粗糙脉孢霉arg—13 cDNA能互补酿酒酵母arg11突变侏

以粗糙脉孢霉Neurospora crassa arg-13基因作为探针筛选λgt10 cDNA文库,获得全长arg-13cDNA并能表型拯救arg-13突变株,进行了arg-13cDNA测序,为了进一步证实arg-13的功能,构建了GALI诱导表达的arg-13cDNA的载体,该载体能表型互补酿酒酵母Saccharomyces cervisiae arg11突变株,证实arg-13编码线粒体内膜鸟铵酸转运酶 ,并表明酶母线粒体膜易位蛋白复合物能定位粗糙脉孢霉线粒体内膜蛋白质。     

嗜热侧孢霉2441纤维素酶产酶条件优化及突变株选育

为了提高嗜热侧孢霉2441纤维素酶的产量,对产酶条件进行了优化,测定了酶的特性,对选育抗葡萄糖效应突变株和中温型突变株进行了探索.实验中酶活力测定以微晶纤维素、CMC-Na和水杨苷为底物,DNS法测定还原糖;产酶条件优化采用正交试验设计,以微晶纤维素酶活为指标;通过NTG诱变和UV诱变选育抗葡萄糖效应突变株和中温型突变株.结果表明:产酶条件优化后,嗜热侧孢霉2441的纤维素酶活极显著提高(P0.01);2441的微晶纤维素酶、CMC-Na酶和β-葡萄糖苷酶的最适作用温度分别为60℃、65℃、70℃,最适作用pH值均为5.5,温度高于70℃及碱性条件下,酶活力显著下降;选育的抗葡萄糖效应突变株N20-01,微晶纤维素酶活提高13.203%,CMC-Na酶活提高47.176%,β-葡萄糖苷酶活提高119.517%;选育的中温型突变株U40-03,在32℃培养时与2441在45℃培养时相比,微晶纤维素酶活提高11.411%,CMC-Na酶活提高29.484%,β-葡萄糖苷酶活提高54.759%.     

粗糙脉孢菌及其在发酵工业中的应用研究

粗糙脉孢菌（Neurospora crassa）是一种多细胞丝状真菌,也是一种重要的真核模式生物,它在现代遗传学、生物化学和分子生物学研究领域具有重要的地位。本文介绍了粗糙脉孢菌的生理特性及其分子生物学研究概况,重点阐述了粗糙脉孢菌在发酵工业生产应用中的研究进展。     

粗糙脉孢菌产黑色素条件优化及黑色素物理特性研究

优化了粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)AS3．1602生产黑色素的条件，结果表明，在葡萄糖0．5g/L,(NH4)2SO4 8g/L,NaCl3 g/L,CaCl2 0.1g/L、酪氨酸取饱和浓度时，有相对高的产量．对所产黑色素进行了分离纯化，并研究了其理化性质．     

产纤维素酶粗糙脉孢菌1602产酶条件优化

通过优化设计，确定纤维素高产菌株Neurospora crassa 1602摇瓶发酵最佳产酶条件为：培养液初始pH值为5、5，培养温度为28℃，摇瓶转速为150rpm，培养96h；3％玉米芯粉、0．5％麸皮酸水解液(0．6mol/L)能够促进产酶，最适宜的有机氮源为黄豆粉；最适宜的无机氮源为NH4HSO4．在最适发酵条件下，其纤维酶的活力CMCase为10．34IU／ml．FPase为0．71IU／ml．     

高产纤溶酶的脉孢霉诱变育种研究

本文利用紫外线-氯化锂复合诱变脉孢霉,选用制霉素抗性作筛选标记,抗性突变率为2.308×10~(-6),采用固态发酵法筛选纤溶酶高产突变株,正突变率为2.307×10~(-7)。获得较出发株产酶活性提高95.1％,82.71％和424.30％的三个正突变株。产酶稳定性考察表明,一突变株的产酶量较出发株提高70％以上,且稳定性好。     

脉孢霉纤溶酶的酶学性质研究

研究了脉孢霉纤溶酶的部分酶学性质,确定该酶由双亚基组成,亚基分子量分别为30000Da、15500Da,等电点为7.9±0.2,最适作用pH值为7.4,最适作用温度为50℃,在pH6.6～9和32～42℃时较稳定。     

粗糙脉孢菌驱动蛋白-1在菌丝极性生长中的功能

为了研究驱动蛋白-1的基因(Kin-1)在菌丝极性生长中的功能,本文以粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)菌株为材料,利用同源重组技术尝试获得其敲除突变菌株Kin-1KO,并分析菌株87-3、Ku70RIP和Kin-1KO的菌丝生长情况.结果表明,与菌株87-3和Ku70RIP相比,菌株Kin-1KO的菌落...     

热休克对粗糙脉孢菌核酸内外切酶的影响

将快速生长的粗糙脉孢菌Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａｃｒａｓｓａ培养液从３０℃升温至４５℃，热休克处理２小时，７５％有活性的核酸内外切酶ｅｎｄｏ－ｅｘｏｎｕｌｅａｓｅ（此酶为ＤＮＡ修复酶）从核及液泡中释放到胞质并以无活性的形式储存起来：用放线菌酮处理，不能阻止此酶的释放，但能使灭活降低；致使胞质的酶活性提高５－１５倍。热休克菌体核酸内外切酶的灭活是由于某种抑制物质的作用，后者来自酶前体的自身降解。作者推测由热休克诱导了一种蛋白酶，此酶使核酸内外切酶前体水解为抑制物质。     

用限制酶消化法检测脉孢菌中ung-1基因的突变效应

用限制酶消化法检测脉孢菌中ung-1基因的突变效应.以粗糙脉孢菌Ku70为参照,通过NaNO2胁迫处理,经DNA提取,限制酶消化,检测ung-1基因的缺失效应.实验结果表明,ung-1突变体和Ku70的限制酶图谱存在差异,说明ung-1的缺失增加了DNA随机突变率;NaNO2的胁迫加剧了这一效应.     

粗糙脉孢菌中几丁质合酶1缺失突变体的构建及表型分析

在丝状真菌中,几丁质是真菌细胞壁的主要成分之一,对维持细胞形态和结构起到了重要的作用.几丁质是由几丁质合酶(chitin synthase,CHS)催化合成的,几丁质合酶参与生物钟调节的生理活动.本文以丝状真菌粗糙脉孢菌几丁质合酶1(CHS-1)为研究对象,通过同源重组基因敲除技术、电转化、分生孢子过膜以及PCR鉴定的方法,获得了chs-1缺失突变菌株CHS-1KO.通过竞争性生长管(racetube)培养分析发现:对照Ku70RIP和突变菌株CHS-1KO(Ku70RIP背景)均具有明显的分生孢子带,但分生孢子带昼夜节律周期缩短,直线生长速率显著减慢,ku70RIP菌丝生长长度是3.4±0.31 cm/24 h,而突变菌株CHS-1KO(Ku70RIP背景)菌丝生长长度是2.07±0.19 cm/24 h.并进一步结合细胞壁染色对细胞形态分析发现:变菌株CHS-1KO菌丝沿生长方向膨胀、分支变短.这些结果表明:几丁质合酶1在粗糙脉孢菌分生孢子带昼夜节律形成和菌丝生长中发挥重要的作用.     

产纤维素酶粗糙脉孢菌1602产酶条件优化

通过优化设计,确定纤维素高产菌株Neurosporacrassa1602摇瓶发酵最佳产酶条件为:培养液初始pH值为5.5,培养温度为28℃,摇瓶转速为150rpm,培养96h;300玉米芯粉、0.500麸皮酸水解液(0.6mol/L)能够促进产酶,最适宜的有机氮源为黄豆粉;最适宜的无机氮源为NH4HSO4.在最适发酵条件下,其纤维酶的活力CMCase为10.34IU/ml,FPase为0.71IU/ml.     

脉孢菌纤溶酶的纯化和性质初步研究

应用超滤、盐析、凝胶过滤和疏水相互作用层析对脉孢菌产纤溶酶初步纯化后,活性电泳证实获得单一的纤溶活性组分。对该纤溶组分的基本酶学性质作了进一步的研究,结果表明该纤溶酶的最适作用温度和最适pH分别是46℃和7.8,在40℃以下和pH6.2~7.8时稳定,该纤溶酶具有直接和间接的纤溶活性。     

SpltNPVp49基因的克隆和序列分析

根据新发现的杆状病毒凋亡抑制基因ｐ４９基因的序列设计了一对引物,以ＳｐｌｔＮＰＶ基因组ＤＮＡ为模板,通过ＰＣＲ扩增获得了预期大小的约１．３ｋｂ的ＤＮＡ片段,将此片段克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ载体上并直接测序。序列分析表明,该片段为ＳｐｌｔＮＰＶ完整的ｐ４９基因开放读码框。与已知的杆状病毒ｐ４９基因的序列同源性为８７％,与之对应的氨基酸序列的同源性高达９３％。它是首次从ＳｐｌｔＮＰＶ中克隆到的抑制细胞凋亡的     

1997的粤东海域棕囊藻赤潮原因种18SrDNA基因分析

近年来,随着沿海城市工农业的高速发展,大量含有氮、磷等营养元素的污水排入大海,导致海水富营养化的加剧,有毒藻类赤潮分布范围及出现频率明显增加.1997年7～12月我国东南沿海水面首次发生大规模的棕囊藻类(Ｐｈａｅｏｃｙｓｔｉｓ)有毒赤潮,其持续时间长,危害大,给水产...     

香菇深层发酵液和香菇子实体营养成分比较

对香菇发酵液和香菇子实体营养成分蛋白质、多糖、氨基酸及矿物质的含量进行了测定和比较，结果表明，香菇发酵液含有与香菇子实体相同的营养成分，而且含量均高于香菇子实体，尤其是钙、镁、多糖、异亮氨酸、亮氨酸的含量很高。