毛细管电泳：蛋白质,多肽分离分析的一项新技术

电泳和层析一直是研究蛋白质和多肽的重要方法。毛细管电泳除了具备凝胶电泳的高分辨力外,以其快速、定量、重复性好、灵敏度高及自动化程度高等诸多优点在近几年内成为蛋白质、多肽乃至其它生物分子分离分析的一项崭新且重要的技术。     

毛细管电泳检测奶粉中添加的大豆分离蛋白

采用毛细管电泳方法对乳蛋白和大豆分离蛋白进行检测。选择聚丙烯酰胺涂层毛细管,在紫外检测波长214 nm、分离电压25 kV条件下测出五种乳蛋白在不同线性范围内的线性相关系数均大于0.998,各乳蛋白的迁移时间和峰面积的相对标准偏差(RSD)分别小于0.34%和4.50%,奶粉样品加标回收率范围为88.07%~102%;通过对比大豆7S和11S组分、大豆分离蛋白及乳蛋白的电泳图谱,定性确定出大豆分离蛋白8个特征峰,各特征峰的迁移时间和峰面积的RSD分别小于0.36%和4.87%,方法重现性较好。建立了奶粉中添加大豆分离蛋白的半定量检测方法。     

应用毛细管区带电泳分离分析蛋白质及多肽

生命科学研究的迅速发展对生物大分子的分离分析提出了更高的要求,促使人们不断研究和开发新型的高效、快速、选择性好的分离分析方法。传统的电泳技术是目前生物化学及分子生物学实验室中常用的分离分析和制备手段,但它周期长,操作繁     

多肽的反相梯度加压毛细管电色谱分离

以C18为固定相，采用电压和压力联合驱动流动相，研究反相加压毛细管电色谱分离多肽；考察了加压电色谱中，电压对带电和中性物质迁移的影响，实现了梯度加压毛细管电色谱分离6种多肽；结果表明，加压电色谱可以很好地抑制气泡形成，实验结果准确，重复性好；梯度加压毛细管电色谱在复杂样品的分离分析中，具有很大的潜力。     

激光诱导荧光检测微流控芯片毛细管电泳分离多肽的研究

微流控分析系统是分析科学及分析仪器重要的发展前沿,是90年代初发展起来的微分析系统的主要组成部分及目前较为活跃的领域.将微流控分析系统应用于电泳分离,与传统的电泳分离手段相比较而言,具有微型化、可集成化、速度快、进样量小等特点.它的检测方法有多种,其中激光诱导荧光(Laser induced fluorescence,LIF)法因其灵敏度高,成为微流控芯片分析检测目前最广为采用的方法[1].     

大豆分离蛋白的酶水解

大豆分离蛋白的酶水解;大豆分离蛋白;水解作用;光散射     

生物分子的分离与检测

21世纪是生命科学的世纪,生命科学的发展离不开研究手段(主要是分离、分析、测试手段)的创新和发展。而分析方法的发展也推动了生命科学的研究向更高、更深入的层次进展。分析生物化学(ana lyticalbiochemistry)在这种背景下应运而生,它是利用现代的分析、分离手段来获取生物体系中的有关化学信息以及各种相互作用间联系的一门新兴学科。“21世纪生命科学的特点将首先是分析与综合的统一,分析将密切地与功能研究相结合,而综合将越来越多地建立在分析的基础上。”“虽然过去存在对分析工作的生物学意义重视不够的问题,但这一情况正在迅速…     

高效液相色谱分离牛胸腺多肽的研究

本文以不同色谱方法对牛胸腺多肽进行了分离,寻求出能对牛胸腺多肽得到满意分离的色谱条件。     

反相毛细管整体柱的制备及其在多肽混合物分离中的应用

采用甲基丙烯酸月桂酯为基础功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,正十二醇、1,4-丁二醇及二甲基亚砜为致孔剂,在内径为75 μm的石英毛细管内制备了具有良好机械性能及化学稳定性的反相毛细管整体柱。考察了致孔剂的种类、比例以及交联剂在单体混合物中的比例对柱压和分离效果的影响;以单体15%、交联剂15%、致孔剂70%(均为质量分数)作为优化配方,在70 ℃条件下反应24 h;并对所合成的毛细管整体柱进行了电镜表征,测试了流速、柱长与柱压的关系。结果表明,毛细管整体柱的通透性良好,可通过延长柱长的方法提高分离效果。将所制备的毛细管整体柱装于纳升级高效液相色谱仪上进行牛血清白蛋白及血浆样本的胰蛋白酶酶切液的分离,获得了比较理想的分离效果。     

液相色谱法测定大豆分离蛋白中的三聚氰胺

建立了大豆分离蛋白中三聚氰胺的液相色谱方法。大豆分离蛋白经过1%三氯乙酸和饱和乙酸铅溶液提取后,经过阳离子交换固相萃取柱净化处理,用5%氨化甲醇洗脱,洗脱液用高效液相色谱紫外检测器检测,外标法定量。三聚氢胺的质量浓度在0.4~40 mg/L范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,相关系数为0.9990。方法的检出限为0.6 mg/kg,定量限为2 mg/kg。2,4,20 mg/kg 3个浓度水平的加标回收率在78.82%~92.95%范围内。该方法分析成本低,测定结果准确,能满足常规检测及食品安全监控的需要。     

多酶复合水解微波加热制备小分子大豆肽

以水解度和AN为指标,确定了微波加热条件下,三种单酶(碱性蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶)水解大豆蛋白的最佳工艺条件及三种酶复合水解的加酶顺序,将大豆蛋白最大限度的分解为小分子大豆多肽和氨基酸。毛细管电泳实验表明:多酶复合水解优于单酶。     

Structure and properties of partially epoxidized soybean oil

In the present study, the characteric-structure relationship of epoxidized soybean oils (ESO) with various degrees of epoxidation has been investigated. FTIR analysis was used to identify the relative extent of epoxidation of the samples during the epoxidation reaction. The viscosities of ESO were much higher than that of the raw oil, viscosity increased with degree of epoxidation. The viscous-flow activation energy of ESO was determined to be higher than that of the raw oil (20.72 to 77.93% higher). Thermogravimetry analysis (TG) of ESO was used to investigate the thermodynamic behavior of the samples. With increasing degree of epoxidation, the thermal stability of the samples initially decreased, then increased at the final reacting stage. Differential scanning calorimeter (DSC) indicated that the melting point of ESO was higher than that of soybean oil. Gel permeation chromatography (GPC) indicated the molecular mass of the samples increased initially, then decreased, with an increase in the extent of epoxidation.     

Vibrational circular dichroism of polypeptides and proteins

Vibrational circular dichroism spectra of poly-L-tyrosine, poly-L-phenylalanine, myoglobin and-lactoglobulin were measured in solution for the amide I region. These measurements are shown to be consistent with previous determinations of the secondary structures of these species.     

大豆蛋白基茶碱控释片的制备及稳定性研究

以茶碱为模型药物,大豆蛋白和海藻酸钠作为骨架材料,采用混合压片法制备了不同比例的药物片剂。采用紫外比色法测定释放效果,考察了大豆蛋白与海藻酸钠不同比例以及不同pH释放介质和高湿度对茶碱片稳定性的影响。结果表明:大豆蛋白和海藻酸钠作为骨架材料的片剂释药时间都达到了8h以上,在pH6.8PBS中的释药率相对pH1.2盐酸溶液要快,具有良好的定向控释特性。随着湿度的增加,茶碱释放率略有下降,具有较好的湿度稳定性。通过适度调节大豆蛋白和海藻酸钠的比例可实现不同控释效果。实验结果表明大豆蛋白和海藻酸钠共混物是一种良好的天然药物缓控释骨架材料,其释放过程符合一级动力学特征,是药物扩散和骨架溶蚀二者共同作用的结果。     

Thermal rearrangement study of low molecular weight polybutadiene

Various polybutadienes (PBDs) of low molecular weight were heated below complete crosslinking at 250 °C under anaerobic nonpyrolytic conditions, and the structural changes were investigated. The predominant crosslinking reactions arise from the presence of 1,2-vinyl isomer and the most important one is intermolecular reaction accompanied with methyl group formation. The analysis showed that two crosslinking types as well as two types of methyl groups have been produced in which one was the result of 1,2-vinyl isomer of one chain crosslinked via methylene carbon of another chain of cis or trans isomer, and the second methyl group was the product of the reaction between 1,2-vinyl isomers of two PBD chains. Chain scission also occurred in two pathways due to the presence of 1,2-vinyl isomer, scission at two adjacent 1,2-vinyl isomer and scission at adjacent 1,2-vinyl with cis or trans isomer giving rise to methyl carbons.     

皂化P204微乳体系萃取大豆蛋白的研究

研究了NaOH皂化P204/正辛烷微乳体系萃取大豆蛋白的机理和工艺,考察了大豆加入量、P204的浓度、NaOH的浓度、萃取时间、水相pH值及离子强度等对大豆蛋白萃取率的影响。实验结果表明,该微乳体系萃取大豆蛋白的优化工艺条件为:大豆粉与微乳液的质量体积比1∶10,P204在油相中浓度0.8 mol/L,NaOH的浓度1.25 mol/L,萃取时间15 min,外水相pH值5,萃取率可达88.48%。通过调节水相pH和离子强度可实现大豆蛋白的萃取和反萃取。     

一步法和两步法毛细管等电聚焦测定蛋白质和多肽等电点的比较

利用一步法和两步法毛细管等电聚焦(cIEF)方法分离测定了蛋白质和多肽的等电点(pI)。讨论了两步法等电聚焦过程所需的溶液组成、样品进样体积、聚焦电压、聚焦时间和分离条件等因素对分离效果的影响。并对一步法和两步法进行了比较。对细胞色素C、血红蛋白、肌红蛋白、转铁蛋白和牛血清白蛋白以及6种多肽的分析结果表明:一步法步骤简单,分离速度快,可测定单一组分的pI,也能快速分离混合蛋白和多肽,但分离度较差,且不能同时准确测定各组分的pI;两步法步骤复杂,分析时间较长,但能够同时分离并准确测定混合样品中各组分的pI,所测的pI值与单一组分进行测定的结果基本一致。两种方法可相互结合、互为补充,可广泛应用于两性生物微粒等电点的快速和准确测定。     

多壁碳纳米管对PS分子量影响的研究

由于碳纳米管（CNT）具有优异的力学、电学、光学等性能,近年来,聚合物／碳纳米管（polymer／CNT）复合材料的研究已经成为研究者关注的热点。相关的研究主要集中在：一是将CNT作为填充材料制各复合材料,使复合材料的力学、电学等性能得到提高。二是将CNT作为主体,用聚合物对CNT进行修饰,使CNT在有机溶剂中能够获得良好的溶解度。而对于在聚合反应中,CNT的加入对聚合物分子量影响的研究,相关的报道较少。本文利用悬浮聚合法制备了聚苯乙烯／多壁碳纳米管（PS／MWNT）复合材料,采用透射电镜（TEM）和凝胶渗透色谱（GPC）对其进行了分析,详细研究了MWNT对于PS分子量的影响。     

Bioconversion of isoeugenol into vanillin by crude enzyme extracted from soybean

Crude enzyme extracted from soybean was used to convert isoeugenol into vanillin. The effects of several factors on the bioconversion were studied. Conversion was affected by the armount of substrate and was also improved by the addition of absorbents, among which powdered activated carbon was the best. The effect of H₂O₂ concentration on the conversion was also studied. The optimum concentration of H₂O₂ was 1% (v/v). With 10 g/L of powdered activated carbon and 0.1% H₂O₂ added, vanillin reached a maximum concentration of 2.46 g/L after 36 h, corresponding to a molar yield of 13.3%.