羊栖菜多糖的提取和分离

羊栖菜多糖是从马尾藻科植物羊栖菜（Sargassum fusiforme(Harv.)Setchel)中提取到的，具有抗肿瘤，抗凝血，降血糖，提高机体免疫功能等生理活性，本文研究用水提法提取羊栖菜多糖，考虑到提取温度，时间，加水量等因素的影响，优化提取条件，确定水提法的最佳温度80℃，提取时间3h，水加量为羊栖菜样品的3倍，并采用乙醇沉淀，透析及凝胶层析等方法对羊栖菜提取物中多糖进行沉淀，提取和分离获得4个组分，并用光谱扫描法，凝胶色谱和旋光度法鉴定其纯度，进一步研究其分离获得的组分对生物体免疫功能指标的影响。     

博落回生物碱的提取及分离工艺

采用正交实验方法研究博落回生物碱的盐酸提取工艺。结果表明：盐酸法提取的最佳工艺条件为：1．5％盐酸,固液比1：18,85℃提取3次,每次2h,提取率达到80．1％,与文献报道的醇提法相比其提取率提高20％左右。然后采用柱层析方法分离得到高纯度的血根碱和白屈菜红碱,并建立了一种HPLC法测定博落回中生物碱含量的方法。     

番茄果肉果芯固形物的分离提取及对大鼠血栓形成的影响

分别对番茄果肉及果芯的固形物进行低温分离提取,并分别采用这二种提取物对大鼠血栓形成的影响进行了研究.实验结果发现,这种提取物对大鼠的血栓形成有明显的抑制作用,其中,果芯固形物对大鼠血栓抑制效果优于果肉固形物.     

四川老坛泡菜中乳酸菌的分离与鉴定

老坛泡菜比一般泡菜具有更好的菌种多样性和菌群稳定性. 为筛选乳酸菌菌株, 从四川省眉山市仁寿县新安村农家坛龄达30年以上的老坛泡菜中, 分离得到12株疑似乳酸菌, 进行形态学观察、生理生化实验鉴定, 进一步利用16S rRNA基因序列比对、构建系统发育树, 确定疑似乳酸菌菌种. 分离鉴定出5株植物乳杆菌、3株短乳杆菌、2株肠膜明串珠菌、1株干酪乳杆菌和1株屎肠球菌, 其中以植物乳杆菌数量最多.     

一株鸭细小病毒的分离鉴定与ns基因序列分析

采用余姚某鸭场濒死鸭肝组织悬液，接种鸭胚尿囊腔增殖病毒，蔗糖梯度离心法纯化病毒，电镜观察见直径约20nm的球形病毒粒子，免疫琼脂扩散实验结果显示与鸭细小病毒（duck parvovirus，DPV）抗血清有明显沉淀线；SDS-PAGE电泳可见3条结构蛋白带，与DPV毒株一敛；参照GenBank DPVns基因序列979～1566bp设计引物，PCR扩增反应获得其目的片段．克隆到载体pMD18-T后测序，该序列与GenBank中的番鸭细小病毒（Muscovy duck parvovirus，MDPV）以及巴比里鸭细小病毒（Barbarie duck parvovirus，BDPV）的ns基因序列同源性为98％．病鸭肝组织匀浆液雏鸭感染试验显示雏鸭发病症状及剖解病理变化明显，死亡率为75％．利用血清学实验与鸭肝炎Ⅰ型、禽流感和新城疫病毒感染举别．由此确定引起本次鸭场疫病的病原为DPV，命名为04NY株．     

一株砷抗性钩端螺旋菌的分离与鉴定

以含砷金尾矿样品作为浸矿微生物生长的能源物质,利用富集培养方法从江西银山铜矿尾矿矿坑酸性废水中分离得到一株砷抗性细菌AS-1,该菌株革兰氏染色阴性,其最适生长温度在35℃~40℃之间,最适生长pH1.0~2.0。16SrDNA系统发育分析表明,该菌与嗜铁钩端螺旋菌(Leptospirillum ferriphilum)的相似度达99%,属于同一类群。浸矿试验结果显示,试验组分离菌AS-1脱砷率达到61.2%,对照组砷元素含量浸矿前后无显著差异,表明分离的AS-1浸矿菌具有较强的脱砷能力。     

大鼠睾丸支持细胞的分离培养及鉴定

通过简化、优化现有的SD大鼠睾丸支持细胞分离纯化方法,获得高纯度大量的支持细胞。选用15d的雄性SD大鼠,处死取出睾丸,采用0.25%胰蛋白酶消化的一步消化法分离支持细胞,置于35℃、5%CO2和100%湿度空气的CO2培养箱中进行培养。24h后用20mmol·L-1的Tris-HCl处理细胞,并用油红O、HE染色和Feulgen染色观察对培养的支持细胞进行鉴定。分离纯化的支持细胞纯度达到90%以上,纯化获得的细胞其形体结构与支持细胞一致。因此,一步消化法可以获得高纯度的支持细胞。     

龙须菜的无菌处理及其典型附生菌的分离鉴定

采用不同浓度的氨苄青霉素、卡那霉素、氯霉素以及放线菌酮单独及组合处理龙须菜, 利用16S rRNA基因序列和ITS序列对分离到的细菌和真菌进行分子鉴定, 比较获得无菌龙须菜的最佳抗生素处理方法. 结果表明: 100μg?mL-1氯霉素、100μg?mL-1氨苄青霉素及50μg?mL-1放线菌酮组合使用抑菌效果最好. 并从龙须菜的培养液中分离鉴定出4株细菌, 分别为鲁杰氏菌属(Ruegeria)、单胞菌属(Alteromonas)、Maribacter属和Fluviimonas属, 1株真菌为Urocystales或Fereydounia属, 其中鲁杰氏菌为龙须菜附生细菌的优势菌群.     

高效溶藻放线菌LW9的分离鉴定及其溶藻特性

从土壤中分离筛选出1株具有高效溶藻活性的放线菌LW9,利用形态学特征和16SrRNA序列对放线菌LW9进行分子生物学鉴定,并对其溶藻特性进行研究.结果表明:放线菌LW9属于链霉菌属成员,与菲律宾链霉菌(Streptomyces filipinesis)同源相似性达99.0％;LW9主要通过分泌胞外活性物质溶藻,其溶藻活...     

鰤鱼诺卡氏菌全肽聚糖的提取及鉴定

以鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)为研究材料,经扩大培养,离心集菌,用三氯乙酸处理以除去细胞壁上的磷壁酸及菌体内的核酸,甲醇、丙酮脱脂后,再经胰蛋白酶及中性蛋白酶复合酶解去除菌体内部的蛋白质,离心清洗、冻干即可制得肽聚糖.经过溶菌酶溶解试验,紫外可见光谱扫描分析证明所得产物为肽聚糖,透射电镜观察显示所提取的肽聚糖为囊状结构,且仍保持着原有的细菌细胞形态,证实所提取的肽聚糖为全肽聚糖.     

浸提法与超声波提取法提取栀子黄色素的比较

探讨了栀子黄色素提取工艺中的浸提法及超声波提取法,通过正交实验确定了其相应的优化工艺条件,分析比较得出：超声波提取栀子黄色素与传统浸提法相比,具有提取温度低、时间短的优点,且色素产品提取率高、色价高。其最佳提取工艺条件为：提取溶剂为50％的乙醇水溶液、提取时间为1h、提取温度为20℃、料液比1：12。在此条件下色素的提取率为98．84％,产品色价70．72。     

预热超声对菠萝蜜种子分离蛋白起泡性及结构的影响

采用预热超声技术改善菠萝蜜种子分离蛋白（Jackfruit Seed Isolate Protein, JSPI）起泡性,探究起泡性与结构的关系。对预热温度,超声功率,超声时间进行了优化,得到最佳条件:预热温度60℃,超声功率600 W,时间20 min。结果得出,与JSPI相比,60℃+600 W处理的JSPI起泡性增加了58.44%（P<0.05）,高于600 W（45.25%）和60℃（29.64%）。相比JSPI,泡沫稳定性没有提高（P>0.05）。SDS-PAGE凝胶电泳结果表明,600 W超声处理没有改变JSPI的分子量,60°C处理使JSPI的部分可溶性蛋白分子聚集,出现了新的蛋白条带。相关性结果表明,起泡性与JSPI的β-折叠和无规则卷曲含量成正相关。与JSPI相比,600 W,60℃,60℃+600 W处理后的荧光强度增强、表面疏水性（H0）提高,说明JSPI结构变松散,内部疏水基团暴露出来,疏水性增加,导致起泡性增加。电位结果表明,与JSPI相比,600 W处理的电位从-22.03增强至-24.53 mV（P<0.05）。60℃,60℃+600 W处理电位减弱,导致溶液体系不稳定。粒径结果表明,与JSPI相比,600 W处理粒径减小,60℃处理粒径增加。蛋白粒径减小、或占较低比例存在的粒径较大的蛋白群体均可以提高JSPI的起泡性。     

莲子心多糖的提取、分离和抗氧化活性研究

干燥的莲子心经机械粉碎、乙醇脱脂、沸水提取、乙醇沉淀及中性酶和Sevag法除蛋白得其粗多糖,经DEAE-Cellulose-32阴离子交换和SephacrylTM S-200凝胶过滤层析得组份ELPS-Ⅰ和混合物Ⅱ,Ⅱ再经过DEAE-Cellulose-32柱层析得组份ELPS-Ⅱ.GC-MS法测定粗多糖、ELPS-Ⅰ和ELPS-Ⅱ的中性糖组成.凝胶过滤色谱(GPC)法测得ELPS-Ⅰ和ELPS-Ⅱ的重均分子量分别为4.97×104 Da和2.96×106 Da.β-胡萝卜素漂白实验结果显示莲子心粗多糖具有显著的抗氧化活性(维生素C作为阳性对照).     

海洋来源产淀粉酶放线菌的分离鉴定、诱变选育及培养条件优化

采用鉴定培养基初步筛选产淀粉酶的菌株,利用YOO改良法测定其酶活力,复筛产酶能力强的菌株作为研究对象.通过热、超声波及紫外线等多种物理诱变选育高产淀粉酶菌株;采用单因子及正交试验优化菌株产酶培养条件.通过形态鉴定、生理生化鉴定以及分子生物学手段对其16S rDNA进行测序,建立系统发育树,进行系统学分析.结果从浙江舟山沿海海泥、海藻中分离到产淀粉酶的放线菌菌株43株,其中产淀粉酶能力较高的3株.放线菌A24产淀粉酶能力经选育后有较大提高:从初始酶活力111.5 U.mL-1经紫外诱变增至282.7 U.mL-1,再经培养优化后提高到353.67 U.mL-1.经形态、生理生化鉴定及16S rDNA的系统发育学分析结果表明A24菌株为Streptomycessp.A24,GenBank登录号GU184337.     

聚合物结构与其膜的气体渗透性

对聚合物结构与膜的气体渗透性之间的关系进行了简要综述，并就高性能分离膜材料应该具备的高分子链结构及聚集态结构作了进一步探讨。     

一株嗜温高效产氢细菌Clostridium sp.08-1的分离鉴定与产氢特征

从10L连续搅拌式罐式反应器(CSTR)中分离得到1株嗜温高效产氢菌株08-1.根据菌株的形态特征和16S rDNA序列结果分析,初步鉴定菌株08-1属于Clostridium sp..同时还进一步研究了温度、pH值控制、底物浓度和种类对菌株08-1产氢的影响.结果表明.该菌株更适合利用蔗糖或成分复杂的生物质木薯粉以及废弃物厨余垃圾生长及产氢,最适产氢温度为40℃,产氢系统pH值控制在5.5时获得最大产氢量.在间歇发酵中,蔗糖浓度为20 g/L,控制温度40℃,pH值5.5,搅拌速度100 r/min时实现最大产氢速率为245 mL·(L·h)~(-1),最大产氢量达到3.06 mol.该菌株在生物制氢中具有潜在的应用价值.     

葛根总黄酮的分离与纯化

通过静态和动态吸附与脱附的比较,从5种国产大孔树脂中优选了AB-8型大孔树脂对微波辅助萃取的葛根总黄酮粗液进一步分离纯化研究.考察了进液浓度、进液量、进液流速和pH值对吸附的影响,确定了它们的适宜工艺条件分别为6.693 1 mg·mL-1、3 BV、1.0 mL·min-1和pH 7.考察了洗脱液乙醇浓度、洗脱液流速和洗脱液量对脱附的影响,确定了它们的适宜工艺条件分别为70%、1.0 mL·min-1和5 BV.在适宜工艺条件下分离纯化后的葛根总黄酮产品纯度可达70%.建立了Langmuir等温吸附方程,该模型与实验值吻合较好.实验还进行了脱附葛根素的研究,结果表明,用浓度为10%的乙醇水溶液脱附的葛根素浓度可高达40%.     

不同提取方法对白木通果胶的结构及凝胶性与乳化性的影响

采用柠檬酸法、盐酸法和纤维素酶法制备出三种白木通果胶（CEP,HEP和CLEP）,并研究不同的提取方法对白木通果胶得率、结构及凝胶性与乳化性的影响。结果表明:CLEP具有最高的得率（15.22%）和半乳糖醛酸含量（85.24%）,且灰分含量（4.85%）显著高于其他2种果胶（1.03%～2.59%）;HEP（54.18%）为高酯果胶,而CEP（40.65%）和CLEP（36.06%）为低酯果胶。CEP,HEP和CLEP的分子量分别为220.50,265.90和15.46 kDa。红外光谱显示,3种果胶均具有果胶的特征官能团峰。X-衍射图谱表明CLEP具有更多完好的晶体。质构分析表明,HEP的凝胶强度（16.70 g）最大,其次是CLEP（11.03 g）,CEP最差（3.09 g）。此外,3种白木通果胶的乳化性随pH值的变化差异显著,其中HEP表现出最强的乳化活性,而CLEP具有最强的乳化稳定性。综上,白木通果胶在食品工业和医药等商业应用方面具有潜力,且酶法提取的白木通果胶性能相对优于酸法。     

浙江省患病凡纳对虾副溶血弧菌的分离、鉴定及毒力基因分析

对浙江省发病凡纳对虾进行了弧菌分离、鉴定, 对分离菌株进行了API-20E生化鉴定, 不耐热毒素基因tlh、致病基因tdh、trh和毒力基因pir的PCR检测, 以及高致病性副溶血弧菌对小鼠致病性研究结果显示, 150个分离菌株中共检出tlh基因菌株61株(40.67%), ap阳性菌株21株(14.00%); 189个固定样品中检出副溶血弧菌阳性样品108个(57.14%), ap阳性样品24个(12.70%); 所有tlh阳性样品中均未检出tdh、trh毒力基因; ap阳性副溶血弧菌灌胃小鼠死亡率为20%, 且其培养上清液有弱溶血效价. 表明副溶血弧菌在浙江省凡纳对虾弧菌感染中占有重要地位, 高致病性副溶血弧菌在副溶血弧菌中占较高比例, ap阳性副溶血弧菌对小鼠具有一定毒力和溶血性.     

基于邻域总变分和边缘检测的遥感影像道路提取

针对道路提取的同物异谱和同谱异物难题,提出了一种基于邻域总变分和边缘检测的遥感影像道路提取方法,先对原始影像进行邻域总变分分割,提取出影像中具有均匀材质的地物,并采用Canny边缘检测方法获得原始影像的边缘数据;然后将边缘数据和分割结果融合,使均匀材质区域中的非道路地物和道路分离;最后采用多方向结构进一步提取狭长并具有一定宽度的道路.实验证明本文提出的道路提取方案能同时提取影像中光谱略有差异的道路,能有效剔除和道路黏连在一起的同谱异物地物,并能提取具有一定弯度的道路.