光谱法研究哈巴俄苷与人血清白蛋白的结合反应

在不同温度及模拟血液pH值条件下,采用荧光光谱法和紫外-可见吸收光谱法研究了哈巴俄苷(Harpagoside, HAR)与人血清白蛋白(Human serum albumin, HSA)的结合反应.结果表明,HAR有规律地使HSA内源荧光猝灭,猝灭常数随温度升高而降低,其猝灭机制为两者形成复合物而引起的的静态猝灭;不同条件下两者结合常数KA均大于105 L/mol,结合位点数n≈1.由Van′t Hoff方程计算获得了不同条件下HAR与HSA相互作用的热力学参数,由ΔG、ΔH和ΔS均小于0可知,两者结合的主要作用力是氢键和范德华力,且两者结合是吉布斯自由能降低的自发过程.根据F(o)rster非辐射转移理论计,计算了不同条件下HAR与HSA的结合距离r在4.01~4.28 nm范围内,表明两者结合过程发生了非辐射能量转移.同步荧光光谱表征结果表明,HAR使HSA的色氨酸和酪氨酸残基所处的微环境极性增强,疏水性减弱,导致HSA构象发生了一定程度的改变.     

LED激发荧光光谱法快速测定玉米粉中的黄曲霉毒素B1

以LED灯为激发光源,小型光纤光谱仪为检测设备,构建了LED激发的荧光光谱检测装置,并基于Hg2+对黄曲霉毒素B1（AFB1）的荧光增强效应,建立了AFB1的荧光光谱快速定量分析方法。研究确定了激发波长为370 nm,荧光检测波长为443.2 nm,对Hg2+与AFB1反应的pH值、溶剂配比、反应时间等条件进行优化,同时探究了方法的干扰因素。在优化条件下,AFB1－Hg2+体系的荧光发射强度与AFB1的质量浓度在3～90 μg/L范围内呈线性关系,相关系数r2 = 0.996,检出限为0.913 μg/L。将该方法用于两种玉米粉中AFB1的检测,其加标回收率为84.1%～107%,相对标准偏差（RSD）为1.1%～7.1%。该研究为AFB1的快速检测提供了一种新的具有较高灵敏度、精密度的快速检测方法,有望在现场快速检测中得到应用。     

药物小分子白杨素与人血清白蛋白结合作用的光谱法研究

应用荧光光谱法、共振瑞利散射光谱法和同步荧光法,研究了生理条件下白杨素与人血清白蛋白(HSA)相互作用.研究表明,白杨素与HSA发生作用并形成了新的基态化合物,静态猝灭是导致HSA内源荧光猝灭的主要原因;求得不同温度 (17℃、26℃和35℃) 下白杨素与HSA作用的结合常数分别为2.373×106、1.680×106和1.346×106 L·mol-1;由求得的热力学参数,确定了白杨素与HSA间的结合反应主要由静电引力驱动.根据Frster非辐射能量转移理论,计算出白杨素在蛋白质中的结合位置与214位色氨酸残基间的距离为3.52 nm;同步荧光光谱表明,白杨素使得HSA的二级结构发生了变化.     

多光谱法结合分子模拟技术研究多西他赛与人血清白蛋白的作用

利用荧光光谱、紫外光谱、三维荧光光谱、红外光谱、圆二色谱和分子对接技术研究了多西他赛(DT)与人血清白蛋白(HSA)的相互作用机理,探讨了 7种辅酶对HSA及DT-HSA体系的影响.结果表明,DT对HSA的猝灭机制为静态猝灭且伴随非辐射能量的转移,二者通过疏水力、氢键和范德华力共同作用形成1∶1的配合物.HSA的主要结...     

用光谱法研究奥硝唑与人血清白蛋白的相互作用

采用荧光光谱法和紫外可见吸收光谱法研究了奥硝唑与人血清白蛋白之间的相互作用;求得了二者在不同温度下的结合常数KA和结合位点数n,以及对应温度下结合反应的热力学参数,同时采用同步荧光分析技术探讨了蛋白质与药物结合时构象的变化.结果表明,在生理条件下奥硝唑对人血清白蛋白的荧光猝灭主要为静态猝灭;奥硝唑与人血清白蛋白主要靠静电作用力结合.     

荧光光谱法研究双醋瑞因与人血清白蛋白的相互作用

在模拟人体生理条件下（pH=7.40）,采用荧光光谱法研究双醋瑞因与人血清白蛋白的相互作用。 采用2种方法计算不同温度下其结合常数KA、结合位点数n,同时对2种计算方法进行了比较;并根据热力学参数确定了双醋瑞因与人血清白蛋白之间的作用力类型。 根据Forster非辐射能量转移原理,确定了双醋瑞因与人血清白蛋白相互结合时供能体 受能体间的作用距离和能量转移效率,并用同步荧光光谱研究了双醋瑞因对人血清白蛋白构象的影响。 结果表明,双醋瑞因与人血清白蛋白之间主要是以静态猝灭为主;结合距离r=2.88 nm,能量转移效率E=0.273 8,二者主要凭借氢键和范德华力进行结合。     

光谱法研究咖啡因与人血清白蛋白的结合作用

用荧光光谱、紫外吸收光谱和圆二色谱等光谱学方法研究在近似生理条件下咖啡因与人血清白蛋白(HSA)的结合作用.实验结果表明咖啡因与人血清白蛋白的结合主要是动态猝灭过程,并获得了不同温度下,咖啡因与人血清白蛋白的结合位点数,结合常数以及△H、△G和△S等热力学参数.根据所得结果可推断咖啡因与人血清白蛋白的作用力主要是氢键和范德华力,由FRET能量转移理论计算出咖啡因与人血清白蛋白间的结合距离.同时用同步荧光光谱、圆二色谱和三唯荧光光谱,考察了咖啡因对人血清白蛋白二级结构的影响.     

球形纳米银与人血清白蛋白相互作用的研究

通过化学还原法合成了球形银纳米颗粒,并利用电子显微镜方法对其形貌进行了表征;利用紫外可见吸收光谱法(UV)、荧光光谱法(FL) 以及扫描电子显微镜(SEM) 研究了球形纳米银与人血清白蛋白(HSA) 的结合反应。随着纳米银溶液浓度的增加,混合溶液的紫外吸收峰强度增加,但荧光强度则发生了明显的猝灭。光谱学实验结果表明,球形纳米银与人血清白蛋白在溶液中发生了相互作用,此结果也通过扫描电子显微镜实验得到了验证。由荧光实验还可获得纳米银与HSA 相互作用的结合常数、结合位点数以及吉布斯自由能变,由这些热力学数据可知纳米银与人血清白蛋白可以自发结合发生反应,并形成缔合物。     

天竺葵素与人血清白蛋白相互作用的光谱学研究

采用荧光光谱、紫外吸收光谱和同步荧光光谱法研究了天竺葵素与人血清蛋白(HSA)的相互作用.结果表明:天竺葵素能使HSA发生内源荧光猝灭,属静态猝灭机理.25、30和37℃下,天竺葵素与HSA的静态猝灭速率常数分别为3.357×104,4.288×104和4.851×104L·mol-1,结合常数分别为3.24×104、...     

全氟丙酸与人血清白蛋白结合作用机制的计算模拟与光谱法研究

通过分子对接和动力学模拟的计算方法模拟人血清白蛋白(HSA)的三维空间结构,建立了HSA与全氟丙酸(IPC-PFFA-3)相互作用的模型,研究了HSA与全氟丙酸复合物在水溶液中的稳定性以及在结合位点中的动力学性质。在模拟人体生理的实验条件下,采用荧光光谱法和同步荧光光谱法研究了HSA与IPCPFFA-3的相互作用。实验结果表明,IPC-PFFA-3与HSA形成的复合物HSA-IPC-PFFA-3对HSA产生荧光猝灭作用,其猝灭机理是静态猝灭;热力学参数计算得出两者结合的主要作用力为氢键作用力;竞争实验的结果表明IPC-PFFA-3与HSA的结合位点位于HSA的SiteⅡ,与分子对接的模拟结果相吻合。同步荧光光谱实验与动力学模拟的结果证明IPC-PFFA-3与HSA能够稳定结合,并使HSA的构象发生变化。     

补骨脂素和异补骨脂素键合人血清白蛋白的比较

将互为同分异构体的两种植物药活性组分补骨脂素和异补骨脂素作为研究对象,利用荧光光谱、紫外光谱、圆二色谱及傅立叶变换红外光谱详细比较研究了这两种香豆素类化合物与人血清白蛋白(HSA)的键合作用.不同光谱的结果定性、定量地显示了HSA二级结构变化的程度.依据荧光滴定实验及Van′t Hoff公式求出了反应的热力学参数(ΔH和ΔS)的值.根据修正后的Stern-Volmer和Scatchard方程和荧光光谱数据分别求得不同温度(296,303,310及318 K)下药物与蛋白相互作用的结合常数及结合位点数;且根据F觟rster偶极-偶极能量转移理论,求得药物与HSA间的键合距离;利用竞争实验确定了药物在HSA上的键合位点为site II.从分子水平上揭示了这两种化合物与HSA相互作用的机制.     

Spectroscopic and Molecular Docking Approaches for Investigation of Interaction of Phellopterin with Human Serum Albumin

The mechanism of interaction between human serum albumin (HSA) and natural product phellopterin (PL) from Angelica dahurica was investigated by spectroscopic techniques with molecular docking under simulated physiological conditions. The experimental results showed that the fluorescence of HSA was regularly quenched by PL, and the quenching constants (K_SV) decreased with increasing temperature, which indicated that the quenching mechanism was a static quenching procedure. The binding constants (K_A) were larger than 10^?5 M^?1 and the number of binding sites (n) was approximate to 1 at different temperatures, which indicated that the binding affinity was hige and there was just one main binding site in HSA for PL. According to thermodynamic parameters from Van't Hoff equation, the binding process of PL with HSA was spontaneous and exothermic process due to ΔG < 0, and the electrostatic force played major role in the binding between PL and HSA according to ΔH < 0 and ΔS > 0. The binding distance (r) was calculated to be about 3.35 nm, which implied that the energy transfer from HSA to PL occurred with high possibility according to the theory of Förster's non-radiation energy transfer. The microenvironment and conformation of HSA changed with the addition of PL based on the results of synchronous and three-dimensional fluorescence methods. The molecular docking analysis revealed the binding locus of PL to HSA in subdomain IIIA (Sudlow's site II).     

Study on the Interaction between Theasinesin and Bovine Serum Albumin by Fluorescence Method

Theasinesin (TS), a polymer of epigallocatechin gallate, is the main active component of tea polyphenols. Several studies indicate that tea polyphenols have extensive pharmacology activity. However, there is little research about the transportation and metabolism of tea polyphenols in vivo. Serum albumin is a most important protein serving as a depot protein and as a transport protein for many drugs and other bioactive small molecules. This study observed the interaction between TS and bovine serum albumin (BSA) by fluorescence and absorption spectroscopy. The results showed that both static and dynamic quenching occurred in the fluorescence quenching of BSA by TS. The binding sites number is 1.1845 and the binding sites may close to the tyrosine residues. The thermodynamic parameters ΔH°, ΔG°, ΔS° at temperatures 310 K were calculated 1.7 KJ, ?35.4 KJ, and 0.12 KJ. The negative sign of free energy (ΔG°) means that the interaction process is spontaneous. The positive enthalpy (ΔH°) and entropy (ΔS°) values of the interaction of TS and BSA indicate that the binding is mainly entropy-driven and the enthalpy is unfavorable for it, the hydrophobic forces playing a major role in the reaction. A distance of 4.037 nm was found between donor (BSA) and acceptor (TS), obtained according to the F?rster theory of non-radiation energy transfer, which indicates that the energy transfer from BSA to TS occurs with high probability. The results of synchronous fluorescence spectra and UV–vis absorption spectra showed that the peptide strands of BSA molecules extended more and the hydrophobicity decreased with the addition of TS.     

荧光法研究苯胺蓝与人血清白蛋白的相互作用

用荧光光谱、同步荧光光谱研究了苯胺蓝和人血清白蛋白的相互作用。研究表明,苯胺蓝对人血清白蛋白的荧光发射有明显的猝灭作用,根据不同温度下的猝灭数据,由Stern-Volmer方程推断苯胺蓝对人血清白蛋白的猝灭属于静态猝灭。计算得到了结合常数KA、结合位点数n,同时计算得到的热力学常数表明苯胺蓝和人血清白蛋白作用力类型为静电作用和疏水作用结合。同时用同步荧光光谱探讨了苯胺蓝对人血清白蛋白构象的影响。     

光谱法研究巯嘌呤与血清白蛋白的相互作用

利用荧光光谱和紫外-可见光谱法研究了巯嘌呤药物与牛血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白(HAS)分子间的相互结合反应.测得巯嘌呤与BSA、HAS反应的结合平衡常数分别为:2.39×103L/mol、1.28×103L/mol.根据Forster非辐射能量转移理论,求算了给体(BSA和HAS)与受体(巯嘌呤)间的结合距离和能量转移效率.用同步荧光法考察了巯嘌呤对BSA和HAS构象的影响.证实了巯嘌呤药物与牛血清白蛋白和人血清白蛋白的相互结合作用为单一的静态猝灭过程.     

光谱法研究根皮苷与人血清白蛋白相互作用

在模拟生理条件下,采用荧光光谱、紫外光谱和同步荧光光谱法研究了根皮苷(Phlorizin)与人血清白蛋白(HSA)的相互作用。结果表明:根皮苷能使HSA发生内源荧光猝灭,属静态猝灭。在293、303 K和313 K下,根皮苷与HSA的结合常数分别为3.163 5×105、1.774 8×105、1.193 5×105L.mol-1,结合位点数n近似为1;热力学分析表明根皮苷与HSA间的结合力为氢键及范德华力;根据Frster非辐射能量转移理论求得二者结合距离为3.97 nm;同步荧光光谱表明根皮苷主要与HSA中的色氨酸残基发生相互作用,改变色氨酸周围的局部构象;金属离子的介入会影响根皮苷与HSA的结合能力。     

人血清白蛋白和牛血清白蛋白荧光量子产率的测量

以L-色氨酸荧光量子产率0．14为标准,测量了人血清白蛋白和牛血清白蛋白水溶液在不同激发波长下的荧光量子产率。在pH6．4和25℃条件下,人血清白蛋白和牛血清白蛋白在最大激发波长280nm的荧光量子产率分别为0．132和0．130。实验发现,pH对蛋白质荧光强度有明显影响,溶解氧对荧光量子产率基本没有影响。