基于衍生化技术的游离脂肪酸的色谱-质谱分析方法研究进展

游离脂肪酸在生物体内含量极低,由于结构中缺少易电离的官能团,导致质谱分析时检测灵敏度不高。利用化学衍生化技术对其进行结构修饰是改善色谱行为和提高质谱响应的有效手段。近年来,化学衍生化结合色谱和质谱技术在游离脂肪酸检测中得到广泛应用。该文综述了国内外基于衍生化技术的游离脂肪酸分析方法及其应用研究进展。     

衍生化毛细管气相色谱法分析血清中的游离脂肪酸

用H2SO4/甲醇对血清中游离脂肪酸进行甲酯化反应,考察了不同温度和时间以及不同的衍生条件对甲酯化完全程度的影响,确定了对血清中游离脂肪酸衍生化完全的条件为：在62℃下用10%H2SO4/甲醇溶液衍生化2h。大部分脂肪酸的衍生反应和色谱分析的相对标准偏差都在3.00%以内。用各脂肪酸和内标色谱峰面积的比值对脂肪酸浓度作标准曲线,线性回归系数在0.999-1之间,定量测定了5个不同地区的250个血清样品中12种游离脂肪酸的含量。     

微波辅助衍生化-气相色谱法测定烟草中非挥发性有机酸

在气相色谱法测定烟草中非挥发性有机酸中,提出了用硫酸-甲醇(1+7)混合溶液作衍生试剂,在微波炉中于选定的条件下对所测定的有机酸进行衍生化.经酯化的溶液用二氯甲烷萃取,萃取液蒸缩至2 mL,分取1μL进样作气相色谱分析.测定中采用AC 20毛细管柱及火焰离子化(FID)检测器并用戊二酸作内标,对7种非挥发性有机酸用标准...     

微波消解衍生化气相色谱-质谱法测定鲨鱼软骨中的脂肪酸

 研究了用微波技术消解衍生化气相色谱 质谱法 (GC MS)快速测定鲨鱼软骨中脂肪酸的分析方法。用正交设计试验优化消解衍生化条件 ,以盐酸 甲醇 (体积比为 1∶4)体系作消解衍生化溶液 ,在 60 0W微波功率作用下加热 4min进行样品的前处理 ,将样品的消解、脂肪酸的衍生化及脂肪酸甲酯的萃取融于一体。方法具有灵敏度高、省时、省试剂、操作方便等特点。该法适用于大批量固体样品中脂肪酸的测定。     

荧光衍生化法测定牛奶中氯霉素残留的研究

研究氯霉素荧光衍生化反应的实验条件，建立荧光分光光度法测定牛奶中氯霉素残留的新方法。牛奶中的氯霉素，用乙酸乙酯超声提取3次，浓缩，盐水溶解，正己烷脱脂，再经乙酸乙酯反萃取，氮气吹干，经还原，用荧光胺衍生化测定。氯霉素衍生化产物质量浓度在12．5～500ng／mL范围内，相对荧光强度与质量浓度关系为F=1．44 0.1424ρ，r^2=0．9998。加标回收率为81％～87％，相对标准偏差为3．9％～8．4％。本方法牛奶中氯霉素可达2．5ng/mL。     

固相萃取-衍生化-气相色谱质谱法测定水中9种烷基酚类化合物

针对地表水、地下水及饮用水中9种烷基酚类化合物的含量检测,建立了一种适合于气相色谱-质谱分析的衍生化方法。分别对样品预处理的衍生化温度、反应时间、水体样品pH、洗脱溶剂类型及用量进行优化。优化结果表明,烷基酚类化合物的质量浓度在20.0～1 000μg/L范围内与色谱峰面积具有良好的线性关系,线性相关系数均不低于0.999 1,方法检出限为4.49～9.46 ng/L。地表水、地下水及饮用水样品加标回收率为77.6%～98.8%,测定结果的相对标准偏差不大于11.4%(n=7)。该方法适用于地表水、地下水及饮用水中烷基酚类化合物的检测。     

分散液液微萃取-衍生化高效液相色谱-荧光检测法测定环境水样中4种酚类内分泌干扰物

为实现小体积环境水样中酚类化合物的准确、快速、高灵敏测定,通过分散液液微萃取(DLLME)和荧光衍生化的结合,建立了高效液相色谱-荧光检测(HPLC-FLD)双酚A、壬基酚、辛基酚和对特辛基酚的分析方法。考察并优化了DLLME和衍生化条件,结果表明,最优的DLLME条件为萃取剂氯仿用量70μL,分散剂乙腈用量400μL,漩涡振荡3 min,高速离心2 min。以2-[2-(7 H-二苯并[a,g]咔唑-乙氧基)]-乙基氯甲酸酯(DBCEC-Cl)为柱前衍生试剂,在pH10.5的Na2CO3-NaHCO3缓冲液/乙腈溶液、50℃下衍生反应3 min得到稳定的衍生产物,于10min内实现了4种酚衍生物的分离。方法的检出限为0.9~1.6 ng/L,定量限为3.8~7.1 ng/L,具有良好的线性、精密度和回收率,与以往报道的方法相比具有一定的优势和实用性,可用于造纸厂废水、湖水、生活废水、自来水中4种酚类内分泌干扰物的测定。     

微波辅助衍生化GC-MS法测定食用油中的脂肪酸

利用微波技术,研究了用ＫＯＨ－甲醇,Ｈ２ＳＯ４－甲醇－甲苯、ＨＣｌ－甲醇等不同体系对食用油中的脂肪酸进行了衍生化,系统地比较了它们的优劣势,以及适合的分析对象,在１ｍｉｎ内完成衍生物生化反应,选用正庚烷代替传统方法的苯＋石油醚作为脂肪酸甲酯蝗提取剂,与传统消解及衍生化方法相比,具有节省溶剂,省时,易于操作等特点。     

高效液相色谱-荧光衍生法快速测定地沟油中的长链脂肪醛

本研究利用地沟油精炼过程中会产生醛类化合物的特点, 以O-(3-(9H-咔唑-9-基)丙基)羟胺为荧光衍生化试剂, 采用高效液相色谱法测定己醛、庚醛、辛醛、壬醛、癸醛5种长链脂肪醛来鉴别地沟油及食用油中是否掺杂地沟油. 10 μL待测油样品溶于200 μL异丙醇, 在最佳条件下与O-(3-(9H-咔唑-9-基)丙基)羟胺反应生成稳定的衍生物, 乙腈萃取后进样分析.以乙腈-水(90∶10, V/V)为流动相, 在λex /λem=292 nm/348 nm下荧光检测, 衍生物在C18柱上15 min内可完全分离.检测5种脂肪醛的线性范围均为0.01~1.00 μmol/L, 检出限为0.05~0.10 nmol/L, 加样回收率为95.6%~101.4%.待测油样品的测定结果表明, 食用油基本不含上述5种脂肪醛, 而精炼地沟油中5种脂肪醛含量显著增加, 因此5种脂肪醛含量可作为检测地沟油的指标.本方法专属性强、灵敏度高、准确性好,方便,快捷, 可用于快速检测地沟油.     

微波萃取高效液相色谱法测定塑料及其制品中荧光增白剂

采用微波萃取高效液相色谱法对塑料及其制品中5种荧光增白剂含量进行测定。将样品冷冻粉碎,过0.84mm的分样筛,用25 m L三氯甲烷–丙酮(3∶2)为萃取剂,在90℃的条件下微波萃取10 min,用高效液相色谱进行定性定量分析。采用Acclaim Phenyl-1柱(150 mm×4.6 mm,3μm)为分析柱,以甲醇–水(95∶5)为流动相,荧光检测器激发波长为365 nm,发射波长为430 nm。2,5-双(5-叔丁基-2-苯并恶唑基)噻吩(OB)、1,4-双(苯并恶唑基-2-基)萘(KCB)、4,4'-双(2-苯并恶唑基)二苯乙烯(OB–1)、4-(2-苯并恶唑基)-4'-(5-甲基-2-苯并恶唑基)二苯乙烯(KSN)和4,4'-双(2-甲氧基苯乙烯基)联苯(FP–127)5种荧光增白剂的质量浓度在0.5~150μg/L范围内与色谱峰面积呈良好线性关系,相关系数r≥0.999 7,检出限为0.013~0.025 mg/kg,加标回收率为84.7%~104.7%,测定结果的相对标准偏差为1.5%~4.4%(n=6)。该方法简便、准确、灵敏度高,适用于塑料及其制品中荧光增白剂含量的测定。     

微波消解同时衍生化GC—MS法测定血浆中脂肪酸的研究

研究了利用微波能对样品进行加热,以Ｈ２ＳＯ４－甲苯－甲醇体系作衍生化试剂,在消化的同时对血浆中的脂肪酸进行衍生化,然后用ＧＣ－ＭＳ法测定血浆中脂肪酸。对微波功率、微波加热时间、消解及衍生化试剂等条件进行了优化,测定结果较好。该法整个消化及衍生化过程只需２ｍｉｎ,与传统方法相比大大缩短了实验操作时间,特别适用于大量样品的测定。     

微波萃取–高效液相色谱荧光检测法测定食品包装用纸中11种荧光增白剂

采用微波萃取高效液相色谱荧光检测法测定食品包装用纸中11种荧光增白剂含量.将样品剪成约0.5 cm×0.5 cm的碎片,用体积分数为40％的乙腈水溶液(含体积分数为0.6％的三乙胺),于80℃微波萃取15 min,用高效液相色谱仪进行定性定量分析.采用Kromasil 100–5型C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)作为分析柱,荧光激发波长为362 nm,发射波长为410 nm,11种荧光增白剂可以较好的分离.11种荧光增白剂质量浓度线性范围为2～150μg/L,相关系数均不小于0.9996,方法检出限为0.1～0.2 mg/kg,定量限为0.3～0.6 mg/kg.样品加标平均回收率为86.0％～108.4％,相对标准偏差为0.4％～4.9％(n=6).该方法前处理简便,检测高效,灵敏度高.     

固相萃取-衍生化-气相色谱-质谱联用法同时测定尿液中4种阿片类物质

公安机关用胶体金尿检法对海洛因滥用者的检测常常受到阿片类镇咳药的干扰,使用传统液-液提取法进行实验室检验,操作效率低,灵敏度不高,无法满足公安机关打击涉毒案件的需要。为此,该研究建立了尿液中吗啡、O⁶-单乙酰吗啡、可待因和乙酰可待因4种阿片类物质的固相萃取和衍生化技术结合气相色谱-质谱联用(GC-MS)同时检测方法。尿样用磷酸盐缓冲液调节至pH=6后,经MCX固相萃取柱净化,用N-甲基-N-(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺(MSTFA)对吗啡、O⁶-单乙酰吗啡、可待因进行衍生化,供GC-MS检测。考察了上样和洗脱流速、淋洗液中甲酸体积分数、洗脱液中氨水体积分数、3%(v/v)甲酸甲醇淋洗液体积和固相萃取柱吹干时间对萃取效果的影响。确定上样和洗脱流速1.0 mL/min,淋洗液中甲酸体积分数3%,洗脱液中氨水体积分数5%, 3%(v/v)甲酸甲醇淋洗液体积1 mL,吹干时间1 min为最佳条件。在此条件下,4种阿片类物质在0.02～0.8μg/mL范围内线性关系良好(r²≥0.998),检出限(LOD)为0.001 6～0.00...     

荧光衍生化-磁分散固相萃取/高效液相色谱检测池塘水与蔬菜中3种挥发性异味物质

以6-碳酰氯左氧氟沙星(LFC-Cl)为衍生试剂,磁性氧化石墨烯(MGO)为吸附剂,建立了2-甲基异莰醇(2-MIB)、土臭素(GSM)和3-甲基-1-丁醇(3-MB)的高效液相色谱荧光检测(HPLC-FLD)分析方法。在浓度为0.05 mol/L的4-二甲氨基吡啶(DMAP)乙腈溶液中,衍生温度60℃,反应时间90 min,超声波辅助条件下,可完成上述3种醇类挥发性异味物质(VOCs)的衍生化。在吸附剂用量20 mg、萃取时间20 min、解吸剂为乙腈(含1%甲酸)、解吸时间3 min条件下,能实现3种异味物质衍生物的富集和净化。在优化的HPLC条件下,15 min内可实现3种衍生物的基线分离和高灵敏检测。方法检出限(LOD)为0.020～0.95 ng/L,定量下限(LOQ)为0.10～3.3 ng/L,线性、精密度和回收率良好。与已报道的方法相比,该方法具有灵敏度高、样品前处理简单、仪器普适性好等优势,可用于池塘水、蔬菜中VOCs的快速、定量测定,为食品和环境水样监测提供了一种新方法。     

固相萃取-衍生化气相色谱/质谱法测定制药厂污水中的环境雌激素

采用固相萃取-衍生化气相色谱/质谱法(GC/MS)测定某制药厂污水中的雌酮(E1)、雌二醇(E2)、雌三醇(E3)和乙炔基雌二醇(EE2)4种雌激素化合物。样品经固相萃取柱萃取富集及双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺(1%三甲基氯硅烷)（BSTFA(1%TMCS)）衍生化后进行GC/MS分析。该法对4种目标物的检出限为1.8～4.7 ng/L,相对标准偏差为2.3%～9.1%(n=8)。目标化合物的加标回收率为（94.0±2.9）%～（101±3.8）%,说明该方法能较好地应用于污水中雌激素化合物的定量检测。通过对某制药厂污水中的雌激素进行定量分析,发现污水中乙炔基雌二醇和雌酮质量浓度分别达396.6 和39.9 ng/L;经过传统的厌氧兼氧好氧生物处理后,污水中的环境雌激素的去除率仅为35%～40%,说明传统的污水处理工艺对去除污水中雌激素效果并不明显,需要改进。     

动态液相微萃取-微波衍生化-气相色谱/选择离子检测-质谱法测定毛发中的苯丙胺类毒品

建立了一种便捷的毛发中4种苯丙胺毒品的检测方法。采用动态液相微萃取法用氯仿提取毛发消解液中的苯丙胺类毒品,然后在微波加热的条件下用N-甲基-双三氟乙酰胺(MBTFA)进行衍生化处理,将反应液直接用气相色谱/选择离子检测-质谱法（GC/SIM-MS）检测。以2-甲基苯乙胺为内标,在空白毛发中添加标准品做标准曲线得到4种苯丙胺类毒品的线性相关系数均不小于0.996。衍生化后4种毒品在毛发中的最小检测限(S/N=3)均为50 pg/mg。4种苯丙胺类毒品在毛发中的添加浓度为5 ng/mg时,5次测定的相对标准偏差（RSD）分别为苯丙胺6.0%,甲基苯丙胺13.9%,3,4-(亚甲二氧基)苯丙胺10.2%,3,4(亚甲二氧基)-甲基苯丙胺9.2%。应用所建立的方法对苯丙胺类毒品吸食者的毛发进行检测,检出了这4种毒品,毛发样品的最小用量为4.6 mg (约20 cm 长)。该方法灵敏、简便、快速,可用于毛发中低含量苯丙胺类毒品的分析。     

衍生化-分散液液微萃取-气相色谱/质谱法同时测定纺织固体废物中含氯苯酚和邻苯基苯酚

建立了衍生化-分散液液微萃取-气相色谱/质谱(DLLME-GC/MS)方法,并将其用于纺织固体废物中18种含氯苯酚和邻苯基苯酚的分析检测。方法对衍生化体系、乙酸酐用量、衍生化温度和时间、萃取剂种类及用量、分散剂种类及用量进行了筛选和优化。确定最佳条件为:纺织固体废物样品用0.15 mol/L的K_2CO_3溶液超声提取后定容,加入0.12 mL乙酸酐,于温度60℃条件下衍生35 min,取6 mL样品提取液,加入0.7 mL体积比为2∶5的四氯化碳(提取剂)和丙酮(分散剂)的混合溶剂分散萃取后,于8 000 r/min下离心3 min,取下层有机相进行GC/MS分析。18种含氯苯酚和邻苯基苯酚在0.002～0.160 mg/L范围内均呈良好的线性关系,相关系数为0.9991～1.0000,检出限为0.07～0.76μg/kg,定量限为0.28～3.04μg/kg,样品加标回收率在84.2%～105.0%范围,相对标准偏差在0.6%～6.4%之间。该方法简单、灵敏,适用于纺织固体废物中18种含氯苯酚和邻苯基苯酚的分析。     

新型荧光试剂柱前衍生化高效液相色谱荧光检测法测定醇类化合物

采用新型的紫外、荧光衍生试剂咔唑－9－乙基氯甲酸酯，对15种脂肪醇柱前衍生的反应条件，包括反应温度、催化剂的选择、衍生化时间等，进行了考察。结果表明：催化剂选用吡啶，反应温度80℃，时间15min，衍生化具有最大且恒定的检测响应。利用高效液相色谱对衍生产物进行分析，同时对衍生物的分离进行了优化选择，达到了较好的基线分离。检测限为13.3-93.5nmol/L。     

微波消解同时衍生化GC-MS法测定血浆中脂肪酸的研究

研究了利用微波能对样品进行加热, 以Ｈ２ＳＯ４ － 甲苯－ 甲醇体系作衍生化试剂, 在消化的同时对血浆中的脂肪酸进行衍生化, 然后用ＧＣ－ ＭＳ 法测定血浆中脂肪酸。 对微波功率、微波加热时间、消解及衍生化试剂等条件进行了优化, 测定结果较好。该法整个消化及衍生化过程只需２ ｍｉｎ , 与传统方法相比大大缩短了实验操作时间, 特别适用于大量样品的测定。