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邱德仁 《理化检验(化学分册)》2005,41(2):135-137,140
概述了分析化学在生命科学中的重要作用和蛋白质组分析的现状与展望。介绍了生物试样的制备、双向凝胶电泳分离蛋白质以及生物质谱鉴定蛋白质等蛋白质组分析的主要技术平台。 相似文献
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优化分离与鉴定蓝斑背肛海兔口腔神经节蛋白质组 总被引:3,自引:0,他引:3
采用双向凝胶电泳技术优化分离蓝斑背肛海兔(Notarcus leachii cirrosus Stimpson, NLCS)口腔神经节(Buccal Ganglion, BG)蛋白质组, 并获得约300个蛋白质斑点. 用组合基质辅助激光解吸电离化飞行时间(MALDI-TOF)质谱技术和胶内酶解技术测定BG蛋白质组中的96个蛋白质斑点的肽指纹(Peptide mass fingerprint, PMF)图谱. 经数据库检索与比对后, 发现96种蛋白质中仅有4种蛋白质可获得较高的匹配率, 它们分别是微管蛋白(Tubulin)、 肌动蛋白(Actin)和两个1,5-二磷酸核酮糖-羧化酶/加氧酶(Ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase, Ribulose), 均属于神经细胞骨架蛋白质; 同时还发现一种交配信号肽前体(Peptide mating pheromone precursor). 利用LOCtrees软件和分类法对56种蛋白质进行亚细胞定位与分类. 相似文献
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磷酸化蛋白质分析技术在蛋白质组研究中的应用 总被引:7,自引:0,他引:7
磷酸化修饰蛋白质的分析是蛋白质组研究中的重要内容。对于目前磷酸化蛋白质分析所涉及的各种方法,包括放射性同位素标记,抗体免疫印记等传统方法和以串联质谱各种扫描技术为基础,结合亲和提取、液相色谱-质谱联用等手段的新技术、新方法,以及这些技术在磷酸化蛋白质组学中的应用予以评述。 相似文献
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生物质谱--蛋白质组研究的关键技术 总被引:6,自引:0,他引:6
介绍了近几年来国际上重点研究的几类新型生物质谱技术,综述了它们在蛋白质组研究中的最新进展,比较了各自的特点,简要评价了它们在蛋白质组研究中的应用和前景。 相似文献
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蛋白质,凝胶电泳及其分析应用 总被引:2,自引:0,他引:2
蛋白质是重要的生物高分子,具有催化、传输、运动、防御和调节等重要生理功能,其分离、纯化和表征对理解和利用它们在生命过程中的作用具有重大理论意义和实际价值。凝胶电泳是蛋白质测定占应用最广泛和最强有力的工具。本文讨论凝胶电圾其在蛋白质分析方面的新进展。首先介绍蛋白质的性质和功能,然后讨论蛋白质试样制备方法,最后评述各种凝胶电泳分离技术及其在蛋白质人离,纯化和表征等方面的应用。 相似文献
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应用蛋白质组学双向凝胶电泳(Two-dimensional gel electrophoresis, 2DE)和质谱技术, 定量分析和鉴定了癫痫组(n=3)和正常组(n=3)脑组织的差异表达蛋白, 以从蛋白质水平上揭示癫痫病的发机制. 结果表明, 凝胶图谱可辨识2500~3000个蛋白点, 对21个显著差异表达蛋白点进行质谱鉴定和SwissProt数据库检索, 得到17个癫痫差异蛋白, 其中2个蛋白在癫痫组织中表达上调, 15个蛋白表达下调. 部分蛋白与癫痫的关系属首次报道. 这些蛋白与癫痫的发生发展相关, 可能成为癫痫的分子标志物和药物治疗的靶向蛋白. 相似文献
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蛋白质、凝胶电泳及其分析应用 总被引:3,自引:0,他引:3
蛋白质是重要的生物高分子,具有催化、传输、运动、防御和调节等重要生理功能,其分离、纯化和表征对理解和利用它们在生命过程中的作用具有重大理论意义和实际价值。凝胶电泳是蛋白质测定中应用最广泛和最强有力的工具。本文讨论凝胶电泳方法及其在蛋白质分析方面的新进展。首先介绍蛋白质的性质和功能,然后讨论蛋白质试样制备方法,最后评述各种凝胶电泳分离技术及其在蛋白质分离、纯化和表征等方面的应用。 相似文献
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本文采用高分辨二维凝胶电泳分离技术对人卵巢癌细胞株COC1及其耐药细胞株COC1/DDP中的蛋白质进行分离和差异表达分析, 应用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱对酶解多肽进行测定[即测定蛋白质的肽质量指纹图(Peptide mass fingerprinting, PMF)], 并通过相应的数据库搜索来鉴定蛋白质. 为获得更准确的检索结果, 采用串联质谱技术对各肽段进行氨基酸测序, 并应用IPI-HUMAN数据库对上述检索结果进一步加以确认. 相似文献
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细胞信号传导是近年来生命科学研究的热点之一。有关蛋白转录后修饰 (如蛋白质磷酸化、乙酰化、糖基化等 ) ,信号肽序列测定 ,信号传导途径和多通道调节方式 ,蛋白自折叠及构象变化 ,小分子脂类信号分子等研究由于质谱技术的快速发展而取得了突破性的进展 相似文献
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With the sequencing of human genome almost complete, human genome project enters the postgenome-sequencing era. Compared to genomics, the analysis of proteome is rather difficult since in human cells there are around 200 000 proteins, which are expressed at any time at different levels 相似文献
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Kyle A. Brown Trisha Tucholski Christian Eken Samantha Knott Yanlong Zhu Song Jin Ying Ge 《Angewandte Chemie (International ed. in English)》2020,59(22):8406-8410
Mass spectrometry (MS)‐based proteomics provides unprecedented opportunities for understanding the structure and function of proteins in complex biological systems; however, protein solubility and sample preparation before MS remain a bottleneck preventing high‐throughput proteomics. Herein, we report a high‐throughput bottom‐up proteomic method enabled by a newly developed MS‐compatible photocleavable surfactant, 4‐hexylphenylazosulfonate (Azo) that facilitates robust protein extraction, rapid enzymatic digestion (30 min compared to overnight), and subsequent MS‐analysis following UV degradation. Moreover, we developed an Azo‐aided bottom‐up method for analysis of integral membrane proteins, which are key drug targets and are generally underrepresented in global proteomic studies. Furthermore, we demonstrated the ability of Azo to serve as an “all‐in‐one” MS‐compatible surfactant for both top‐down and bottom‐up proteomics, with streamlined workflows for high‐throughput proteomics amenable to clinical applications. 相似文献