中国人群线粒体DNA部分突变位点的测定和意义

本文报道了一种简易的人体线粒体DNA(mtDNA)突变位点测定方法。这一方法以剑桥顺序为标准顺序。在确定不同限制酶的识别位置及其片段大小后,用不同限制酶对不同个体的酶切图谱作比较。在发现长度突变型后,利用已知限制酶识别顺序,确定人mtDNA剑桥顺序上所具有的潜在性突变位点。根据标准的剑桥顺序和被检酶切片段大小以及潜在性突变情况,估计出被检mtDNA发生突变的确切位置或大概位置。应用这一方法,我们对在中国汉族、维吾尔族、哈萨克族和回族人群中发现的六种 mtDNA变异型的突变位点进行了分析。     

交河故城古车师人的线粒体DNA分析

从距今2000～2500年左右的交河故城古代人骨中提取古DNA,用4对重叠引物对线粒体基因组的调控区(363bp)进行了扩增及测序.线粒体基因组编码区的扩增片段用于限制性片段多样性分析.结果显示4个个体中具有3个DNA序列,其中来自不同墓穴的两个个体的序列相同,说明这两者间有密切的母系遗传关系.系统发育分析表明古车师的这4个个体分散分布在现代新疆维吾尔人的序列之中.从这些结果可以初步得出结论,即古车师人群并不是一个同源群体,在早期铁器时代,欧亚人群的混合就已经存在了.     

用分子标记定位一个未知的抗稻瘟病基因

籼稻品种窄叶青8号含未知的稻瘟病抗性基因,在北方稻区的稻瘟病抗性育种上有利用价值。应用来自窄叶青8号和粳稻品种京系17的DH群体建立抗病池和感病池,通过对两池的RAPD分析,发现与稻瘟病抗性共分离的分子标记。进一步用用个独立的分离群体将窄叶青8号的抗性基因和分子标记定位在第8染色体上,该基因称为Pi-zh。     

牛蒡寡糖的分离纯化及结构研究

以菊科植物牛蒡(ArctiumlappaL.)的等外根为材料,经热水浸提、木瓜蛋白酶-Sevag法脱蛋白、乙醇沉淀和SephadexG-50凝胶柱层析分离纯化,得到水溶性的牛蒡寡糖(BOS₂).采用化学分析方法研究了BOS₂的理化性质,并通过TLC,GC-MS,HP-GPC,UV,IR,¹HNMR及¹³CNMR等对BOS₂的纯度、结构和组成进行表征.结果表明,BOS₂由果糖和葡萄糖组成,摩尔比约为12∶1,纯度较高,为均一性组分;由12个呋喃型的果糖以β(2→1)糖苷键相连,1个吡喃型的葡萄糖以α(1→2)糖苷键连接在果糖末端的线性直链结构,是一种菊糖构型的低聚果糖.     

三组分抗原的磁分离及分离效率的SERS研究

利用种子生长法制备了磁性γ-Fe₂O₃@Au核壳纳米粒子, 通过修饰抗体实现表面功能化, 利用抗原抗体间的特异性作用, 通过外加磁场对三组分抗原进行了逐个以及双抗原的磁分离, 采用基于表面增强拉曼光谱(SERS)技术的免疫检测方法对磁分离效率进行了评价, 并且研究了该磁分离和效率评估方法的极限工作浓度. 研究结果表明, 该磁免疫分离法能对三组分混合抗原中的任意组分进行很好的选择性分离, 而不影响其它抗原的存在, 使其分离后溶液中被分离抗原的浓度降低到SERS免疫检测限, 分离所能达到的极限抗体浓度约0.1 pg/mL.     

人的基因组及DNA序列分析──过去、现去及将来（上）

人的基因组研究已成为生命科学前沿领域中最热门的课题之一。ＤＮＡ序列分析是基因组研究的关键技术．本文对人的基因组分析及其对ＤＮＡ序列分析的要求进行了论述．对ＤＮＡ序列分析方法如板凝胶电泳自放射显影法、板凝胶电泳激光荧光法、毛细管电泳激光荧光法、阵列毛细管凝胶电泳激光荧光法。超薄层板在胶电泳激光荧光法作了详细评论．并对正在开发的不用凝胶电泳分离的直接测序新技术和新方法，如质谱法、原子探针法（扫描隧道显微镜、原子力显微镜）、杂交法、流动单分子荧光检测法等进行了评论。     

无孔单分散亲水性强阳离子交换固定相的制备及其在蛋白质快速分离中的应用研究

采用分散聚合法制备小颗粒种子及“一步种子溶胀聚合”法成功地制备了粒径为3.0 μm的无孔单分散亲水性交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯树脂,其表面经水解、环氧化、再水解后与氯磺酸反应,制备了一种新型的强阳离子交换色谱填料（SCX）。详细考察了该填料对标准蛋白质的分离性能及流动相中盐的种类、有机溶剂、流速等对蛋白质保留的影响。实验结果表明,在流速为4 mL/min时,采用线性梯度洗脱,1.0 min内可快速分离4种标准蛋白质,蛋白质的保留符合阳离子交换色谱规律。将SCX应用于快速纯化鸡蛋清中的溶菌酶和猪心中的细胞色素-C,取得了较好的效果。     

苦瓜子蛋白的分离纯化及其性质研究

从苦瓜种子的粗提物苦瓜子蛋白丙酮分级沉淀干粉中,用CM-SephadexC-50和SephadexG-75分离得到了两个核糖体失活蛋白,α-苦瓜子蛋白(α-momorcharin,α-MMC)和β-苦瓜子蛋白(β-momorcharin,β-MMC),其等电点分别为9.10(α-MMC),9.32(β-MMC)。用ESI-MS和MALDI-TOF-MS测定它们的分子量,分别为28625(α-MMC),29076(β-MMC)(+Na,29099);28795(α-MMC),29074.7(β-MMC)。它们都是糖蛋白。其生物活性的分析测定表明,都属于RNAN-糖苷酶。本文重点对β-苦瓜子蛋白的分离纯化及其性质进行详细报道,并对其N-端部分的氨基酸顺序进行了测定。     

新疆药桑叶多糖的分离纯化及结构研究

研究了新疆药桑叶多糖的分离纯化及初步的结构分析。采用DEAE-Cellulose-52及Sephadex G-200分离纯化药桑叶多糖,采用聚酰胺薄层层析及GC法测定药桑叶多糖的组成,凝胶过滤法测定其相对分子质量,红外光谱测定其苷键类型。粗多糖经DEAE-52分离得到6个多糖级分W1、W2、N1、N2、N3和N4,其中的4个级分W1、N1、N2和N4经Sephadex G-200纯化后,各个级分的洗脱峰均为单一对称峰。聚酰胺薄层法及GC法确定药桑叶多糖由葡萄糖、半乳糖、甘露糖、鼠李糖、阿拉伯糖及木糖等单糖组成。测得W1、N1、N2和N4的分子量分别为71 331Da,60 049Da,35 825Da和21 374Da。红外光谱中有典型的多糖吸收峰及α-型糖苷键。     

无孔单分散亲水性中强阳离子交换树脂的制备及其在蛋白质快速分离中的应用研究

以3.0μm无孔单分散亲水性交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯树脂为基质,将其表面经新的化学方法改性后制备了一种新型的无孔中强阳离子交换色谱填料。详细考察了该无孔填料对标准蛋白分离性能,有机溶剂、pH、流动相盐种类和流速等对蛋白质保留的影响。实验结果表明,在流速为4 mL/min时,线性梯度时间在2.0 min内可快速分离4种标准蛋白,蛋白质的保留符合阳离子交换色谱规律。将其应用于快速纯化鸡蛋清中的溶菌酶,取得较好效果。     

单分散树脂基质的弱阳离子交换色谱固定相的制备及其在生物大分子分离中的应用研究

采用分散聚合法制备种子和“一步种子溶胀聚合法”制备了粒径为6~15 μm的单分散多孔氯甲基苯乙烯-二乙烯苯微球。该微球经化学改性后得到一种亲水性良好的新型高效弱阳离子交换色谱固定相。详细考察了该固定相的表面亲水性、对标准蛋白的分离性能和盐的种类对蛋白质保留行为的影响。考察结果表明该固定相是一种性能优异的弱阳离子交换色谱固定相。将其应用于鸡蛋清中溶菌酶的快速分离纯化,纯化后的溶菌酶纯度高于96%,比活高达71184 U/mg。     

基于质谱技术的磷酸化蛋白/多肽分离富集、鉴定及组学研究

正蛋白质的磷酸化是生物体内一种广泛的、重要的翻译后修饰形式,调控着细胞信号传导、基因表达、分子识别、新陈代谢等细胞过程。在生物体液或组织中,许多低丰度的磷酸化蛋白/多肽是具有高度特异性的生物临床标志物,这些生物分子可能为许多疾病的诊断和病理研究提供重要信息,因此对其进行分析具有重要意义。近些年该研究热点备受广大分析工作者的青睐[1,2]。本文基于2016年1～2月主流期刊最新录用和在线发表的基于质谱技术的     

光谱法及分子对接研究邻苯二甲酸单乙基己基酯与人血清白蛋白的相互作用

通过荧光光谱法、紫外分光光度法以及分子对接技术探究邻苯二甲酸单乙基己基酯(MEHP)与人血清白蛋白(HSA)之间的相互作用及其作用机制。光谱学数据显示,MEHP诱导HSA内源荧光猝灭是因为两者间发生非辐射能量转移并形成稳定的复合物;不同温度下的热力学常数表明范德华力或氢键为MEHP与HSA结合的主要驱动力;三维荧光光谱结果证实MEHP改变了HSA的构象;同步荧光光谱和位点实验表明,MEHP在位点Ⅰ与HSA结合。根据光谱学的研究结果,采用分子对接技术模拟MEHP与HSA在分子水平上的相互作用机制,结果与光谱学研究结果一致。     

烟草中两种紫罗兰醇葡萄糖苷衍生物的分离鉴定及热分析研究

采用传统柱层析技术和高效液相色谱相结合的方法从烤烟中分离出3-氧代-α-紫罗兰醇-β-D-吡喃葡萄糖苷和7,8-二氢-3-氧代-α-紫罗兰醇-β-D-吡喃葡萄糖苷,利用ESI MS、1H NMR、13C NMR进行结构鉴定。为开发热稳定型香原料,在300、600、900℃及氦气环境中对2种糖苷进行了在线热裂解(Py)研究和释香机理讨论,研究表明主要裂解物为烟草重要香味物巨豆三烯酮及其同分异构体和3-氧代-α-紫罗兰醇。首次对3-氧代-α-紫罗兰醇-β-D-吡喃葡萄糖苷进行了热重-红外-气相色谱-质谱联用分析,在265℃时,目标物巨豆三烯酮及其同分异构体快速脱落。该技术不仅方便快速,还能实时地对裂解产物进行鉴定,为天然产物的裂解产物在线分离和鉴定提供了依据。     

萃淋树脂CL—P507吸附分离钨,钼的研究：Ⅰ.树脂的吸附及分离性能

本文考察了萃淋树脂CL-P507对钨、钼的吸附性能,测定了树脂的饱和吸附容量,得出了在H_2SO_4-EDTA体系中从含大量钨的溶液中分离钼的条件。     

用超临界气体抽提方法研究抚顺烟煤的组成和结构——Ⅰ.抽出物的分离及GC、GC/MS分析

将抚顺烟煤用甲苯作溶剂,在半连续抽提装置上,于350℃、20MPa条件下,进行超临界气体抽提。抽出物先分离成油、沥青烯及前沥青烯三个族组份,再用离子交换树脂、硅胶柱色谱作进一步分离。GC和GC/MS的分析结果表明,油段分中存在正构烷烃(C_(13)—C_(31))、类异戊二烯化合物及长链烷基苯系列,这些化合物可提供抚顺烟煤的地球化学信息。     

三七中2-(1＇,2＇,3＇,4二四羟基丁基)-6-(2",3",4"-三羟基丁基)-吡嗪的分离、鉴定及药理活性研究

从三七水溶性成分中首次分离得到一个多羟基吡嗪衍生物.该化合物经MS,NMR,1H-1HCOSY,13C-1H COSY和HMBC等鉴定其结构为2-(1＇,2＇,3＇,4-四羟基丁基)-6-(2",3",4"-三羟基丁基)-吡嗪.对该分离样品进行了合成对照和药理活性研究.     

三七中2-(1'''',2'''',3'''',4''''-四羟基丁基)-6-(2",3",4"-三羟基丁基)-吡嗪的分离、鉴定及药理活性研究

从三七水溶性成分中首次分离得到一个多羟基吡嗪衍生物 .该化合物经 MS,NMR,1 H-1 H COSY,1 3 C-1 H COSY和 HMBC等鉴定其结构为 2 -( 1 ,2 ,3 ,4 -四羟基丁基 ) -6 -( 2 ",3",4 "-三羟基丁基 ) -吡嗪 .对该分离样品进行了合成对照和药理活性研究