氯化艳密度梯度离心法纯化叶绿体DNA

方法用蔗糖密度梯度离心分离烟草及油菜纯化的叶绿体,然后用氯化饱密度梯度超速离心纯化叶绿体 D N A.不加 D N ase处理,但从限制性核酸内切酶作用,经琼脂糖凝胶电泳得到的比较清晰的限制图谱,产物可用于制作物理图谱和 D N A 重组合     

纯化水稻叶绿体DNA的新方法

绿色植物叶绿体基因组结构和功能的探讨,是当前植物分子遗传学研究中的一个热点。七十年代中期以来,人们已对近四十种植物的叶绿体DNA(ctDNA)进行了深入的研究并逐渐形成了一套较为成熟的方法。然而,有关主要粮食作物水稻叶绿体基因组的研究,报道很少,其主要原因之一是水稻ctDNA的分离纯化较为困难。最近,我们将新鲜水稻嫩叶在缓冲液中直接匀浆,并调节细胞器悬浮液pH,改变细胞器表面带电状况的新方法,结合蔗糖梯度离心,成功地分离到纯净的水稻叶绿体,获得纯度较     

水稻叶绿体DNA的分离纯化及其限制酶切分析

通过在匀浆缓冲液中添加抗坏血酸并结合蔗糖密度梯度离心和差速离心法等分离纯化了水稻叶绿体DNA ( ctDN A )，得率高达100}g八OOB叶，其纯度足以用于限制酶分析和分子生物学研究.环状水稻ctDNA总长度为129.5Kbp, Pvu I , Sal j , Pst f ,Hiad I , EcoRI和BamHI在ctDNA上的切点分别为11, 12, 17, 37, 67和`6.     

油菜叶绿体DNA在大肠杆菌中的克隆

用普通差速离心分离了甘蓝型油菜(Brassica napus)九二13系的叶绿体,并以苯酚、氯仿及RNase处理,纯化了叶绿体DNA.经BamHⅠ,EcoRⅠ,HindⅢ,SalⅠ与SmaⅠ五种限制酶酶解,电泳分析,估算出该环状叶绿体DNA分子周长约为140.5千碱基对(kbp),即分子量约92.7×10~6道尔顿(daltion).以质粒pBR325为载体,将叶绿体DNA的BamHⅠ酶解片段,引入大肠杆菌中克隆,得到了三个重组体.     

小麦叶绿体DNA的提取与酶切

研究小麦叶绿体ＤＮＡ，需要快速，简便地获得质纯，量大的ｃｔＤＮＡ蒋高离子强度和抗坏血酸同时引入缓冲系统用于提取小麦ｃｔＤＮＡ利用高离子强度对ＤＮＡ与蛋白质之间的静电吸引造成襄胁损失的阻碍作用，及抗坏血酸提供低ｐＨ环境抑制酶活性等作用，得到较好的产率和纯度，并可得到清晰的限制性内酶图谱。     

rbcL基因在水稻叶绿体DNA基因库克隆中的定位

由水稻品系珍汕９７不育系为材料制得的叶绿体ＤＮＡ（ｃｔＤＮＡ）基因库中，筛选到屯含核酮糖１，５－二磷酸羧化酶／加氧酶大亚基基因（ｒｂｃＬ）的重组质粒，对该重组质粒用ＰｖｕⅡ，Ｐｓｔ１ｔ和ＳａｌＩ限制性内切酶进行了分析并制得了限制图谱，ｒｂｃＬ基因在该图谱上进行了定位。     

猪肝线粒体DNA的纯化及其限制酶切分析

本文报道了一种纯化猪肝线粒体DNA } mtDNA)的简便方法.用差速离心制备线粒体，然后用1 `oSarkosyl提取粗制的mt DNA,氯仿一异戍醇脱蛋白，最后用Sepharose4B凝胶柱层析纯化mt DNA.对纯化的mt DNA用化学分析、紫外吸收光谱、凝胶电泳和限制酶切等方法进行了鉴定.猪肝mt DNA经限制酶Hindi, Hael, Hinc.y,BamH I和Eco R I酶切分别切割成.4r .6,.r,5, 5和3个片断，经估算猪肝。tDNA的分子鼻约为15.85千碱基对或10. A6 x 10‘道尔顿.     

诱导酵母原生质体摄取蚕豆叶绿体的研究

本实验试图应用原生质体融合技术将异养型酵母细胞改建成光能自养类型。实验结果证明,聚乙二醇(PEG)能够有效地诱导酵母原生质体摄取游离的蚕豆叶绿体;PEG和CaClP_2的浓度,pH值,诱导融合的温度和时间,以及渗透稳定剂的种类都对酵母原生质体摄取叶绿体产生一定的影响。     

单宁的提取与纯化

五倍子１：１丙酮水溶液提取，单宁酸含量可由５７％上升到８１％，经树脂吸附处理后，可进一步分离纯化，单宁酸干基含量可达９０％以上。     

萝卜叶绿体rbc L基因定位及ctDNA基因文库的构建

用改进的高离子强度法分离的萝卜叶绿体（ｃｔ）经ＳＤＳ６０℃裂解，抽提的ｃｔＤＮＡ只需简单纯化即可用于酶切分析．萝卜ｃｔＤＮＡ用４种限制性内切酶ＢａｍＨⅠ，ＰｓｔⅠ，ＨｉｎｄⅢ和ＥｃｏＲⅠ分别进行单酶完全酶解，推算其分子量和长度分别为８２．５×１０６和１２５ｋｂ．以Ｎｉｃｋｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ标记的异源探针ｒｂｃＬ基因与ｃｔＤＮＡＥｃｏＲⅠ片段进行杂交，初步定位在Ｅ１１片段（１．７ｋｂ）上．以ＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＭ１３为载体构建了萝卜ｃｔＤＮＡＥｃｏＲⅠ基因文库     

基于共轭梯度法的盲分离在线算法

在严格论证盲分离问题与数学上的最优化问题等价的基础上,把问题的重点集中在对该最优化问题的寻优上.由于盲分离最优化问题的目标函数的特点,在欧氏空间中对决策变量(分离矩阵W)进行寻优求解带来诸多复杂因素,寻优算法在弯曲的黎曼空间中动态运行是解决这些问题的一条可行途径.为此,本文在改进 NGA 和 PDFA 算法的基础上,结合在线算法 PDEA 在估计信号的得分函数的较好效果,和求解最优化问题的共轭梯度法较快收敛性能,提出了具有自学习能力,并继承共轭梯度法特点的盲分离在线算法 PDEA-CONJ.此算法应用到盲分离问题中,在混合矩阵严重病态情况下能取得了较好分离效果.实际算例验证了其收敛性和有效性.     

超低频脉冲梯度磁场治疗肿瘤及其机理的探讨

报道了用超低频脉冲梯度磁场治疗肿瘤的实验研究以及对其机理的探讨 .将峰值强度为 0 .6～ 2 .0T,磁场梯度 10～ 10 0 T/ m,脉冲宽度 2 0～ 2 0 0 m s,重复频率 0 .16～ 1.34Hz的磁场作用于鼠 S- 180肉瘤 ,观察到磁场对肿瘤生长的抑制及促使肿瘤细胞的凋亡 .研究表明 ,磁场治癌的机理不是单一的 ,而是从多方面共同作用的结果 ,其中包括磁场减少对肿瘤的营养供应、破坏其代谢功能并影响癌细胞核 DNA复制等方面 ,而且磁场的作用具有选择性 ,因此用磁场治疗癌症是一种可行的方法     

PCR-DGGE监测豆豉制曲过程中菌群的动态变化

豆豉的制曲过程是豆豉生产至关重要的阶段,从接种曲种到制曲结束,豆豉经历了一个复杂的微生物群系动态变化过程。以江西本地豆豉样品为研究对象,通过活菌计数和变性凝胶梯度电泳(PCR-DGGE)技术动态监测了制曲阶段豆豉中细菌、真菌、杆菌菌群数量和种类变化,通过UPGMA相似性聚类     

含蚕豆核酮糖1,5-二磷酸羧酶化/加氧酶大亚基基因的重组质粒物理图谱的构建

pVFB33为含蚕豆叶绿体核酮糖1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶大亚基基因的克隆.本实验采用碱变性法,提取、分离和纯化了pVFB33质粒DNA,并利用几种限制性内切酶酶解,构建了pVFB33质粒DNA的物理图谱,同时,对实验结果进行了分析讨论.     

荧光光谱法研究三唑磷对DNA的损伤作用

在生理酸度条件下(pH 7.4),采用荧光光谱法并结合溴化乙锭(EB)荧光探针、I-离子效应、DNA熔点效应及盐效应等实验手段,研究了三唑磷与DNA的相互作用。实验发现,DNA对三唑磷的内源荧光产生强烈的猝灭,机理为动态猝灭,两者间的结合常数和结合位点数分别为4.54×103L.mol-1和1.082     

桥随路降法治理桥头跳车

分析软土地基上路堤与桥梁的沉降差异及跳车的原因,采用桥随路降的治理方法,应用柱式升降桥墩来调控桥面高程,使桥面降落高度与路面沉降量一致,保持道路竖曲线顺畅,消除桥头跳车.     

博莱霉素切割DNA反应的定量测定及其影响因素

用硫代巴比妥酸反应分析了博莱霉素 Ａ５ （ Ｂ Ｌ Ｍ Ａ５ ）对 Ｄ Ｎ Ａ 的断裂作用在 Ｆｅ２＋ 和 Ｏ２存在下, Ｂ Ｌ Ｍ Ａ５能导致 Ｄ Ｎ Ａ 链断裂研究了一些因素对 Ｂ Ｌ Ｍ Ａ５ 催化 Ｄ Ｎ Ａ 断链反应的影响,设计并建立了 Ｂ Ｌ Ｍ Ａ５ 切割 Ｄ Ｎ Ａ 反应的定量测定方法,并测得 Ｋｍ 约为１５３ μｍ ｏｌ· Ｌ－ １, Ｖｍ ａｘ 约为００４６ Ａ５３２ｎｍ Ｕｎｉｔ·ｓ－ １ 