高效液相色谱-荧光检测法测定保健食品中的维生素K1和维生素K2

维生素K又称凝血维生素,包含维生素K1、K2、K3、K4等4种形式,最早于1929年由丹麦化学家达姆从动物肝脏和麻子油中发现.维生素K1、K2均为脂溶性化合物,属于2-甲基-1,4-萘醌衍生物.维生素K1存在于绿色植物中,是食物中维生素K的主要来源;维生素K2主要由肠道细菌合成.维生素K1、K2主要参与肝脏凝血酶原和其...     

高效液相色谱外标法测定反应液中2-甲基萘和β-甲萘醌的含量

<正>β-甲萘醌即2-甲基-1,4-萘醌是制备K类维生素(K_1～K_4)的原料和重要的中间体,被广泛应用于精细化工和医药行业~([1-3])。在目前的工业生产中,主要以2-甲基萘为原料催化氧化制备β-甲萘醌,合成方法主要有液相氧化法和气相氧化法~([4])。我国2-甲基萘资源丰富、廉价易得。液相氧化法催化氧化     

维生素K3的激发三重态与色氨酸、酪氨酸电子转移氧化反应的激光闪光光解研究

利用时间分辨的激光闪光光解技术研究了乙腈-水混合溶液(1:1,V/V)中2-甲基萘醌(通常称为维生素K3)的激发三重态对色氨酸、酪氨酸的光敏氧化机理.通过瞬态吸收光谱的变化可以推断维生素K3的激发三重态可以与色氨酸、酪氨酸发生电子转移反应,反应形成的维生素K3阴离子自由基的吸收峰可以直接从瞬态吸收谱图中观察到.维生素K3与色氨酸、酪氨酸的电子转移反应的速率分别为1.1×109和0.6×109L·mol-1·s-1.吉布斯自由能(ΔG)的计算结果表明维生素K3的激发三重态与色氨酸、酪氨酸电子转移反应在热力学上是可行的.     

碳纳米管-TiO_2修饰电极伏安法测定维生素K_3

利用碳纳米管、二氧化钛两种纳米材料制成碳纳米管-TiO2复合膜修饰电极,进行了维生素K3电化学行为的研究。维生素K3在碳纳米管-TiO2复合膜修饰电极的电化学响应优于碳纳米管修饰电极,表明前者具有更好的催化作用。通过条件实验的优化,结果表明维生素K3在pH=9.42的氨水-NH4Cl底液中,富集时间为10s,富集电位于-0.60V,扫描速度为0.1V/s时有稳定的灵敏的氧化还原峰。峰电流与维生素K3浓度在3.0×10-6～8.0×10-5mol/L范围内呈良好的线性关系,检出限为5.0×10-7 mol/L。考查了修饰电极的重现性,5次平行测量的RSD为1.78%。该方法用于片剂药品中维生素K3含量的测定,回收率在97.5%～102%之间。     

电化学活化玻碳电极吸附伏安法测定维生素K

维生素K类物质可在经电化学活化的玻碳电极上吸附富集并产生良好的伏安响应, 依此建立了吸附伏安法测定维生素K1和K3的方法. 在0.1 mol/L HCl的支持电解质中, 维生素K1在-0.025 V左右产生一对氧化还原峰, 其峰电流与浓度在1.1×10-6～2.2×10-5 mol/L范围内成良好的线性关系, 检出限为4.4×10-7 mol/L; 维生素K3则在+0.059 V左右产生一对氧化还原峰, 其线性范围为1.8×10-7～3.0×10-5 mol/L, 检出限为9.1×10-8 mol/L. 该方法可用于测定药品中的维生素K1和K3.     

聚中性红膜修饰碳糊电极的电化学研究及其对维生素K3的检测

在一定温度下,以K2S2O8作引发剂,分别采用化学引发-电聚合和电引发-电聚合的方法制备了聚中性红膜修饰碳糊电极(PNR/CPE)。运用循环伏安法(CV)对修饰电极进行表征,并通过扫描电子显微镜(SEM)对聚合膜的表面形貌进行观察分析,推断了成膜的可能机理,探讨了最佳聚合条件。研究了维生素K3在该修饰电极上的电化学行为,并用差分脉冲伏安法(DPV)对其含量进行了测定。研究结果表明:经过化学引发后,中性红单体自由基增多,提高了成膜效率,此电极在NH3-NH4Cl溶液中对维生素K3有更好的电催化作用,其还原峰电流与浓度在2.0×10-6~1.2×10-4 mol/L范围内呈现出良好的线性关系,检出限为2.0×10-7 mol/L,回收率为94.7%~108.0%。     

一种同位素稀释超高效液相色谱质谱联用测定维生素K1的方法

本发明公开了一种同位素稀释超高效液相色谱质谱联用快速灵敏地测定维生素K1的方法,包括步骤:(1)维生素K1对照品溶液和维生素K1同位素内标溶液配制;(2)建立维生素K1标准曲线;(3)采集待测样品溶液的色谱图;(4)待测样品中维生素K1浓度的确定。本发明的同位素稀释超高效液相色谱–质谱联用测定维生素K1的方法用于血清中维生素K1的测定时,简单快速,专属性强,精密度、准确度高,灵敏度好。     

反相高效液相色谱-化学发光法测定复合维生素片剂中的维生素B1和B2

基于水溶性维生素在碱性介质中只有维生素B1(VB1)和维生素B2(VB2)可以被K3Fe(CN)6直接氧化产生化学发光的原理,建立了反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离柱后化学发光检测VB1和VB2的新方法,并成功应用于复合维生素B片剂中VB1和VB2的测定。该方法测定VB1,VB2的线性范围分别为1.0×10-3～1.0 g/L和1.0×10-3～0.1 g/L,检出限分别为2×10-4 g/L和8×10-4 g/L。对1.0×10-2 g/L VB1,VB2溶液连续11次测定的相对标准偏差     

正相高效液相色谱法测定维生素E保留时间稳定性的提高

维生素E有许多同系物,其中以4种生育酚异构体（即α-,β-、γ-、δ-生育酚）的活性最高,其主要的生理功能是抗氧化作用。维生素E的定量方法有分光光度法、薄层层析法、荧光法、气相色谱法和高效液相色谱（HPLC）法等,其中HPLC法因具有快速、准确、样品处理简单以及分辨率高等优点而成为维生素E测定的首选方法。HPLC法测定维生素E既可以采用正相HPLC法也可以采用反相HPLC法。从近年发表的文献看,反相HPLC法的应用比正相HPLC法更普遍一些,这是由于反相HPLC法在实际应用中具有色谱柱性能稳定、保留时间恒定和色谱柱平衡快速等优点。但反相HPLC法测定维生素时维生素E与某些亲脂性化合物反应生成部分沉淀造成色谱峰峰形明显变差。     

单扫描极谱法测定注射液及血清中维生素K1

建立了维生素K1的极谱测定方法.在0.05 mol·L-1 NH4Cl-NH3(pH 8.58)缓冲溶液中,维生素K1可产生一极谱还原峰,峰电位Ep为-0.39 V ;其二阶微分峰峰电流ip″与维生素K1的浓度在1.1×10-7 ～2.2×10-5 mol·L-1范围内呈线性关系,相关系数r=0.998 6(n= 9 );方法的检出限为4.0×10-8 mol·L-1.13次平行测定2.2×10-5 mol·L-1维生素K1还原波二阶导数峰峰电流ip″的相对标准偏差(RSD)为1.83%.本法可直接用于注射液及血清中维生素K1含量的测定.     

高效液相色谱法对食品中维生素K1的定量测定

介绍了用高效液相色谱法（HPLC）对食品中维生素K1的定量测定方法。采用异辛烷加缓冲液和碱作为维生素K1的萃取剂,以C18柱和甲醇-乙腈-水-四氢呋喃为色谱分离体系,在波长254nm的紫外检测器上对24种食品中维生素K1进行了定量测定。方法简单、准确、用途广、范围宽。变异系数3.2％～7.2％,回收率87.69％～100.30％。     

反相高效液相色谱法测定维生素K_2软胶囊中K_2(20)含量

采用外标法测定维生素K2软胶囊中维生素K2(20)的含量,建立了维生素K2(20)软胶囊含量的RP-HPLC测定方法.色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18 (150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇,检测波长为270 nm,流速为1.0 mL/min,线性范围为0.014～0.41 μg (r=0.9997).本法操作简便,重现性好,可用于维生素K2(20)软胶囊质量标准的建立及含量测定.     

动力学光度法测定痕量维生素K3的研究

在氢氧化钠介质中,微量维生素K3,对高碘酸钾氧化苯并红紫4B褪色反应有明显的催化作用,据此建立了测定维生素K3含量的动力学光度分析法.确定了反应动力学参数,方法的线性范围为0.02～1.1 μg/mL.检出限为1.0×10-8 g/mL.方法用于维生素K3片剂中维生素K3含量的测定,结果令人满意.     

差分脉冲溶出伏安法测定血清中维生素A、D_3和E

<正>维生素A(VA)、维生素D3(VD3)和维生素E(VE)是维持人体正常生理活动和机能的脂溶性维生素,缺乏这些维生素会导致多种疾病。目前有多种方法测定VA、VD3、VE的含量,如放射免疫法[1]、荧光分光光度法[2-3]和高效液相色谱法[4-6]等,但各有优缺点。放射免疫法虽然有专用的试剂盒,但价格昂贵;荧光分光光度法及高效液相色谱法所需仪器昂贵,操作复杂,分析时间长,不易临床推广。     

统计学在理论检验中的应用：第六讲 正态分布及其检验（续）

2　用夏皮罗 -威尔克 (Shapiro-Wilk)法检验数据正态性将数据按由小到大的顺序排列。夏皮罗 -威尔克法检验的统计量是 :W ={∑a K[Xn 1 - K - XK] }2 / ∑nK=1( XK - X) 2　　式中的 K值 ,对于测量次数 n是偶数时则为 1～ n/ 2 ;对于测量次数是奇数时则为 1～ ( n- 1 ) / 2。式中系数 a K 是与 n及 K有关的特定值 ,见表 4。该统计量的判据是 ,当 W>W( n,P)时 ,则接受测定数据为正态分布。W( n,P)是与测量次数 n及置信概率 P有关的数值 ,其值见表 5。对表 3中所列数据 ,按夏皮罗 -威尔克法进行检验 ,见表 6。为了便于计算 ,把值 XK…     

新型三元配合物[RE(C_7H_5O_3)_2(C_6H_4NO_2)·H_2O](RE=La,Ce,Nd)的合成、光谱特性和热化学性质

采用均匀沉淀法,在20%的乙醇水溶液中,用水杨酸、维生素B3与稀土硝酸盐合成了一类新的稀土三元配合物.通过元素分析、化学分析、摩尔电导、红外光谱、紫外光谱、热重-微分热重分析等手段对配合物的结构和性质进行表征,确定了它们的组成通式为[RE(C7H5O3)2(C6H4NO2)·H2O](RE=La,Ce,Nd).维生素B3吡啶环上的N原子和水杨酸的酚羟基均未参与配位,两种配体均是脱质子后以羧酸根与RE3+离子配位,且成键以离子性为主,兼有部分共价性.在298.15 K,用精密的溶解-反应热量计分别测量了配位反应相关各物质的溶解焓,根据盖斯(Hess)定律求得合成反应的标准摩尔反应焓r mHФ分别为:(180.61±0.72)、(187.25±0.68)和(185.61±0.26)kJ/mol.进而求出配合物的标准摩尔生成焓为:f mHФ[La(C7H5O3)2(C6H4NO2)·H2O(s),298.15 K]=-(2493.9±2.9)、f mHФ[Ce(C7H5O3)2(C6H4NO2)·H2O(s),298.15 K]=-(2441.0±2.8)和f mHФ[Nd(C7H5O3)2(C6H4NO2)·H2O(s),298.15 K]=-(2463.1±2.9)kJ/mol.     

维生素K3在二茂铁修饰碳糊电极上的电化学行为及其测定

制备了二茂铁(Fc)修饰碳糊电极(Fc/CPE)并采用扫描电子显微镜(SEM)和电子能量散射谱(EDS)技术观察其表面形貌和分析其组成。采用循环伏安法(CV)和计时电量法(CC)研究了维生素K3(VK3)在该修饰电极上的电化学行为并计算了电极过程的动力学参数。Fc/CPE对VK3的电化学氧化还原具有良好的催化作用,VK3在该修饰电极上的电极反应为两电子、两质子参加的受扩散控制的可逆过程。采用差分脉冲伏安法(DPV)测得催化还原峰电流与VK3浓度在2.56×10-4～2.18×10-6mol/L范围内呈线性关系,检出限为1.6×10-7mol/L。方法可用于市售维生素K3注射液中VK3含量的测定。     

溶出伏安法对维生素K3的研究与测定

应用微分脉冲溶出伏安法(DPSV)对维生素K3在玻碳电极(GCE)上的电化学行为进行了研究.在氨水-NH4Cl(pH 9.0)底液中,对维生素K3进行循环伏安扫描,发现有一对良好的氧化还原峰出现,对电极反应机理进行了探讨.阴极溶出伏安峰电流与其浓度在2.0×10-6～1.0×10-4mol·L-1范围内呈线性关系(r=0.998 5),检出限为4.0×10-7mol·L-1.对于1.0×10-5mol·L-1的维生素K3,平行7次测定结果的RSD为1.15%.应用此方法对亚硫酸氢钠甲萘醌注射液进行了测定,方法的回收率为97.3%～102.5%.     

离子选择性电极电位滴定法测定维生素B1的含量

1 引言 维生素B1化学名称为氯化4-甲基-3-[(2-甲基-4-氨基-5-嘧啶基)甲基]-5-(2-羟基乙基)噻唑盐酸盐,作为一种药物,可以维持正常糖代谢及神经消化系统功能,用于防治缺乏维生素B1所致的脚气病,也用于神经炎、消化不良等症的辅助治疗.目前我国药典法规定维生素B1注射液及其片剂中维生素B1含量采用分光光度法测定.国外有人研究采用银离子选择性电极,在0.5mol/L NaOH溶液中用电位滴定法测定维生素B1含量,而国内未见报道.本研究采用离子选择性电极,在水溶液中用电位滴定法测定维生素B1的含量.     

差分脉冲伏安法同时测定维生素B2和维生素B12

用循环伏安法制备了银掺杂聚L-精氨酸修饰玻碳电极(Ag-PLA/GCE),研究了修饰电极的电化学交流阻抗及维生素B2和维生素B12(Vb2)在Ag-PLA/GCE电极上电化学行为,分析了维生素B2(Vb12)的吸附特性,建立了同时测定Vb2和Vb12的新方法。阻抗图谱说明,由于Ag-PLA修饰,提高了电子传输速率。当Vb2和Vb12同时存在时,在pH 5.0的磷酸盐缓冲溶液中,采用差分脉冲伏安法(DPV法)进行扫描测定,Vb2和Vb12的氧化峰电位分别为-0.470 V和-0.880 V,两种维生素的峰电位差值为:ΔE=0.410 V,不需分离,可同时进行测定。同时测定Vb2和Vb12的线性范围分别为0.10~15.0μmol/L和0.75~12.5μmol/L,检出限分别为0.03μmol/L和0.5μmol/L。方法已用于复合维生素药片中维生素B2和维生素B12的测定。