铌-铬天青S与牛血清白蛋白结合反应及其应用

探讨了铌-铬天青S配合物与牛血清白蛋白(BSA)结合反应体系.在pH 4.6的邻苯二甲酸氢钾-NaOH(Clark-Lubs)缓冲溶液中,在OP存在下,铌-铬天青S配合物与牛血清白蛋白进一步形成复合物,其最大吸收峰位于595 nm,且随着BSA量的增加,体系在595 nm波长处吸收峰也随着增大.据此建立以铌-铬天青S配合物为光谱探针,分光光度法测定蛋白质含量的新方法.牛血清白蛋白含量在0～0.32 mg/mL的范围内符合比尔定律,摩尔吸光系数ε595为 4.4×105 L·mol-1·cm-1,相关系数为γ=0.9996,生物体内的常见物质基本上不干扰测定,方法可用于人血清蛋白中蛋白质的测定.     

蛋白质与铁(Ⅲ)－铬天青S结合反应的研究

蛋白质与铁（Ⅲ）－铬天青Ｓ结合反应的研究魏永巨,李克安,童沈阳（北京大学化学系,北京,１００８７１）关键词血清白蛋白;γ－球蛋白;铁（Ⅲ）－铬天青Ｓ配合物;吸收光谱某些金属配合物与蛋白质的结合反应已被用于蛋白质的定量分析［１～４］。我们用吸收光谱法研...     

铬天青S光度法测定铬铁矿中Al2O3的方法研究

铬铁矿试样经碱熔,酸化后分离铬,用抗坏血酸来掩蔽铁,用Na2HPO4掩蔽钛,在pH 5.3~6.3的溶液中,铬天青S与铝生成紫红色络合物,570 nm进行比色。络合物稳定时间长,重现性好、准确性高,其测定结果与标准值相符,RSD<5%(n=5)。     

生物活性物质与光谱探针反应的研究-血清白蛋白与铬天青S的反应

本文研究了铬天青SL(CAS)与牛血清白蛋白(BSA)在酸性溶液中反应前后的吸收光谱,认为CAS 与BSA 主要通过静电引力而结合,研究发现这一探针反应不符合Scatchard模型,提出了处理此类体系溶液平衡的一个新的线性回归方程, 由此方程可以求算结合常数,最大结合数以及吸光系数等体系参数,最后考察了实验条件对结合反应的影响.     

铬天青S分光光度法测定甲烷氧化菌素的研究

铬天青S(CAS)在十六烷基三甲基溴化铵存在条件下能与Cu产生蓝紫色的络合物,乙二胺四乙酸二钠(EDTA)和甲烷氧化菌素(mb)可以夺取络合物CAS-Cu中的Cu而产生颜色变化.采用分光光度法绘制二者的铜络合曲线,得出回归方程,进而计算出mb的EDTA相当量,最终设计一种检测甲烷氧化菌素的测定方法.其最大吸收波长为60...     

扑尔敏与铬天青S荷移反应分光光度法测定扑尔敏的含量

研究了扑尔敏与铬天青S的电荷转移反应,确定了反应条件,建立了测定扑尔敏的分光光度法。扑尔敏与铬天青S在水溶液中发生电荷转移反应,常温下反应20min后可比色。电荷转移络合物的最大吸收波长是532nm,表观摩尔吸光系数为2.27×103L·mol-1·cm-1。扑尔敏质量浓度在20～160mg·L-1范围内服从比耳定律,相关系数为0.9990。当扑尔敏浓度为80mg·L-1时,六次测定结果的相对标准偏差为1.39%。测得荷移络合物的组成为1∶1、稳定常熟为1.48×105,探讨了反应机理。本方法用于测定片剂中扑尔敏的含量,结果与文献方法一致,回收率在99.0%以上。     

奈韦拉平与铬天青S的电荷转移反应及其测定

确定了奈韦拉平与铬天青S的电荷转移反应条件,同时建立了测定奈韦拉平的分光光度法。奈韦拉平与铬天青S在水和丙酮混合溶剂中发生电荷转移反应,常温下反应30min后可比色。电荷转移络合物的最大吸收波长是578nm,表观摩尔吸光系数为1.78×104L·mol-1·cm-1。奈韦拉平质量浓度在1～16μg·mL-1范围内服从比耳定律,相关系数为0.9993。当奈韦拉平浓度为6μg·mL-1时,六次测定结果的相对标准偏差为1.61%。测得荷移络合物的组成和稳定常数分别为1∶1和1.73×104。本方法用于测定制剂中奈韦拉平的含量,结果与文献方法一致,回收率在98.0%以上。     

5种荧光染料探针与牛血清白蛋白相互作用研究

采用荧光光谱法研究了水溶液中四溴荧光素、四氯四溴荧光素、二碘荧光素、乙基罗丹明B、健那绿B等5种荧光染料探针与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.实验表明,这5种染料探针同牛血清白蛋白结合时,疏水作用力起决定性作用,静电力起次要作用,相比之下牛血清白蛋白(BSA)结合阴离子的能力最强,其次为中性分子,最后为阳离子.通过疏水作用力,5种染料均是以非极性苯基进入BSA疏水性腔体中同色氨酸残基发生作用,弱氢键的形成加强了这种作用力,且使得光谱间能量转移效率明显提高.5种染料探针的极性部位由于极性和空间效应的原因难以进入腔体内部,致使反应均按接近1∶1的方式进行.     

荧光法研究meso-四对羧基苯基卟啉与牛血清白蛋白的作用机理

应用荧光法研究了meso-四对羧基苯基卟啉(TCP)与牛血清白蛋白(BSA)的结合反应.通过Stern-Volmer方程和Lineweaver-Burk双倒数函数关系式,测得25℃,36℃和42℃下反应的动态猝灭常数Ksv分别为1.17×105,1.06×105,1.01 ×105 L·mol-1,静态猝灭常数KLB分...     

肼黄与牛血清白蛋白相互作用的光谱研究

本文用荧光光谱法和紫外-可见吸收光谱法研究了肼黄与牛血清白蛋白(BSA)结合反应的光谱行为,发现肼黄因对BSA有较强的荧光猝灭作用,且肼黄的紫外吸收光谱和BSA的荧光发射光谱有一定程度的重叠,据此得出了其结合反应的结合常数、结合位点数和基本热力学参数等,并研究了二者的相互作用机理。     

Comparative DSC study of human and bovine serum albumin

The thermal denaturation process of bovine and human both fatty acid containing and fatty acid free albumins in aqueous solution was studied by use of differential scanning calorimetry. Human serum albumins were found to be more stable than their bovine counterparts. Fatty acid free albumins were characterized as generally less stable, more susceptible to aggregation, their unfolding endothermic transition was less cooperative and with the smaller degree of reversibility. Deconvolution analysis with using a non-two-state model with two component transitions showed essential differences in the thermodynamic parameters between all studied albumins, particularly regarding the high-temperature component transition.     

绞股蓝皂苷与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱研究

用荧光光谱技术研究了绞股蓝皂苷与牛血清白蛋白(BSA)在pH=7.40的Tris-HCl缓冲溶液中的相互作用;通过计算确定了绞股蓝皂苷与BSA的结合位点数和结合常数,利用热力学分析探讨了绞股蓝皂苷与BSA之间的结合方式;同时采用同步荧光技术考察了绞股蓝皂苷对BSA构象的影响.结果表明,绞股蓝皂苷对牛血清白蛋白的荧光猝灭过程为静态猝灭;二者主要靠疏水作用和静电引力结合.     

肌醇与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱研究

应用荧光光谱研究了肌醇与牛血清白蛋白(BSA)分子间的相互作用;求出了猝灭常数,讨论了肌醇对BSA构象的影响,并依据能量转移理论确定了肌醇与蛋白的最近距离.结果表明,肌醇与BSA两者间的相互作用为单一的动态猝灭过程.     

甲苯胺蓝与牛血清白蛋白作用的光谱特性研究

应用荧光光谱法研究了甲苯胺蓝(TB)与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的光谱特性.测定了TB与BSA在20℃,30℃和40℃3个温度下的结合常数KA分别为8.94×103,1.75×104,1.74×104L/mol,结合位点数n分别为0.66,0.71和0.93.实验表明:TB与BSA的荧光猝灭主要为静态猝灭;利用Gibbs-Helmholtz方程计算得到热力学参数ΔH为49.416kJ,ΔS为244.876J.mol-1.K-1,探讨了它们的相互作用机理,结果表明TB主要以氢键作用力与BSA相互作用;应用同步荧光技术研究了TB对BSA构象的影响.     

毛细管电泳应用于测定牛血清白蛋白与脂质体的相互作用

建立了一种用毛细管电泳法检测牛血清白蛋白(BSA)与脂质体相互作用的分析方法。氧化指数的测定实验结果表明经过冷冻干燥的脂质体稳定性更好;毛细管电泳表征脂质体的电荷性质实验结果表明脂质体在pH 5.0～8.0的条件下呈电中性。在pH 7.0的条件下,以各种浓度的脂质体混悬液为电泳缓冲液,以0.8%二甲亚砜(DMSO)为内标,随着缓冲液中脂质体质量浓度从0增加到2.4 mg/mL,BSA的有效淌度从-2.232×10-4 cm2·V－1·s－1变化到-3.046×10-4 cm2·V－1·s－1;结合Scatchard分析,测得BSA与脂质体的结合常数为2.522×103(g/mL)－1。该方法简单、快速,为研究蛋白质与脂质体的相互作用提供了新的技术手段。     

水飞蓟素与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱研究

采用同步荧光光谱技术研究了pH=7.40的Tris-HCl缓冲体系中水飞蓟素与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用以及水飞蓟素对BSA构象的影响.结果表明,水飞蓟素对BSA的荧光猝灭过程为静态猝灭,结合热力学参数△rH∞=-45.21 kJ·mol-1,△rSm=-61.61 J·K-1·mol-1;据此可以推断,水飞蓟素...     

丝裂霉素C与牛血清蛋白结合作用的研究

结合光谱法与微量热法研究了水溶液中丝裂霉素C与牛血清白蛋白分子间的结合反应,测定了反应的结合常数K~A,结合位点数n及热力学函数△~rG~m,△~rH~m和△~rS~m,并确定了分子间作用力性质;依据Forster非辐射能量转移机制,确定了授体-受体间的结合距离和能量转移效率;采用同步荧光技术考察了丝裂霉素C对牛血清白蛋白构象的影响。