/kg,定量限(LOQ, S/N=10)为3.0~18.1 ng/L和1.0~4.4 μg/kg。该法可应用于养殖环境中磺胺类药物的定性定量检测,具有较好的实用性。     

柱前衍生-高效液相色谱法测定化妆品中牛磺酸

建立了以2,4-二硝基氟苯(DNFB)为衍生试剂,柱前衍生-高效液相色谱测定化妆品中牛磺酸的方法.水溶性化妆品和水包油型化妆品用水分散、超声提取、离心过滤后直接衍生进样;油包水型化妆品先用乙腈预分散后再用水稀释、超声提取、离心过滤后经衍生进样.分别从衍生试剂的选择、常见干扰因素的排除、衍生试剂添加量、及预分散溶剂的选择...     

聚六亚甲基单胍盐酸盐黏均相对分子质量的测定及抑菌效果

采用黏度法测定新型高分子聚合物杀菌消毒剂--聚六亚甲基单胍盐酸盐的平均相对分子质量。聚六亚甲基单胍盐酸盐溶液浓度在0.04 g/mL时,利用文献值K=3.8×10-3 g/mol、α=1.01,可计算出该自制的聚六亚甲基单胍盐酸盐的平均相对分子质量为2495。在相同的浓度下,不同相对分子质量的聚六亚甲基单胍盐酸盐对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌和铜绿假单胞菌均有一定的抑菌作用,并且抑菌效果均随着相对分子质量的增加而增加。     

基于绿色化学的基础化学实验改进——以“二氧化碳相对分子质量的测定”为例

以“二氧化碳相对分子质量的测定”为例,分析了传统实验中存在的试剂用量大、“三废”排放多等问题,以绿色化学为突破口,采用氢氧化钠-酚酞溶液替代火柴进行验纯,使用注射器代替碘量瓶集气,通过上述方法对实验进行优化设计,达到了绿色化、准零排放的要求,可以增强学生的环保意识。     

Determination of Polymer Molecular Weight by GPC in the Low Molecular Weight Region

Abstract

In order to determine the molecular weight of a polymer by GPC in the low MW region, a secondary calibration method can be established when polymer standards of the analysed polymer are not available (1). The efficiency of this method has been checked for the system poly(methyl methacrylate) (PMMA-methyl ethyl ketone (MEK) using polystyrene (PS) standards. When the solvent is poor for one of the polymers, limitations arise due to the secondary separation effects. Furthermore, a GPC method is proposed for the determination of the Dondos-Benoīt constants (A₁ A₂) which must be known for the above-mentioned calibration. This method uses either two or at least one polydisperse polymer sample.     

生物大分子相对分子质量估算法

生物大分子相对分子质量的计算在科学定量分析中非常重要,但并非所有情况都可进行精确的计算,而需要基于聚合物大小进行估算。通过回归生物大分子之高分子本质,系统性地分析以单体平均相对分子质量出发进行估算的方法。以蛋白质和单双链脱氧核糖核酸(DNA)及核糖核酸(RNA)为例进行分析,旨在探讨和比较基于单体的相对分子质量估计法对不同的生物大分子的可能最大误差。同时指出一个关于双链DNA常被忽略的知识。     

Viscosity Molecular Weight Determination of Polyadenylic Acid

Abstract

In this study viscosity measurements of polyadenylic acid (PolyA) in aqueous solution were carried out under different conditions. In the absence of any additives, the polymer degraded during flow through the capillary of a viscometer or when standing still. Degradation during the former was more severe. The degradation of polyadenylic acid can be prevented by addition of an electrolyte such as KCl to increase the ionic strength. However, in this case the deviation from linearity was still considerable at most ionic strength values. The best fit to the Huggins and Kraemer equations was obtained using a Tris–EDTA buffer solution with a final pH of 7.65. Estimation from intrinsic viscosity and weight-average molecular weight values gave k and α as 2.04 × 10^?5 and 0.89 from the equation η = kM ^α. The difference between Huggins (k ₁) and Kraemer (k ₁′) constants was close to 0.50 for all measurements.     

甲基丙烯酸三丁基锡酯与甲基丙烯酸甲酯共聚物的分子量测定和K、α值的订定

甲基丙烯酸三丁基锡酯与甲基丙烯酸甲酯共聚物的分子量测定和K、α值的订定     

柱前在线衍生-反相高效液相色谱内标法快速测定饲料中氨基酸

采用邻苯二甲醛和氯甲酸芴甲酯联合柱前在线衍生,用反相C18短柱梯度洗脱,二极管阵列检测器(用于检测胱氨酸和赖氨酸)和荧光检测器(用于检测其它氨基酸)联合检测,建立了一种高效液相色谱内标法快速测定饲料中氨基酸含量的方法。此方法对传统样品水解液制备的方法进行了简化,在不须预先除去干扰物质的情况下,提高了氨基酸测定的准确度,18种氨基酸除胱氨酸和色氨酸未检出(完全被破坏)和蛋氨酸为87.32%(部分被氧化破坏)外,其它氨基酸的回收率为94.14%~102.25%,相对标准偏差为2.11%~4.52%(n=5);线性相关性好(相关系数为0.9900~0.9995);线性范围为4.5~1000μmol/L;方法检出限低,灵敏度高,分离时间短,适合饲料中氨基酸的快速测定。     

水溶性凝胶渗透色谱法测定芸芝多糖组分的分子量及其相对含量

用水溶性凝胶渗透色谱法考察了芸芝多糖在水溶性凝胶柱上的吸附影响因素,建立了最佳分离的测试条件,成功地将芸芝多糖的混合物分离为３个组分,测得各组分的分子量分别为１,１９０,０００,７９６,００和５５２,０００;各组分相对百分含量分别为８３．６％,８．９％,７．５％。     

凝胶色谱法测定顺丁橡胶平均分子量及其分布的研究

通过一系列的条件试验,包括样品浓度、样品量及流动相流速对柱效的影响,确定了最佳的凝胶色谱（ＧＰＣ）试验条件;采用普适校正法将聚苯乙烯（ＰＳ）标定曲线转换成顺丁橡胶（ＰＢ）标定曲线,并对Ｍａｒｋ－Ｈｏｕｗｉｎｋ方程式中Ｋ,α值的选择进行了讨论;采用４种分子量加宽方程对色谱柱加宽效应进行改正计算,通过比较,选定适合本试验系统的加宽效应的改正方法;用粘度法测得的顺丁橡胶特性粘度（η）吻合ＧＰＣ所测得特性粘度值,证明了方法的可靠性。     

蛋白质分子量测定过程中的酸效应

在基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）和电喷雾质谱（ESI-MS）测定蛋白质分子分子量的过程中,适当提高样品的酸度,可提高分析测试的灵敏度。在选定最佳样品分子浓度的基础上,通过适当加入三氟乙酸（TFA）来调整测试样品的酸度,准确测定了标准蛋白质-溶菌酶（lysozyme）的分子量,并且对蛋白质分子在“软电离”质谱中,受酸效应的影响进行了初步探讨。