蛋白质三元复合物空间定向作用机理的研究——BSA/SDS/天青A反应体系

应用光谱探针技术研究了牛血清白蛋白(BSA)/十二烷基硫酸钠(SDS)/天青A(AA)相互作用的吸收光谱,考察了SDS/BSA摩尔比对BSA/SDS/AA反应体系吸收光谱的影响。研究结果表明,BSA-SDS-AA三元复合物产生新的光谱吸收峰以及变色反应,主要是由于结合态AA分子空间定向作用形成的聚集体聚集程度不同所造成的。     

胶束形成前十二烷基硫酸钠与天青A变色机理的研究

应用光谱探针技术研究了胶束形成前十二烷基硫酸钠(SDS)与天青A(AA)相互作用的吸收光谱,比较了SDS和硫酸软骨素(CS)与AA相互作用的光谱曲线,考察了乙醇和NaCl对SDS-AA复合物吸收光谱的影响,对胶束形成前SDS与AA变色反应的机理进行了研究。研究结果表明,SDS-AA反应体系呈现蓝色→紫红色→蓝色的颜色变化,主要是由于SDS有序集合体中结合态AA分子定向聚集,形成聚集体的程度不同所造成的。依据c_SDS和ΔA₄₉₈/Δc_SDS的关系,确定了SDS水溶液的临界预胶束浓度(critical premicelle concentration,CPC),其数值为1.0×10-4 mol·L-1。     

亚甲蓝与硫酸化茯苓多糖相互作用机理的研究

为从分子水平认识硫酸化多糖分子与小分子之间相互作用的机理,文章采用氯磺酸-吡啶法(Wolfrom法)对茯苓多糖进行结构修饰,制得硫酸化茯苓多糖(SP)。通过理论模型测得亚甲蓝(MB)与SP最大结合数N=54,结合常数K=1.563×106,考察了反应体系中MB/SP摩尔比、NaCl、乙醇、羟丙基-β-环糊精以及Triton X-100对相互作用的影响。探讨了MB与SP相互作用产生变色反应的机理,认为其是在MB 与SP大分子间发生静电相互作用的基础上,结合态MB分子之间的疏水相互作用所引起的。     

锌试剂与壳聚糖的结合反应机理的研究

为从分子水平认识多糖分子与小分子之间相互作用的机理 ,应用光谱法研究了壳聚糖 (CTS)与锌试剂(ZCN)的相互作用机理 ;测得ZCN CTS复合物吸收光谱出现新的吸收峰所需的临界ZCN/CTS摩尔比为 2 .6 7×10 3 ,CTS对ZCN的最大结合数为 6 .93× 10 3 ,实验值与理论值相吻合 ,证明了多糖与生物探针相互作用理论模型的可靠性 ;探讨了ZCN与CTS相互作用产生变色反应的机理 ,认为其是在ZCN与CTS大分子间发生静电相互作用的基础上 ,主要由ZCN与CTS大分子间的疏水相互作用所引起     

牛血清白蛋白与金霉素结合反应的机制研究

以光谱技术与微量热技术相结合的方法研究水溶液中金霉素与牛血清白蛋白分子间结合作用的热力学性质 .荧光猝灭法测得该反应的结合常数K =2 .0 9× 10 5L/mol,结合位点数n =1.75 ,微量法测得反应的焓变△rHm=- 17.5 0kJ/mol;依据Forster非辐射能量转移机制 ,得到授体 受体间的结合距离 (r1=1.6 7nm ,r2 =1.4 6nm)和能量转移效率 (E1=0 .4 1,E2 =0 .6 6 ) .金霉素与牛血清白蛋白分子间有较强的结合作用 ,且结合力以疏水作用为主 .     

荧光法研究司帕沙星与白蛋白的作用

本文用荧光光谱法、分光光度法研究了水溶液中喹诺酮类药物司帕沙星与牛血清白蛋白 (BSA)、鸡蛋白 (CEA)的相互作用 ,求得它们间的结合常数为K鸡 =8 2 9× 10 6,K牛 =4 41× 10 7;结合位点数分别为n鸡=0 5 88,n牛 =0 793,并根据F rster非辐射能量转移机制 ,测定了司帕沙星与两种血清白蛋白相互结合时其给体 受体间距离 (R鸡 =1 99nm ,R牛 =2 0 9nm)和能量转移效率 (E鸡 =0 76 6 ,E牛 =0 714)。实验表明 ,随着温度升高 ,BSA及CEA的猝灭曲线斜率降低 ,证实了司帕沙星与BSA和CEA的相互结合作用为单一的静态猝灭过程 ,其作用机制属能量转移机制。通过两种血清白蛋白与抗菌药物司帕沙星结合反应 ,探讨了药物司帕沙星在生物体内与蛋白质的相互作用的生物学效应及其作用机理。     

CS结构修饰及其与MB空间定向相互作用机理

为从分子水平探讨硫酸化多糖与小分子相互作用机理,采用氯磺酸 吡啶法(Wolfrom法)对硫酸软骨 素(CS)进行结构修饰,应用光谱法研究了亚甲蓝(MB)与CS空间定向相互作用的机理,考察了硫取代度对CS抗 凝血活性及MB与CS相互作用的影响.测得MB与不同硫取代度的CS最大结合数分别为73、89、103和119, CS的抗凝血活性随硫取代度的增加而增加.认为MB与CS相互作用具有空间位阻效应,CS的抗凝血功能与磺 酸基有关.     

CS2+多光子光解产生CS+的动力学研究

在射流气束条件下 ,利用第一束 4 83.2nm的电离激光使中性CS2 分子通过 (3+1)共振增强多光子电离 (REMPI)制备出纯净的CS2 + 分子离子 ;用第二束解离激光在 385～ 4 35nm扫描 ,由获得的光解离碎片激发(PHOFEX)谱研究了光解CS2 + 产生CS+ 的两种动力学途径 .当第一束电离激光和第二束解离激光在时间上有约6 0ns的延迟 (远大于激光脉宽约 5ns)时 ,光解CS2 + 母体离子产生CS+ 碎片离子有明显的阈值效应 ,由PHOFEX谱确定了CS+ 的绝热出现势 (5 .85 2± 0 .0 0 5 )eV (从CS2 + 的 X 2 Πg ,3 / 2 (0 ,0 ,0 )能级位置算起 ) ,测量了 4 72 0 0～5 0 4 0 0cm-1双光子能量范围内碎片离子的分支比CS+ /S+ (从 0逐渐增加到略大于 1) .提出了这种情况下CS2 +产生CS+ 碎片离子的 [1+1]共振增强多光子解离机理 :通过单光子激发产生CS2 + ( X 2 Πg)→CS2 + ( 2 Πu)跃迁、 和 X高振动能级耦合使得可以产生到CS2 + ( B2 Σ+ u)的单光子跃迁 ,再经由 B态与4Σ-和2 Σ-排斥态耦合使CS2 + 解离为CS+ (X2 Σ+ )和S(3 P) .但是 ,当电离激光和解离激光时间上重合时 ,不再能分辨出CS+ 的出现阈值 .这表明 ,除了存在着上述的产生CS+ 的 [1+1]共振增强多光子解离机理外 ,在激光波长长于 4 2 3.8nm时还存在着 [1+1+1’]、[1+1     

CS21B2(1Σ+u)态预离解产物CS的振转布居研究

用一束波长为 2 10 .2 7nm的激光将CS2 分子激发至预离解态1B2 (1Σ+ u) ,用另一束激光通过激光诱导荧光 (LIF)方法检测碎片CS ,在 2 5 0 .5～ 2 86 .5nm获得了CS碎片A1Π←X1Σ+ 振转分辨的激发谱 .通过对光谱强度的分析 ,获得了CS碎片v″ =0～ 8的振动布居和v″=1,4～ 8振动态的转动布居 .结果发现 ,碎片CS的振动布居呈双模结构 ,分别对应于CS2 分子1B2 (1Σ+ u)态的两个解离通道 ,即CS(X1Σ+ ,v″=0～ 9) +S(3 PJ)和CS(X1Σ+ ,v″ =0～ 1)+S(1B2 ) .由此得到两个解离通道的分支比S(3 PJ) :S(1B2 )为 5 .6± 1.2 .与前人 193nm处的研究结果相比 ,2 10 .2 7nm激发更有利于S(3 PJ)通道的生成 .此外 ,实验还发现CS的转动布居不满足热平衡分布 ,为两个Boltzmann分布的合成     

水杨酸与牛血清蛋白相互作用的荧光光谱研究

应用荧光光谱研究了水杨酸与牛血清蛋白 (BSA)分子间的相互作用。研究表明 :水杨酸对BSA内源荧光的猝灭机制属于形成化合物所引起的静态猝灭 ,猝灭常数Ksv 为 1 0 97× 10 4 (mol·L- 1 ) - 1 ;水杨酸与BSA反应的结合常数为 7 377× 10 4 ,结合位点数为 1,当水杨酸浓度较低 (摩尔比小于 1∶1)时 ,它与Trp残基或其附近基团结合但并不引起Trp残基微环境的改变 ;根据F rster非辐射能量转移理论 ,计算了授体 受体间的结合距离和能量转移效率     

壳聚糖和N-羟基苯并三氮唑相互作用的NMR研究

运用液体¹H谱、固体高分辨13C谱以及脉冲梯度场测量自扩散系数等核磁共振技术,研究了壳聚糖（CS）和N-羟基苯并三氮唑（HOBt）的相互作用.结果表明,CS重复单元中2位碳上的-NH₂和HOBt唑环上的-OH之间存在较强的氢键作用,HOBt的存在可以促进CS在水溶液中的溶解,使得在水溶液中对CS进行化学改性成为可能.通过测量CS与HOBt混合溶液中HOBt的自扩散系数,计算出复合物结合与解离的平衡常数K.     

头孢噻肟钠与牛血清蛋白相互作用的光谱特征

用光谱法研究头孢噻肟钠（CS）和牛血清蛋白（BSA）在模拟生命体生理条件下相互作用的特征.结果表明CS主要以静态猝灭方式使BSA的荧光强度显著降低;利用同步荧光法研究了CS和BSA作用后牛血清蛋白的构象发生了变化;求得不同温度下二者的结合常数和结合位点数,探讨了微量金属离子对实验体系结合常数的影响,并根据热力学参数确定了CS和BSA之间主要依靠静电力结合.根据Froester非辐射能量转移机理,测定了CS与BSA相互结合时的作用距离2.56nm,表明BSA与CS之间发生了非辐射能量转移.     

藻酸双酯钠与天青A相互作用机理的研究与应用

藻酸双酯钠(ASD)与天青A(AA)反应可使天青A溶液褪色,最大褪色波长位于608 nm。应用光谱法研究了ASD与AA的作用机理,考察了反应体系中pH和AA/ASD摩尔比对ASD与AA相互作用的影响。通过理论模型测得AA与ASD最大结合数N=168,结合常数K=3.25×106。根据ASD-AA褪色体系建立了新的ASD测定方法,检测限为0.009 μg·mL-1,ASD的浓度在1～10 μg ·mL-1范围内遵守郎伯-比尔定律。该褪色体系操作简便,有较好的稳定性、选择性与准确度。据此直接测定了片剂中ASD的含量,得到满意结果。     

Study on the conjugation mechanism of colistin sulfate with bovine serum albumin and effect of the metal ions on the reaction

Colistin sulfate (CS) can quench the fluorescence of bovine serum albumin (BSA) in an aqueous solution at pH 7.40. The static fluorescence-quenching process between BSA and CS was confirmed and the binding constant, the number of binding sites and thermodynamic data for the interaction between BSA and CS were also obtained. Results showed that the order of magnitude of binding constant (K_a) was 10⁴, and the number of binding site (n) in the binary system was approximately equal to 1; electrostatic force played an important role on the conjugation reaction between BSA and CS. On the basis of the Förster theory of the resonance energy transfer, the binding distance (r) between CS and BSA was less than 7 nm. Comparing the quenching of protein fluorescence excited at 280 nm and 295 nm and from the site marker replacement experiments, it was shown that the primary CS binding site was located in the sub-domain IIA (site I) of BSA. Synchronous fluorescence spectra clearly revealed that the binding of CS with BSA can induce conformation changes in BSA. In addition, the effects of common metal ions on the binding constants of CS–BSA complex were also discussed. It was shown that, except Cu²⁺, the high metal ion concentrations improved the CS efficacy.     

脱氧核糖核酸与刚果红化学反应的机理研究

采用UV-Vis光谱法,研究了在pH 4.56的Tris缓冲溶液中脱氧核糖核酸(DNA)与刚果红(GGH)相互作用。生成的紫色配合物最大吸光度差ΔA在600 nm,反应前后吸收光谱变化明显,反应体系对比度好。在此波长下测得配合物的表观摩尔吸光系数ε=1.41×105 L·cm-1·mol-1,最大结合数n=32,最低检出限为c＝8.04×10-8 mol·L-1 等。研究了体系的酸度、温度、时间等基本反应条件,以及不同类型物质对反应体系的干扰状况。离子强度的改变对体系的吸光度有一定影响。探讨了小分子物质与DNA作用的方式及二者的分子结构、分子构象及电子云分布之间的关系。     

脱氧核糖核酸与3-氨基-6-二甲氨基-2-甲基吩嗪盐酸盐反应机理的研究

采用UV光谱法 ,发现在pH 7～ 8的缓冲溶液中 ,脱氧核糖核酸 (DNA)与 3 氨基 6 二甲氨基 2 甲基吩嗪盐酸盐 (ZR)相互作用 ,生成红色配合物 ,此配合物的最大吸收峰为 5 2 0nm。反应前后的吸收光谱变化明显 ,配合物的吸收峰值红移 70nm。测得该配合物的表观摩尔吸光系数ε =1 5× 10 6mol-1·L·cm-1;最大结合数n =30 3。研究了体系的酸度、温度、时间等基本反应条件。离子强度的改变对体系的吸光度有明显的影响。实验研究了生物大分子与小分子探针的结合模式 ,认为该反应基本符合Scatchard模型。