固定化酶微观活性定位的X射线微区分析

利用X射线微区分析,对共价法得到的固定化L—天门冬酰胺酶的活性进行了分析。L—天门冬酰胺作为底物,MgCl2作为捕捉剂,底物经L-天门冬酰胺酶催化分解产生氨,后者和捕捉剂反应产生沉淀,可以确定固定化L-天门冬酰胺酶的催化活性部位。结果表明：大孔树脂载体,酶活较高,活性L-天门冬酰胺酶分布较均匀。并得到了固定化L-天门冬酰胺酶的活性定位的最佳条件。并对不同结构载体固定化酶活性进行了研究。     

酶电极上葡萄糖氧化酶的活性的X射线微区分析

利用X射线微区分析, 对二氧化硅溶胶-凝胶包埋于普鲁士蓝修饰玻碳电极上的葡萄糖氧化酶的活性进行了分析; 以Ce(NO₃)₃为捕捉剂, 底物葡萄糖经葡萄糖氧化酶作用产生过氧化氢,后者与捕捉剂反应生成沉淀于酶的活性部位。从X射线微区分析结果表明： 酶电极表面固定化酶的分布均匀,且保存较高的酶活,从微观的角度说明了酶电极的性能与酶电极表面酶活分布的关系。此法制备的葡萄糖氧化酶电极具有较高的灵敏度,稳定性,这与电化学测试结果是一致的。     

壳聚糖固定化脲酶活性的X射线微区分析

利用X射线微区分析方法,对壳聚糖固定化脲酶活性进行了定位分析。筛选出了能捕捉固定化脲酶活性部位的捕捉剂BaCl₂,以尿素作为底物,在Tris-HCl缓冲溶液中,底物经固定化脲酶催化产生NH₃和CO₂,后者和捕捉剂反应生成BaCO₃沉淀, 沉积在固定化脲酶的催化活性部位,借此确定其催化活性部位。结果表明BaCl₂可用做固定化脲酶活性定位的捕捉剂。同时得到了壳聚糖固定化脲酶活性定位的最佳实验条件。     

北京同步辐射光源的微区X射线荧光分析

介绍了同步辐射微区荧光分析的特点，北京正负电子对撞机国家实验室同步辐射荧光实验站的仪器设备及开展的研究工作。     

同步辐射微束X射线荧光分析实验站

北京同步辐射装置微束X射线荧光实验站位于4W1A白光束线末端,主要仪器设备包括:束流强度监测用电离室系统、狭缝及激光对准光路系统、多维精密样品移动台及其步进马达驱动系统、体视显微镜及电视观测系统、Si(Li)能量色散谱仪系统等,实验装置在微区荧光分析中具有很清的灵敏度(绝对检测限达到10^－10－10^—13g,相对检测限为Nμg/g-N0.1μg/g级,在全反射XRF实验条件下,相对检测限为1-5ng/g),良好的空间分辨率(厚样几十μm,生物薄样200μm).本实验站在地学、生命科学、材料科学等方面开展了大量的研究工作.     

大气可吸入肺纳米颗粒的SEM及X射线微分析研究

以大气中可吸入肺纳米颗粒为研究对象,利用场发射扫描电子显微镜(FSEM)和X射线能谱仪对其形态和常量组分进行了系统研究。研究结果表明：大气可吸入物中的纳米颗粒大多为类球与椭球形,表面较为光滑,结构紧密,较小的纳米颗粒聚集成团呈松散絮状,粒度大小约在30～100 nm之间,纳米颗粒物中含有的常量元素同大颗粒污染物基本一致,主要含有C,O,Al,Si,Na,Mg,K,Ca,Fe,S,Cl等元素,能量色谱仪(EDS)的点分析研究证实一些纳米颗粒物中Cl和S元素的含量明显增大,而另一些颗粒主要为C和O元素,分析其原因,认为主要是气溶胶在形成过程中,以纳米无机灰尘颗粒为中心表面吸附了大气污染物中的有机排放物所致,从而形成了具有核壳结构的纳米颗粒污染物。因此,减少人为有机污染物的排放,对于减少可吸入肺有害纳米颗粒的形成具有很大的影响。     

同步辐射微探针荧光分析

本文介绍了同步辐射及其特点，同步辐射微探针荧光分析的实验装置及在北京同步辐射装置上开展的研究工作。     

蛋壳的X-射线衍射实验研究

本文简要介绍了蛋壳及其应用的最新研究成果。对6个不同的样品进行粉末X-射线衍射实验,指出共同点和差异,获得了蛋壳的X-射线衍射指纹图谱及特征标记峰值。对蛋壳的实际应用提供了有力的实验数据。     

高通量微区扫描EDXRF仪器设计

用多毛细管X射线透镜做光源的微区扫描型EDXRF仪器,围绕出射焦斑对称放置4～6个SDD探测器,设计软件控制X射线管、多个探测器、高精度移动平台,同时进行数据采集、信号同步和结果分析,从而开发完成NX-mapping高通量微区扫描型EDXRF仪器。由于多探测器的采用,该仪器的信号强度得到数倍的提升,且稳定性没有因为器件间的差异而变差,同等条件,同等用时的情况下,测试标准偏差降为单探测器时的不足40%。均匀样品2 mm×2 mm面扫描时,400个点的测试标准偏差与定点测试无差异,说明运动机构和控制算法表现优异,不会对测试结果产生影响。对于微区扫描仪器的焦斑尺寸,用“荧光刀口实验”的方法,对Fe,Ni和Mo元素进行了测试,测得三种元素的有效焦斑尺寸最小值分别为52.4,49.3和39.03 μm,各元素有效焦斑尺寸随原子序数的增加而减小,这与多毛细管X射线透镜的设计原理相符;实验还发现了各元素焦斑有效尺寸在极小值处对高度变化较为敏感的规律,因此建议为了得到统一清晰的扫描图像,要保持样品表面的平整。最后用NX-mapping仪器对某单晶高温合金样品的Ni,Ta,W和Re元素进行扫描和分布分析,图像清晰,枝晶结构明显可辨,并且其中Ni∶Ka特征线强度高达220 kcps,明显高于普通的XRF测试。在NX-mapping微区扫描型EDXRF仪器中,由于多探测器的采用,信号强度高,测试精密度好,随之测试时间可以缩短,因此可以满足高通量测试的需求。     

拉曼微区分析技术在古颜料研究中的应用

拉曼微区分析技术可进行空间分辨的原位无损检测,为其他现代分析技术所不及,文章介绍了这一分析技术在古代文稿、油画、水彩画、壁画、陶等颜料分析中的应用。     

动态高压微射流技术对木瓜蛋白酶活性的影响(英文)

研究了动态高压微射流技术对木瓜蛋白酶活性的影响,并以荧光光谱为检测手段对木瓜蛋白酶的分子构象进行表征。结果显示,动态高压微射流处理(120~180 MPa)后,木瓜蛋白酶酶活降低。经180 MPa处理1次,木瓜蛋白酶相对酶活降至90.04%。随着处理压力的增加,木瓜蛋白酶分子、酪氨酸残基、色氨酸残基的荧光发射峰位置分别从对照组的334、285、277.5 nm红移至140 MPa处理组的335.5、285.5、278.5 nm,然后回移至180 MPa处理组的334、285、278 nm。在0~4℃放置24 h后,酶活进一步降低,木瓜蛋白酶和酪氨酸残基的荧光强度出现波动(降低、上升然后再降低),表明动态高压微射流处理(120~180 MPa)改变木瓜蛋白酶分子构象的效果较为明显,形成的新构象稳定性低。     

十二烷基硫酸钠对木瓜酶酶活性和构象的影响

采用紫外、荧光和圆二色等光谱技术研究了阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠（SDS）对木瓜酶酶活力及其构象变化的影响.结果表明：（1）SDS对木瓜酶酶活力的影响与pH有关,pH=8.00时,SDS对木瓜酶酶活力有增强作用,pH=6.30时,除了在SDS的临界胶束浓度（cmc）时木瓜酶酶活力得到增强外,其他浓度下SDS对木瓜酶酶活力没有影响,pH=9.50时,SDS对木瓜酶酶活力产生抑制作用.（2）SDS对木瓜酶的荧光产生淬灭,0.1cmc的SDS木瓜酶荧光峰红移,而SDS浓度≥1cmc后则使之蓝移;（3）当[SDS]＜cmc时,木瓜酶的α-螺旋、β-折叠、回转等有序结构的含量减少而无定形结构含量增加,当[SDS]＞cmc后,木瓜酶的α-螺旋、β-折叠构型含量有所增加,无定形构型含量则有所减少.有序结构的含量越大,酶活力越强.     

Layer-by-Layer Laser Spectrum Microanalysis of Easel-Painting Materials

A technique of layer-by-layer laser microanalysis of the materials of easel-painting works employing a two-pulse scheme of substance excitation and registration of the spectrum from one double pulse is suggested. With paintings from the Nesvizh Portrait Gallery as examples, the effectiveness of the method in identification and attribution of paintings is shown. __________ Translated from Zhurnal Prikladnoi Spektroskopii, Vol. 72, No. 3, pp. 348–351, May–June, 2005.     

光谱法研究CTAB对木瓜酶酶活和构象的影响

采用荧光光谱、圆二色谱(CD)和紫外光谱研究了十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)在NaHPO4-NaH2PO4缓冲溶液中对木瓜酶构象变化及其酶活的影响,并探讨了CTAB与木瓜酶的作用机理.荧光光谱表明,在CTAB存在下,木瓜酶的荧光强度增强,荧光峰发生红移,CTAB使木瓜酶分子链趋于伸展,酪氨酸等发色基团更多地暴露在水中.CD谱表明,当CTAB浓度(CCTAB)为0.5 mmol/L时,木瓜酶的a-螺旋构象和β-折叠构象含量比纯木瓜酶(Papain)体系分别增加了1.3％和0.1％,回转构象和无定型构象含量则分别减少了0.3％和1.2％.酶活测定结果表明,CTAB对木瓜酶的酶活有较大影响,当CCTAB由0增加到 1.5mmol/L时,木瓜酶酶活由11.2×105U/g增大到16.3×105U/g,当CCTAB由1.5mmol/L增加到3.5mmol/L时,木瓜酶的酶活又由峰值(16.3×105U/g)降到11.7×105U/g.CTAB使木瓜酶酶活增强与木瓜酶的构象有序度提高有关.     

X射线荧光微区分析结合电感耦合等离子体质谱法进行保健食品中元素含量的测定

X射线荧光光谱微区分析法既有X射线荧光光谱法快速、简便、无损检测等特点,又可对保健食品表面的元素分布进行检测,电感耦合等离子体质谱法具有检出限低、线性范围宽、多元素同时测定等优点,旨在建立一种X射线荧光光谱微区分析法和电感耦合等离子体质谱法联合测定保健食品中元素种类、分布及含量的方法.利用X射线荧光光谱微区分析技术对一...     

Immobilized protease on the magnetic nanoparticles used for the hydrolysis of rapeseed meals

(3-aminopropl) triethoxysilaneand modified magnetic nanoparticles with the average diameter of 25.4 nm were synthesized in water-phase co-precipitation method. And then these nanoparticles were covalently coupled with alkaline protease as enzyme carrier by using 1,4-phenylene diisothlocyanate as coupling agent. Experiments showed that the immobilized protease can keep the catalytic bioactivity, which can reach to 47.8% when casein was served as substrate. Results showed that the catalytic activity of immobilized protease on these magnetic nanoparticles could retain 98.63±2.37% after 60 days. And it is more stable than the free protease during the shelf-life test. The enzyme reaction conditions such as optimum reaction temperature and pH are the same as free protease. Furthermore, mix-and-separate experiments showed that the immobilized protease could be recycled through the magnetic nanoparticles after the biocatalysis process. When the rapeseed meals were used as substrate, the degree of hydrolysis of immobilized alkaline protease achieved 9.86%, while it was 10.41% for the free protease. The macromolecular proteins of rapeseed meals were hydrolyzed by immobilized protease into small molecules such as polypeptides or amino acids. Thus, a novel efficient and economic way for the recycling of enzymes in the application of continuous production of active peptides was provided based on these magnetic nanoparticles.