固相萃取-高效液相色谱法测定动物组织中的莱克多巴胺

1引言莱克多巴胺是一种新型的苯乙醇胺类β2-兴奋剂。虽然少数国家允许莱克多巴胺作为猪饲料添加剂,但欧盟已经禁止在可食性动物饲养过程中使用莱克多巴胺。我国将其列入禁用药品目录。但在畜牧业养殖过程中违法使用莱克多巴胺的现象仍然存在。目前,莱克多巴胺的检测方法在国内还未见文献报道。2实验部分2.1仪器与试剂2695高效液相色谱仪,配W-474荧光检测器(美国W aters公司);2k15冷冻离心机(德国S igm a公司),BüCH I B-490旋转蒸发仪(瑞士BüCH I公司);固相萃取柱包括聚苯乙烯柱(SLA)、硅藻土和硅胶柱(SLH)、SCX柱、C18柱、硅胶…     

分子印迹固相萃取-高效液相色谱法测定饲料中莱克多巴胺

以莱克多巴胺为模板分子,丙烯酰胺为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,合成了对莱克多巴胺具有高选择性的分子印迹聚合物。考察了甲醇、乙腈、丙酮和氯仿-甲醇与三乙胺构成致孔剂合成的聚合物性能及其形貌特征。通过正交试验优化的聚合反应配方为: 1.0 mmol莱克多巴胺,4.0 mmol丙烯酰胺,20.0 mmol乙二醇二甲基丙烯酸酯,6.0 mL乙腈-三乙胺(30:1, v/v), 50.0 mg偶氮二异丁腈。建立的基于分子印迹固相萃取-高效液相色谱测定饲料试样中莱克多巴胺的方法,在0.50～100 mg/L质量浓度范围内有良好的线性关系(r=0.9994);饲料试样中1.0、10及100 mg/kg 3个添加水平的莱克多巴胺平均回收率大于80%;批内、批间测定的相对标准偏差小于10%;检出限(信噪比为3)达到0.1 mg/kg。该方法灵敏、可靠,用于饲料等复杂基质中莱克多巴胺检测的效果优于相关标准分析方法。     

气相色谱-质谱法测定肝脏组织中盐酸克伦特罗和盐酸莱克多巴胺

建立了同时测定动物肝组织中盐酸克伦特罗和盐酸莱克多巴胺残留量的固相萃取-气相色谱-质谱分析方法。动物肝组织样品在碱化的条件下用乙酸乙酯和异丙醇混合溶剂提取,提取液浓缩后用乙酸乙酯溶解,然后再用稀盐酸反萃取去除脂肪,调pH值后经SCX固相萃取(SPE)柱净化,洗脱液经氮气吹干后经双三甲基硅基三氟乙酰氨(BSTFA)衍生,采用选择离子模式(盐酸克伦特罗:86、212、262、277,盐酸莱克多巴胺:163、192、234、250)进行测定,外标法定量。盐酸克伦特罗和盐酸莱克多巴胺的检出限分别为0.30和1.00μg/kg。盐酸克伦特罗添加浓度在1.0~5.0μg/kg范围内,添加回收率为77.4%~88.3%;相对标准偏差(RSD)为3.1%~5.1%;盐酸莱克多巴胺添加浓度在4.0~20.0μg/kg,添加回收率为69.8%~82.1%;相对标准偏差(RSD)为3.5%~4.9%;衍生物的峰面积与被测物浓度分别在0.003~1.00 mg/L和0.012~4.00 mg/L范围内呈良好的线性关系,线性回归系数均大于0.999。     

固相萃取-高效液相色谱法测定动物尿样中的莱克多巴胺

莱克多巴胺（ractopamine）是一种新型的β-肾上腺素兴奋剂,我国农业部、卫生部、国家药品监督管理局在2002年联合下发的176号公告中已经明确将其列入禁用药品名单。目前,文献报道的莱克多巴胺的检测方法很少,特别是国内还未见文献报道。由于莱克多巴胺在动物体内代谢较快,因而药物往往以原形的形式从体内排出。检测动物尿样具有快速、准确等特点,建立动物尿样中的莱克多巴胺的检测方法可以对畜产品生产过程中使用莱克多巴胺的现象进行有效的监控。因此,探索动物尿样中莱克多巴胺的检测方法具有非常重要的理论意义和实际价值。本文建立了动物尿样中莱克多巴胺残留量的高效液相色谱（HPLC）测定方法,样品处理简单,灵敏度高。     

气相色谱-质谱法测定肝脏组织中盐酸克伦特罗和盐酸菜克多巴胺

建立了同时测定动物肝组织中盐酸克伦特罗和盐酸莱克多巴胺残留量的固相萃取-气相色谱-质谱分析方法。动物肝组织样品在碱化的条件下用乙酸乙酯和异丙醇混合溶剂提取，提取液浓缩后用乙酸乙酯溶解，然后再用稀盐酸反萃取去除脂肪，调pH值后经SCX固相萃取（SPE）柱净化，洗脱液经氮气吹干后经双三甲基硅基三氟乙酰氨（BSTFA）衍生，采用选择离子模式（盐酸克伦特罗：86、212、262、277，盐酸莱克多巴胺：163、192、234、250）进行测定，外标法定量。盐酸克伦特罗和盐酸莱克多巴胺的检出限分别为0．30和1．00μg／kg。盐酸克伦特罗添加浓度在1．0～5．0μg／kg范围内，添加回收率为77．4％～88．3％；相对标准偏差（RSD）为3．1％～5．1％；盐酸莱克多巴胺添加浓度在4．0～20．0μg／kg，添加回收率为69．8％～82．1％；相对标准偏差（RSD）为3．5％～4．9％；衍生物的峰面积与被测物浓度分别在0．003～1．00mg／L和0．012～4．00mg／L范围内呈良好的线性关系，线性回归系数均大于0．999。     

固相萃取-气相色谱法测定动物组织中盐酸克伦特罗残留量

建立了固相萃取-气相色谱分析动物组织中盐酸克伦特罗残留量的方法．采用固相萃取,分离富集动物组织中的盐酸克伦特罗．肉样的加标回收率在70％～80％;最低检出限为1μg／kg．盐酸克伦特罗的硅烷化衍生产物,采用气相色谱(ECD检测器)检测,其衍生物的峰面积与样品浓度在0．005～1．0μg／mL范围内呈良好的线性关系,线性回归系数大于0．999．     

猪肝样品中莱克多巴胺测定的前处理方法

研究猪肝样品中莱克多巴胺测定的样品前处理方法。样品直接用HCl酸解并超声提取,同时添加70%~72%的高浓度HClO_4对酸解样品进行蛋白沉淀,然后经MCX固相萃取柱净化后,用液相色谱-串联质谱法检测。用正交试验考察了酸的种类、浓度、提取时间、提取温度和HClO_4体积对提取效率的影响,最佳条件为:HCl浓度为0.2mol/L,提取时间为40min,提取温度为25℃,HClO_4用量为200μL。从0.5、5.0和10.0μg/kg添加水平检测结果可以看出,方法平均回收率为82.0%~102%,日内和日间精密度4%,符合国家标准对检验方法的要求。该方法灵敏度高,精密度好,成本低,能简便、快速对样品中的莱克多巴胺进行提取,实现对动物源性食品的快速监测。     

固相萃取-高效液相色谱-荧光检测土壤中喹诺酮类抗生素

建立了固相萃取-高效液相色谱-荧光(HPLC-FLD)检测土壤中4种喹诺酮类抗生素的分析方法.样品采用50% Mg(NO_3)_2-10% NH_3 · H_2O(96∶ 4,V/V)超声提取,过HLB柱富集净化,再用乙腈-0.067 mol/L H_3PO_4溶液洗脱.采用高效液相色谱-荧光检测器,以乙腈-0.067 mol/L H_3PO_4(用三乙胺调节至pH 2.5)为流动相,于激发波长280 nm、发射波长450 nm处进行检测.土壤样品中4种喹诺酮类抗生素的加标回收率在60.4%～99.3%之间,检出限为0.58～1.0 μg/kg.对蔬菜基地土壤样品分析结果表明,本方法能够满足实际样品的分析要求,4种喹诺酮类抗生素均被检出,土壤中抗生素污染问题值得关注.     

高效液相色谱-质谱法同时测定猪尿中克伦特罗和莱克多巴胺

克伦特罗和莱克多巴胺同属于β_2-肾上腺素受体激动剂(简称β_2-兴奋剂),能够改善动物养分的代谢途径,促进动物肌肉的合成,抑制脂肪合成的积累,因此常被不法分子添加于动物饲料或饮用水中,以提高胴体瘦肉率。由于其易在动物肝脏中积聚残留,并通过食物链进入人体。人类食用后,可能出现     

猪肉中四环素类抗生素残留的固相萃取-高效液相色谱荧光测定法

采用固相萃取技术富集、分离猪肉中四环素、土霉素、金霉素、强力霉素4种四环素类抗生素,采用反相高效液相色谱荧光法测定.对固相萃取柱、流动相、检测器等条件进行了优化选择,4种物质的检出限为0.03～ 0.05μg/mL在0.02～0.20 mg/kg添加水平,4种抗生素的加标回收率为60%～91%之间,相对标准偏差(RSD,n=5)为2.1%～5.1%.     

固相萃取-高效液相色谱-荧光检测法同时测定水中的壬基酚和双酚A

利用C18固相萃取柱富集和净化水样,采用高效液相色谱分离、荧光检测建立了水中的壬基酚（NP）和双酚A（BPA）的测定方法,并成功用于污水处理厂各处理单元出水的测定。不同加标水平的NP和BPA的回收率为95．3％～98．6％．其相对标准偏差为2、5％～3．7％。     

纳米纤维固相萃取-高效液相色谱法测定血浆中的5-羟色胺

基于纳米纤维的富集作用,建立了血浆中5-羟色胺(5-HT)的柱前衍生高效液相色谱-电化学检测(HPLC-ECD)分析方法.用10%(v/v)高氯酸溶液沉淀血浆蛋白,离心后取上清液,用0.1 mol/L 的四苯硼酸钠溶液调节pH值至8.5,加入衍生剂邻苯二甲醛溶液于30 ℃衍生4 min,经纳米纤维固相萃取柱净化富集后,...     

Screening of domperidone in wastewater by high performance liquid chromatography and solid phase extraction methods

Domperidone is a dopamine D₂ receptor antogonist, which has been used as antiemetic agent in human beings. It has been found in wastewater released by some pharmaceutical industries leading to the contamination of surface and ground water. Therefore, a sensitive, inexpensive and reproducible HPLC-SPE method was developed for the analysis of domperidone in the wastewater. The column used was Waters symmetry C₁₈ (15 cm × 0.46 mm, 5 μm). The mobile phase used was phosphate buffer (50 mM, pH 3.5) acetonitrile (80:20, v/v) at the flow rate 2.0 mL/min. The detection was achieved by using UV mode at 230 nm. The retention, separation and resolution factors were 2.63, 3.00 and 3.20, respectively. The percentage recovery of domperidone from wastewater was 95.0%. Celiprolol was used as the internal standard to access the percentage extraction of domperidone from wastewater.     

固相萃取-高效液相色谱法测定枸杞中的类胡萝卜素

研究了固相萃取富集和预分离,高效液相色谱测定枸杞中的类胡萝卜素的方法;枸杞中的类胡萝卜素用WatersXterraTMRP18固相萃取小柱预分离,以WatersXterraTMRP18(3.9×150mm,5μm)液相色谱柱为固定相,甲醇 四氢呋喃(4 1)为流动相分离,用二极管矩阵检测器检测,检测波长为450nm。方法标准回收率为95%～103%。用该方法测定了几种枸杞样品中的类胡萝卜素。     

固相萃取-高效液相色谱法测定蜂蜜中的有机酸

建立了固相萃取-高效液相色谱(SPE-HPLC)同时测定蜂蜜中5种有机酸(L-苹果酸、马来酸、琥珀酸、柠檬酸、D-苹果酸)含量的方法。蜂蜜经制样后过Bond Elutes SAX固相萃取(SPE)小柱净化,用C18-MS-II反相色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm)进行分离,流动相为2%偏磷酸溶液,流速为0.7 mL/min,检测波长为210 nm。在此条件下5种有机酸在相应的线性范围内其线性相关系数均大于0.9967;方法的回收率为86.0%～103.9%,相对标准偏差为5.7%～9.8%(n=6),检出限为0.06～9.4 mg/kg。所建立的方法可用于蜂蜜样品中有机酸的测定。     

改进的固相萃取-高效液相色谱法测定土壤中15种醛酮类化合物北大核心CSCD

建立了改进的固相萃取-高效液相色谱法测定土壤中甲醛、乙醛、丙烯醛、丙酮、丙醛、丁烯醛、丁醛、苯甲醛、异戊醛、正戊醛、邻-甲基苯甲醛、间-甲基苯甲醛、对-甲基苯甲醛、正己醛和2,5-二甲基苯甲醛等15种醛酮类化合物的分析方法。利用乙腈对土壤进行超声提取,样品提取液与2,4-二硝基苯肼(2,4-DNPH)进行衍生化反应,生成稳定的腙类化合物;随后利用装有亲水亲脂平衡的N-乙烯基吡咯烷酮/二乙烯基苯共聚物填料的固相萃取小柱(Welchrom^(■)BRP)对衍生后的溶液进行净化;采用Ultimate^(■)XB-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)进行分离,以乙腈-水(65∶35,v/v)为流动相进行等度洗脱,于波长360 nm处进行检测,利用外标法对土壤中15种醛酮类化合物进行定量。该方法改进了环境标准HJ 997-2018《土壤和沉积物醛、酮类化合物的测定高效液相色谱法》中试样的处理方法,优化后得到土壤的最佳提取条件,即:提取溶剂为乙腈,提取温度为30℃,提取时间为10 min。结果表明:采用BRP小柱的净化效果明显优于普通硅胶基质C_(18)小柱,15种醛酮类化合物在各自的范围内线性关系良好,线性相关系数均在0.996以上;平均加标回收率为84.6%~115.9%,相对标准偏差(RSD)为0.2%~5.1%;检出限为0.02~0.06 mg/L。该方法简便,灵敏度高,准确性好,适用于HJ 997-2018中规定的土壤和沉积物中15种醛酮类化合物的准确定量分析,为研究土壤中醛酮类化合物的残留状况和环境行为提供了可靠的技术支持。     

固相萃取-高效液相色谱/串联质谱法测定食醋中的3种甜味剂

建立了食醋中3种甜味剂的固相萃取-高效液相色谱/串联质谱分析方法。样品经酸性水稀释,弱阴离子固相萃取柱净化,Pursuit C18色谱柱分离,10 mmol/L醋酸铵(含0.1%氨水)和乙腈为流动相梯度洗脱,电喷雾负离子模式下多反应监测(MRM)模式检测。糖精钠、安赛蜜、甜蜜素的定量限分别为10、5、5 μg/kg,回收率为72.1%～96.8%,相对标准偏差小于15%。该方法准确、灵敏度高,可用于食醋中甜味剂的定性定量检验。     

固相萃取-高效液相色谱测定饲料中新橙皮苷二氢查耳酮和柚皮苷二氢查耳酮

建立了固相萃取-高效液相色谱检测饲料中新橙皮苷二氢查耳酮（NHDC）和柚皮苷二氢查耳酮（Naringin DC）的方法。采用纯甲醇溶液进行超声辅助萃取样品，经HLB固相萃取柱净化后在XB-C₁₈（150 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱上分离，用甲醇/水作为流动相进行梯度洗脱，光电二极管阵列检测器进行检测。结果表明，新橙皮苷二氢查耳酮和柚皮苷二氢查耳酮在0.2~49.0 mg/L范围内具有良好的线性关系，相关系数均>0.999，定量限分别为0.02和0.01 mg/kg。日内和日间精密度分别为0.7%~4.1%和0.9%~6.0%。方法的加标回收率为86.2%~105.0%，相对标准偏差（RSDs）为1.0%~6.3%（n=3）。该方法能有效降低饲料基体成分的干扰，灵敏度高，重现性好，适用于饲料中新橙皮苷二氢查耳酮和柚皮苷二氢查耳酮的定量检测。     

固相萃取/高效液相色谱荧光法测定水产品中苯并芘

采用Florisil固相萃取柱纯化样品,建立了高效液相色谱(HPLC)荧光法测定水产品中苯并(a)芘的方法.样品以正己烷为提取剂,净化、蒸发浓缩后用流动相溶解.荧光检测器激发波长297 nm,发射波长405 nm.流动相为V(乙腈):V(水)=75:25,流速1.0 mL/min,外标法定量.苯并(a)芘在0～200 ng/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数r=0.99990;在5个空白样品中添加0.5μg/kg浓度水平的标准品,回收率在81.9%～89.5%之间,相对标准偏差为4.1%(n=5);日内、日间精密度分别为0.7%(n=5)、2.4%(n=3);最低检测限为90 ng/kg.     

Determination of erythromycins in fermentation broth using liquid phase extraction with back extraction combined with high performance liquid chromatography

Liquid phase extraction with back extraction (LPE-BE) combined with high performance liquid chromatography-diode array detection (HPLC-DAD) was applied for the extraction and determination of erythromycin A, B and C in fermentation broths. According to this procedure, the fermentation broth with the adjustment pH at a fixed value of 10 was first mixed with organic solvent (V_broth/V_org = 1.0). After shaking, the mixture was separated into two phases by microfuging at 13,000 rpm for 15 min. Then back extraction was performed into the acidic aqueous phase with pH 5.0 (V_org/V_aq = 1.0). After centrifugation at 3000, the two phases were separated and 50 μL of the acidic aqueous phase was injected into the HPLC. The effects of different variables such as the nature of extraction solvent and the pH of samples and buffer were investigated. At the most appropriate conditions, dynamic linear ranges of 0.5–8, 0.1–0.9 and 0.1–0.9 mg mL⁻¹ and limits of detection of 0.03, 0.003 and 0.002 mg mL⁻¹ were obtained for erythromycin A, B and C, respectively. Relative standard deviations (RSDs) of the proposed method were less than 9.5%. The mean recoveries were 99.5%. The proposed method is simple and sensitive with highly clean-up effect and it can be used for monitoring the progress of erythromycin fermentation.