小鼠不同类型孤雌激活卵的形成及其孤雌胚发育状况的研究

注射hCG18h后收集小鼠卵母细胞,采用不同试剂和作用不同时间对其进行激活,观察不同类型激活卵的形成情况及孤雌胚的发育状况,并对单倍体孤雌胚进行了核型分析。结果表明：1）几种激活方法均可得到均质单倍体、嵌合单倍体、1个原核（1PN）的杂合二倍体和2个原核（2PN）的杂合二倍体4种孤雌激活类型。乙醇及Srcl2单独激活后出现单倍体的比率较高;而乙醇联合6-DMAP以及Srcl2联合CB激活后出现二倍体的比率较高;2）10％的乙醇单独作用10min,卵母细胞激活率最高,达到63．3％;在激活卯的原核类型上,2-细胞（嵌合单倍体）的比率随着乙醇刺激强度的增加而增加,但乙醇单独激活后过二细胞阻滞率及桑葚胚的发育率较差;3）10％的乙醇处理5min后染色观察发现出现2细胞嵌合单倍体的比例较高,但接着用6-DMAP分别处理2、4、6h,跟踪观察发现杂合二倍体类型出现比率随时间延长而升高,处理6h后出现2PN杂合二倍体比率最高,且过二细胞阻滞率及桑葚胚的发育率也显著高于乙醇单独激活,但嵌合单倍体数量较不加6-DMAP时却减少;4）10％的乙醇、2mmol／L的6-DMAP联合5μg／mL的CB处理6h后,过二细胞阻滞率及桑葚胚的发育率与不加CB比较差异不显著;5）10mmol／L的Srcl2单独及联合CB分别作用2、4h均能有效激活小鼠卵母细胞,单独及联合CB作用4h的激活率最高,两者差异不显著;在激活卵的原核类型,Srcl2单独激活后出现单倍体类型的比率较高,而联合CB后出现二倍体的比率较高,且过二细胞阻滞率及桑葚胚的发育率与Srcl2单独作用相比差异显著;6）先Srcl2处理1h后染色观察发现形成均质单倍体的比例较高,但接着用CB分别处理1、2h,跟踪观察发现杂合二倍体类型出现比率大大提高,同时发现均质单倍体类型数目反而有所减少。结论：小鼠卵母细?     

水牛卵母细胞孤雌激活及孤雌胚与体外受精胚发育的比较

目的对MII期水牛卵母细胞进行人工诱导激活,可以间接判断体外成熟卵母细胞质量的优劣,并且,卵母细胞的充分激活也是提高核移植效率的关键因素之一。比较了水牛卵母细胞体外成熟时间对孤雌激活胚发育能力的影响以及不同化学激活方法对水牛卵母细胞孤雌激活效果的影响,并在相同条件下,对孤雌激活胚与体外受精胚的发育能力进行了比较。结果表明,水牛卵母细胞体外成熟27 h或30 h的囊胚发育率(19.0%,17.7%)明显高于体外成熟21 h或24 h的囊胚发育率(12.3%,13.8%);Ion联合6_DMAP激活水牛卵母细胞的效果优于其他几组激活方法;在相同培养条件下,孤雌激活胚与体外受精胚的发育能力存在着差异,其中卵裂率差异不显著,但孤雌激活胚的囊胚发育率显著高于体外受精胚(21.7%,13.0%)。     

不同化学激活方法对小鼠卵母细胞孤雌激活效果的影响

通过比较几种常用的化学激活方法对小鼠卵母细胞的孤雌激活和孤雌生殖胚胎体外发育的影响,从而筛选出小鼠卵母细胞孤雌激活的适宜方法.选取成熟小鼠卵母细胞,随机分为以下9组进行激活处理:①离子霉素(I)+6-二甲氨基嘌呤(D);②I+D+细胞松弛素B(CB);③I+放线菌酮(C);④I+C+CB;⑤φ(乙醇)=7%的乙醇(E)+D;⑥E+D+CB;⑦E+C;⑧E+C+CB;⑨Sr2++CB.比较了这9种化学激活方法以及SrCl2的作用时间和卵龄对小鼠卵母细胞激活效果的影响.实验结果表明:小鼠卵母细胞孤雌激活率与激活措施和卵龄有关;小鼠卵母细胞可以被I+D+CB或SrCl2+CB有效激活,激活率及孵化囊胚发育率均高于其他激活方法(P0.05),且以SrCl2+CB最为有效.hCG注射后20h为小鼠卵母细胞进行SrCl2激活的最适卵龄,其最佳处理时间为4h.对小鼠卵母细胞而言,6-DMAP比放线菌酮的激活效果好.     

Ca^2＋对罗非鱼EOG影响及其解毒可行性探讨

将四种浓度的Ｃａ２＋溶液和含４ｍｍｏｌ／Ｌ简Ｃａ２＋的不同浓度的Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋及其混合液，分别灌注鱼的嗅囊，研究它们对罗非鱼嗅电图（下简ＥＯＧ）的影响，并初步探讨Ｃａ２＋作为解毒剂的可行性及机制．结果表明：１）在一定浓度Ｃａ２＋范围内，ＥＯＧ振幅随Ｃａ２＋浓度的增加而增大，超此范围，则随浓度的增加而减小；２）Ｃａ２＋能使Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋中毒鱼的ＥＯＧ反应振幅接近正常值，反映其具一定解毒作用，效果顺序为Ｃｕ２＋＞Ｚｎ２＋；３）Ｃａ２＋对Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋混合液也具一定解毒作用．     

体外培养时间和表皮生长因子对牦牛卵母细胞成熟及孤雌胚胎体外发育的影响

研究在成熟液中添加表皮生长因子（Epidermal growth factor,EGF）以及成熟时间对牦牛卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎体外发育的影响,以确立牦牛卵母细胞体外成熟的最佳体系.结果表明,成熟液中添加EGF组的成熟率明显高于未添加组（P＜0.05）,并且牦牛卵母细胞的成熟率随着EGF添加的浓度增加也不断上升;随着体外培养时间的延长,成熟率逐渐增加,培养24 h后成熟率趋于稳定;胚胎体外培养液中添加EGF能显著提高孤雌胚胎的8-细胞和囊胚形成率（P＜0.05）.由此推测：在体外培养22-24 h,且添加40 μg/mL EGF最有利于牦牛卵母细胞体外成熟;胚胎培养液中添加40μg/mLEGF能显著提高牦牛孤雌胚胎的体外发育能力.     

不同培养液对卵母细胞体外成熟及重组卵母细胞孤雌活化的影响

为研究生发泡(GV)移植后的重组卵母细胞能充分在体外成熟和发育,比较了几种培养液对GV期卵母细胞体外成熟和重组卵母细胞孤雌活化的影响.自然获得的GV期卵母细胞和经显微操作获得的重组卵母细胞在M2、HTF和M199培养液培养,其体外成熟率无差异(P>0.05);但成熟的重组卵母细胞经人工活化后,生长在HTF培养液的细胞发育到2-细胞期胚的比率(49.2%)明显高于生长在M199培养液的比率(28.9%)(P<0.05).结果表明HTF培养液更适合小鼠卵母细胞的体外成熟和进一步发育.     

（2＋1）维广义KdV方程的周期孤波解

扩展了Hirota法,即将Hirota法中的测试函数用新的测试函数来替代,并利用扩展了的方法来构造（2＋1）维广义KdV方程的双周期孤波解．显然扩展的Hirota方法也可以解其他一些非线性发展方程．     

重金属（Cu^2＋,Zn^2＋）对罗非鱼嗅电图反应的影响

将Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋溶液灌入嗅觉器官，研究不同浓度重金属对鱼类嗅电图（ＥＯＧ）反应的影响，结果如下：１）正常鱼体上ＤＬ－Ｍｅｔ剂量的ｌｏｇ值──ＥＯＧ反应间呈指数函数关系Ｒ＝２１．０（１ｏｌｏｇｃ／４．９３５）；２）Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋对１０－５ｍｏｌ／ＬＭｅｔ刺激产生的ＥＯＧ反应呈抑制效应，抑制的程度随金属浓度的增加而增加；３）Ｃｕ２＋的抑制效应大于Ｚｎ２＋，约为１０余倍，Ｃｕ２＋的有效ＩＣ５０为２２．３８μｇ／Ｌ，Ｚｎ２＋为３５４．８μｐｇ／Ｌ．     

Ca~（2＋）、PEG预处理对小麦种子活力及保护酶活性的影响

本文研究了Ｃａ２＋、ＰＥＧ处理对小麦种子活力及萌发期间保护酶系统活性的影响，结果表明，Ｃａ２＋、ＰＥＧ处理可以显著提高小麦种子活力，提高种子萌发期间ＳＯＤ、ＣＡＴ、ＰＯＤ的活性．种子活力与保护酶活性密切相关．     

Ca_8Zn（SiO_4）_4Cl_2：Eu~（2＋），Mn~（2＋）荧光体中Mn~（2＋）的晶晶学格位及Eu~（2＋）－Mn~（2＋）间能量传递

合成了Ｃａ８Ｚｎ（ＳｉＯ４）４Ｃｌ２：Ｅｕ（２＋），Ｍｎ（２＋）荧光体，对荧光体进行了结构和光谱的测试与分析．结果表明，Ｍｎ（２＋）优先占据四面体配位的Ｚｎ格位，Ｅｕ（２＋）－Ｍｎ（２＋）之间存在着有效的能量传递．     

利用Calcium Orange测定Harderian腺细胞中的钙离子浓度

探讨了Calcium Orange作为Harderian腺细胞胞浆Ca^2 荧光指示探针的可能性,发现选用559nm作为激发光波长时,Calcium Orange有较强制 吸收,而Harderian腺细胞（含大量卟啉）在此波长没有吸收,利用Calcium Orange作为指示剂可以避免紫外光所引发的原卟啉介导的光动力作用,在Calcium Orange加载的Harderian腺细胞,Ionomycin引起荧光强度的增加,而用TritonX-100破裂细胞后加入钙离子螯合剂EGTA,可使Calcium Orange荧光降到低于加入Ionomycin前的强度,说明用559nm为激发光波长,Calcium Orange可以用于Harderian腺细胞胞浆Ca^2 的测定。     

金盏菊切花瓶插期生理变化与衰老关系的研究

游离脯氨酸积累和蛋白质的降解是切花衰老的生理标志，金盏菊切花经保鲜剂处理（５０ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋２００ｍｇ／Ｌ８－ＨＱ＋１００ｍｇ／Ｌ柠檬酸＋２％蔗糖）不仅能明显地降低游离脯氨酸的上升幅度，缓解切花水分胁迫，而且能延缓可溶性蛋白质的降解速率，延迟切花衰老。     

胰腺腺泡细胞胞浆游离钙浓度的测定及药物作用的研究

本文建立了用荧光指示利Fura－2测定胰腺腺泡细胞胞浆游离Ca2＋浓度（［Ca2＋］i）的实验技术,包括：胰腺腺泡的分离制备;Fura—2／AM的负载;腺泡悬液的荧光光谱测量等．测定了胰腺腺泡细胞［Ca2＋］i。的静息值和卡巴可促腺泡细胞［Ca2＋］i升高的剂量—效应关系及动力学过程,并研究了柴胡总皂甙对胰腺腺泡细胞［Ca2＋i］的影响．发现0．01mg／ml浓度的柴胡总皂甙使胰腺腺泡细胞［Ca2＋］。明显升高,0．1mg／ml浓度时可使［Ca2＋］。升高到静息值的3倍,提示柴胡总皂甙的促酶分泌作用是通过胞内［Ca2＋］i升高介导的．     

碱性钙离子水对大鼠血液酸碱度、血钙浓度及免疫功能的影响

通过研究碱性钙离子水对大鼠血液pH值、血钙浓度及免疫功能的影响,结果显示碱性钙离子水对大鼠血液pH值和血钙浓度无明显影响,对大鼠免疫功能具明显增强作用,100的功效优于25     

乌梅丸熏洗联合肛周皮下游离术对肛门瘙痒症患者PAR-2靶点的研究

目的通过研究治疗组(乌梅丸熏洗联合肛周皮下游离术)针对肛门瘙痒症皮损PAR-2(蛋白酶活化受体-2)的表达量,从而客观评价本方案的治疗效果。方法选择2013年1月至2014年10月肛门瘙痒症术后患者,随机分为治疗组20例、对照组20例、空白组10例。取术后三组第1、3、7 d的肛周皮损皮肤,采用实时荧光定量RT-PCR检测PAR-2编码基因的表达量,并进行统计分析。结果治疗组术后第1、3、7 d较对照组及空白组的表达量明显下降,且有显著性差异(P0.05)。结论乌梅丸联合肛周皮下游离术对肛门瘙痒症有良好的治疗效果。