PICK1蛋白中BAR结构域的功能受其下游C末端酸性区域的调节

0 引言 人们普遍认为学习和记忆包含了突触效能的长时程变化,这种效能变化体现在长时程增强(LTP)和长时程抑制(LTD)两种现象[1].     

牡蛎提取物对篮球运动员免疫功能的影响

为探讨牡蛎提取物对运动员运动时机体免疫机能的作用,本实验观察了篮球运动员在2周大运动量训练期间服用牡蛎提取物对机体免疫功能的影响．结果表明,服用牡蛎提取物可使血液白细胞介素-2（IL-2）和补体C3的浓度（P〈0．05）显著升高、可溶性白细胞介素-2受体（S-IL-2R）水平下降（P〈0．05）、能维持运动员免疫系统机能的相对稳定．对大运动量训练期间运动员的免疫机能产生良好影响．     

蒲公英提取物与牛血清白蛋白相互作用研究

利用荧光光谱研究了蒲公英提取物与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用,探讨了不同浓度的蒲公英提取物和溶剂种类这两个因素对荧光强度的影响.结果表明:蒲公英花或叶的甲醇提取物使BSA的荧光强度增强,且其最大荧光发射波长无明显红移;蒲公英花或叶的乙醇提取物使BSA的荧光产生猝灭,且其最大荧光发射波长明显红移;甲醇溶剂对荧光强度有比较大的影响,而乙醇则无明显影响.随着提取液浓度增加,蒲公英甲醇提取物与BSA相互作用的△F呈线性增加趋势,蒲公英乙醇提取物与BSA相互作用的△F呈下降趋势.     

PKCθ-EGFP融合蛋白在HeLa细胞中的表达及其对细胞形态的影响

目的:分析增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与蛋白激酶C-θ(PKCθ)的融合蛋白(PKCθ-EGFP)在HeLa细胞中的表达、亚细胞定位及其对细胞形态的影响。方法:用脂质转染胺(Lipofec-tAMINE 2000)为载体分别以pPKCθ-EGFP和pEGFP-N1转染HeLa细胞,流式细胞仪分析其表达率,激光共聚焦显微镜分析其亚细胞定位,同时分析二丁酸佛波醇酯(PDB)和小檗碱对其亚细胞定位和细胞形态的影响。结果:转染pEGFP-N1或pPKCθ-EGFP的HeLa细胞48 h后,表达绿色荧光的细胞百分率分别为(70.9±4.4)%和(45.8±2.3)%(P<0.05)。表达的PKCθ-EGFP融合蛋白均匀分布于细胞内,与EGFP蛋白在细胞内的分布相似。PDB刺激30 min后,表达PKCθ-EGFP的HeLa细胞的形态发生显著变化,即由原来的梭形变成圆形,荧光强度增强。但表达EGFP的HeLa细胞的形态及荧光分布均不受影响。小檗碱对PDB诱导的HeLa细胞的形态和EGFP-PKCθ融合蛋白的分布无明显影响。结论:表达PKCθ-EGFP融合蛋白的HeLa细胞在PDB作用下细胞形态发生显著变化。     

茶渣蛋白提取物对吉富罗非鱼生长性能和生化指标的影响

为评价茶渣蛋白提取物(tea residue protein extract, TRPE)作为新型植物源蛋白在水产饲料中的可应用性,以TRPE替代基础饲料中的鱼粉或豆粕,分析其对吉富罗非鱼的生长性能、代谢状态和非特异性免疫的影响.研究结果表明：当TRPE替代的鱼粉质量分数为15%时,吉富罗非鱼可正常生长;当TRPE替代的鱼粉质量分数超过30%时,吉富罗非鱼的生长性能下降20%以上,转氨酶活力升高10%以上,溶菌酶活力提升约2倍;当TRPE替代的豆粕质量分数为50%时,吉富罗非鱼生长性能和生化指标均无明显变化,但其溶菌酶活力提升约1.5倍. TRPE可提升鱼体的非特异性免疫能力,但过量取代鱼粉会导致基础饲料中必需氨基酸水平下降,对鱼体生长不利;TRPE可取代基础饲料中50%的豆粕,且能保证鱼体在正常生长代谢下免疫能力增强.     

Glu101对保持中心蛋白正常构象作用的研究——光谱法研究稀土离子与八肋游仆虫中心蛋白作用对蛋白构象的影响

通过位点直接突变法将八肋游仆虫中心蛋白101位保守的Glu突变成Lys,得到突变蛋白E101K.利用疏水性探针TN S研究了突变对Tb^3＋与蛋白作用时蛋白构象变化的影响.结果表明,相对于钙饱和的蛋白,铽的饱和对蛋白构象变化的影响更大.同时,共振光散射研究表明,Glu101对保持蛋白适当的构象变化行为起着至关重要的作用.     

滑桃树种子提取物对其内生菌蛋白表达的影响

Streptomyces sp.WXC菌株是从滑桃树(Trewia nudiflora L.)种子中分离到的一株内生菌,滑桃树种子提取物对Streptomyces sp.WXC菌株的生长有促进作用.运用蛋白质组学方法,研究Streptomyces sp.WXC菌株在加入滑桃树种子提取物和不加入滑桃树种子提取物的两种条件下,其蛋白表达的差异,结果发现44个差异蛋白.经数据库比对分析,表明这些蛋白主要与菌株的运输、氧化还原、水解和生物合成有关.该结果为进一步研究植物与其内生菌的相互作用奠定基础.     

Periaxin蛋白中PDZ结构域的重组表达与纯化

Periaxin属于有髓施旺细胞非致密髓鞘中的重要蛋白之一,该蛋白的突变,会引起腓骨肌萎缩症4F亚型发生.文章以小鼠periaxin基因为模板,PCR扩增编码Periaxin-PDZ及其延长型的基因序列,插入pETM-3C表达载体中.转入E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达重组蛋白.再经Ni2+-NTA亲和柱及Sephacryl S-200凝胶层析获得电泳纯的Periaxin-PDZ蛋白.荧光光谱法分析Periaxin-PDZ和脂膜的结合能力,结果显示Periaxin-PDZ(18-102aa)与脂质体的解离常数为Kd=4.415 μg/mL,延长型Periaxin-PDZ(18-129aa)与脂质体的解离常数为Kd=7.265 μg/mL,Periaxin-PDZ(18-102aa)与脂膜的结合能力略高于延长型Periaxin-PDZ(18-129aa).     

鼠妇富含蛋白多肽提取物的镇痛作用研究

采用蛋白酶法与酸碱法提取鼠妇蛋白多肽成分,利用化学刺激和热刺激法观察提取物对小鼠的镇痛作用,同时测定小鼠脑组织中的去甲肾上腺素(NE),多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)水平.以蛋白多肽中氨基酸种类,尤其是兴奋性氨基酸天门冬氨酸和谷氨酸,抑制性氨基酸甘氨酸和γ-氨基丁酸的质量分数为指标,醋酸扭体次数抑制率和热板实验痛阈值为镇痛活性指标,对两种提取方法进行比较并且初步研究镇痛作用机理,结果表明酸碱法制备的富含蛋白多肽的鼠妇提取物镇痛效果优于酶法,该提取物能明显提高小鼠醋酸扭体次数抑制率与热板实验痛阈值,且能明显提高小鼠脑内NE,DA和5-HT质量分数水平.酸碱法提取蛋白多肽对小鼠具有明显的镇痛作用,其镇痛作用可能与脑内的单胺递质类5-HT有关.     

TD1修饰绿色荧光蛋白透皮功能的研究

TD1作为一种含有11个氨基酸的短肽,具有良好的促进蛋白类大分子透皮的功能.过去的研究显示TD1可以有效协助胰岛素通过皮肤进入循环并最终降低血糖.在本研究中我们构建了一种TD1 N端修饰的GFP融合蛋白(TGFP). 我们的实验表明, 与TD1与GFP蛋白的混合物相比, TGFP具有更加良好的透皮功能.这一发现为透皮给药研究提供了一条新的途径,并对解释TD1透皮功能具有指导意义.     

射干提取物对小鼠免疫功能的影响

摘要：目的研究射干提取物对小鼠免疫功能的影响。方法以环磷酰胺制备小鼠免疫低下模型,测定腹腔注射 印度墨汁后小鼠网状内皮细胞(RES,单核巨噬细胞)炭粒廓清指数,观察其对小鼠非特异性免疫功能的影响;通过 测定正常小鼠血清溶血素水平观察射干提取物对小鼠体液免疫的影响。结果射干提取物可增强小鼠网状内皮 细胞的吞噬功能;促进抗体溶血素的产生。结论射干提取物对非特异性免疫功能和特异性免疫功能都有增强的 作用。     

蛋白激酶C活性下降对Ha-ras基因表达及其调控序列结合蛋白的影响

愈益增多的研究表明,蛋白激酶C(PKC)在细胞增殖和转化调控中占有重要位置,一些癌基因产物影响细胞增殖和转化与肌醇脂代谢信号通路,特别是与PKC活性密切有关;ras癌基因就是其中之一。在ras抗性细胞株内只有当PKC活性超过某一阈值时,ras基因产物才能表现出其转化细胞的能力,并且这种转化能力需要PKC的激活;Hsiao等发现稳定表达PKC的细胞系更易被活化的Ha-ras基因转化。上述实验表明PKC和ras癌基因在转化细胞的过程中表现出最佳的协同效应。但ras基因和PKC之间精确的作用机制至     

人工冬虫夏草多糖提取物对小鼠免疫功能的影响

 为研究人工冬虫夏草多糖提取物对小鼠免疫功能的影响,采用小鼠的体质量法,脾脏、胸腺质量法,迟发型变态反应试验法,及单核巨噬细胞吞噬功能试验法研究了多糖提取物对小鼠免疫影响。实验结果表明：人工虫草多糖提取物可以增加小鼠胸腺质量;改善DNFB诱发的小鼠迟发型变态反应;也能明显提高单核巨噬细胞的吞噬能力,但对小鼠体质量没有影响。因此人工冬虫夏草多糖具有增强小鼠免疫功能的作用。     

Cu2+对香豆素与BSA相互作用的影响

采用荧光光谱法研究了Cu^2＋对香豆素类中药有效成分的母核化合物香豆素与牛血清白蛋白（BSA）相互作用的影响．实验结果表明，有Cu^2＋存在时，香豆素对BSA内源荧光的猝灭过程是以静态猝灭为主，香豆素与BSA结合过程的表观结合常数KA数值为lO^4量级，结合位点数n的范围为2．9～3．4，香豆素-BSA的分子间相互作用力类型仍是以疏水作用为主，熵增加是该作用过程的主要热力学驱动因素；与不合Cu＾２＋的相比，香豆素对BSA内源荧光的静态猝灭常数KP、表观结合常数KA都明显增大，但结合位点数和分子间作用力类型没有明显改变，表明Cu＾2＋可能参与了香豆素与BSA的结合过程．     

菟丝子提取物对PC12细胞中GAP-43表达影响

以常用的PC12细胞株为实验模型,分析了菟丝子提取物作用后PC12细胞突触延伸情况;同时结合免疫细胞化学和Western blot方法考察了其对神经细胞突触可塑性信号分子GAP-43表达的影响．研究结果表明,以黄酮甙为主要成分的菟丝子提取物不仅能诱导PC12细胞分化、突触延伸,而且还能促进GAP-43的表达．     

绿色荧光蛋白α2b-干扰素融合蛋白的表达与活性研究

采用基因重组技术,构建原核表达质粒pET 32a( )/GFP-α2b-IFN,转化大肠杆菌BL 21,以IPTG诱导融合蛋白的表达并用镍金属螯合层析柱进行纯化.SDS-PAGE及免疫印迹结果显示,46.0 kD的融合蛋白在大肠杆菌中得到了正确的表达,并具有α2b-IFN的抗原活性.受体结合实验表明,该融合蛋白能够与W ISH细胞上的干扰素受体特异性结合,并在激发光下呈亮绿色荧光.采用细胞病变法测定分离纯化的融合蛋白的抗病毒活性,比活力为1.0×107IU/m g.表达的GFP-α2b-IFN融合蛋白具有α2b-IFN的特性与荧光活性,为研究α2b-IFN受体功能以及IFN与细胞相互作用的机理奠定了基础.     

大鼠主动脉球囊内皮剥脱对血小板活化功能的影响

目的：观察大鼠主动脉球囊内皮剥脱对血小板活化的影响。方法：在大鼠主动脉球囊内皮剥脱模型上，分别于术后7、14和21天观察球囊内皮剥脱对血小板活化的影响。结果：大鼠球囊内皮剥脱术后，于7、14、21天时，血小板聚集明显增强，蛋白激酶（PKC）活性明显增高，环磷酸腺苷（cAMP）活性明显降低，均以7天组最为明显。结论：临床PTCA后较长时间应用抗栓剂是必要的。     

唾液腺提取物对小鼠免疫功能及SOD活性的影响

以400mg/kg剂量的唾液腺提取物饲喂小鼠45d,研究唾液腺提取物对小鼠免疫调节作用及SOD活性的影响,结果表明：唾液腺提取物能显著提高小鼠细胞免疫功能和巨噬细胞吞噬功能,并能显著提高红细胞SOD活性和降低血清LPO含量。     

增强型绿色荧光蛋白表达对鼠C6细胞生物学特征影响的研究

脂质体包裹质粒pEGFP-N1转染C6细胞,经G418筛选,得到稳定表达绿色荧光的C6-EGFP细胞.细胞计数,MTT,流式细胞术分别测定C6细胞在转染绿色荧光蛋白后增殖性,细胞活力以及细胞周期等生物学特性.C6细胞在转染了绿色荧光蛋白基因后细胞增殖性降低,细胞活力降低,细胞周期也发生了一些改变.     

发菜中红色蛋白的研究

研究发菜中一种红色蛋白(Rx)的分离纯化及其光谱学性质.采用超声法破碎发菜细胞,盐析法初步纯化藻胆蛋白,利用DEAE-DE52交换介质得到藻胆蛋白纯品;测定室温和低温(液氮)下的荧光激发光谱和发射光谱.Rx的吸收峰在520 nm,室温与低温下的荧光发射峰分别在625和630 nm,室温与低温下的荧光激发峰分别在615和610 nm,室温下,Rx在藻胆体中的荧光上升时间和荧光寿命分别为495和2 200 ps.结果表明,Rx既可以把它吸收的光能传递给藻蓝蛋白(PC),再经由PC传递给别藻蓝蛋白(APC),又可以直接将能量传递给APC.