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紫外分光光度法表征Lipozyme TL IM脂肪酶转酯化活性 总被引:2,自引:0,他引:2
建立了一种新的有机相脂肪酶转酯化活性测定方法. 以正己烷为溶剂,脂肪酶催化棕榈酸对硝基苯酯和正丁醇的转酯化反应为模型反应,通过测定反应液中310 nm下吸光值的变化计算反应转化率. 以气相色谱法对新建的紫外分光光度法进行验证,分别采用这两种方法测定了七种商品化脂肪酶的转酯化活性,两种方法所得实验结果基本一致. 利用紫外分光光度检测法考察了Lipozyme TL IM脂肪酶催化转酯化的时间进程及合成活性与酶量的关系,并对Lipozyme TL IM催化转酯化的性质(最适溶剂、酰基受体特异性、醇耐受性、最优反应温度和热力学稳定性)进行了表征. 相似文献
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利用脂肪酶催化的不对称转酯反应成功远程拆分具有季碳手性中心的西酞普兰中间体4-[4-(二甲基氨基)-1-(4’-氟苯基)-1-羟基丁基]-3-(羟基甲基)苄腈(1). 以乙酸乙烯酯作为酰基供体, 通过筛选酶和溶剂, 确定最佳脂肪酶及溶剂分别为Candida antarctica lipase B (Novozym 435)和乙腈; 并在该反应体系中考察了反应温度、二醇1与酰基供体的比例、酶浓度和摇床转速等对反应的影响, 确定优化的反应条件为: 温度30 ℃, 二醇1与酰基供体的物质的量比为1∶5, 酶浓度为10 mg/mL, 摇床转速200 r/min. 分别考察二醇1浓度为60和180 mmol/L的反应情况, 均具有较高的选择性和反应速度. 实验结果表明酶能够多次重复利用. 相似文献
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用索氏提取法,NaOH-消解法和超声振荡萃取法提取海藻样品中的石油烃成分,荧光分光光度计测定石油烃含量,结果表明,NaOH-消解能够更有效从样品中提取石油烃,其检测限为0.075mg/kg。 相似文献
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对氨基酚荧光分光光度法测定铁 总被引:9,自引:0,他引:9
研究发现,在硫酸介质中,Fe^3+与对氨基酚的反应产物会发出中的荧光,其激发波长和发射波长分别为292.0nm和328.0nm。对铁的检测限为0.5μg/L;线性范围为0.005 ̄0.40μg/L,将该分析体系用于奶粉及人发中铁的分析测定,取得了满意的结果。 相似文献
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荧光分光光度法测定废液中微量镉 总被引:3,自引:0,他引:3
1引言荧光法测定微量镉,常用的试剂有8-羟基喹啉-5-磺酸、硫基喹啉和桑色素等,但选择性欠佳。本文应用8-羟基喹啉-5-磺酸,加入溴代十六烷基三甲胺,由于表面活性剂的增敏效应,使灵敏度提高2~3倍。用HCI作浓度梯度淋洗的阳离子交换法预处理,使镉与共存离子获得满意分离,消除了干扰。器壁吸附会导致微量镉的损失,采用玻璃器皿硅烷化处理后效果显著。该方法的线性工作范围为5~100μg/L,相对标准误差为±4.9%,可应用于各种水样,尤其是大体积水样中微量锅的分析测定。2实验部分2.1试剂与仪器 镉标准… 相似文献
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用紫外分光光度法及荧光光度法研究肾上腺素在不同pH条件下的稳定性 总被引:1,自引:0,他引:1
宋远志 《理化检验(化学分册)》2008,44(9):854-856
在pH7.45磷酸盐缓冲溶液和盐水组成的模拟生理介质中,用UV-分光光度法及荧光光度法研究了肾上腺素分子中电子对能量的传递方式及不同的pH条件对肾上腺素稳定性的影响。结果表明:在此条件下,肾上腺素的特征吸收峰位于278.0nm波长处;当激发光谱波长为279.0nm时,在314.0nm及616.0nm两波长处出现肾上腺素的荧光发射光谱峰。据此提出了测定肾上腺素的荧光光度法,其线性范围为1.80mg·L^-1以内,检出限(S/N=3)为2.70×10^-4mg·L^-1。试验发现:当溶液的pH值大于10时,肾上腺素被氧气氧化生成羰基化合物,致使其吸收峰发生红移及荧光峰的减弱或消失。 相似文献
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辣根过氧化物酶分光光度法测定黄嘌呤氧化酶的活性 总被引:15,自引:0,他引:15
研究了以辣根过氧化物酶-苯酚-4-氨基安替比林反应显色新体系,检测黄嘌呤氧化酶(XOD)活力的新方法。确定该酶活性测定的最佳条件为:辣根过氧化物酶(HRP)7000 U/L,4-氨基安替比林(AAP)1 mmol/L,苯酚(PA)6 mmol/L,黄嘌呤(XAN)1 mmol/L溶于50 mmol/L Tris-CL缓冲液(pH 8.4);反应温度为37℃,保温时间为20 m in;检测波长为508 nm。本方法测定XOD酶活的线性范围为5.0~100.0 U/L,线性关系良好(r=0.9992),检出限为1.3 U/L。该方法操作简单易行,测定结果准确可靠。可有效应用于普通实验室和临床常规生化检测。 相似文献
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脂肪酶在有机溶剂中催化酯合成和酯交换反应 总被引:2,自引:0,他引:2
报道了猪胰脂肪酶在冻干时的pH值、有机溶剂的极性、反应系统的含水量、温度以及底物碳链的长度和支链对酶在有机相中催化活性的影响规律。利用该酶合成了具有玫瑰香味的月桂酸香茅酯和辛酸香茅酯。 相似文献
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首次探讨了皱摺假丝酵母脂肪酶CRL催化有机硅醇及其碳结构类似物与脂肪酸酯的转酯反应机理。结果表明,反应符合乒乓机制,底物中硅原子的存在并未改变脂肪酶催化转酯反应的机制。给出了CRL催化1-三甲基硅烷基乙醇及其碳结构类似物3,3-二甲基-2-丁醇与丁酸正戊酯间的转酯反应动力学方程。 相似文献
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应用紫外分光光度法和荧光光度法研究了3,5-二溴水杨醛缩牛磺酸席夫碱(DSTSB)在pH3.2的介质中,与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用(结合作用),考察了DSTSB对BSA构象的影响。讨论了DSTSB对BSA内源荧光的淬灭机理,测得猝灭常数Kq=2.1×1014L.mol-1.s-1,结合常数(KA=6.31×108L.mol-1)和结合点位数(n=1.1725)。依据Frester辐射能量转移理论确定了荧光给体-受体间距离(r=3.67nm)。 相似文献
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荧光光谱法研究间硝基苯胺与牛血清白蛋白的相互作用 总被引:1,自引:0,他引:1
应用荧光光谱法研究间硝基苯胺与牛血清白蛋白的相互作用。激发波长为280nm,发射波长为342nm,在pH 7.50的Tris-盐酸缓冲溶液中反应150min后,间硝基苯胺对牛血清白蛋白的猝灭效果最为明显。289K,304K和318K下的结合常数分别为1.667×104,1.428×104,1.250×104L·mol-1。根据分子间的相互作用力与相关热力学参数间的相互关系,结合间硝基苯胺与牛血清白蛋白相互作用的焓变(ΔH)0和熵变(ΔS)0,可推断两者的相互作用力主要为静电作用力。结果表明:间硝基苯胺对牛血清白蛋白的荧光猝灭方式为静态猝灭,最后用紫外吸收光谱法对其作用机理进行了确认。 相似文献
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荧光分光光度法直接测定盐酸异丙嗪片剂及注射液的含量 总被引:6,自引:0,他引:6
以0.0001mol/L盐酸的溶剂,303nm为激发波和nm为发射波和散荧光分光光度法直接测定盐酸异丙嗪片剂及注射液中盐酸异丙嗪的含量。盐酸异丙嗪在0.1~10.0μg/mL浓度范围呈良好线性。片剂及注射液的测定平均变异系数分别为0.31%和0.45%,回收率分别为99.9%和99.6%。 相似文献
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卡尔曼滤波法解析严重重叠的荧光峰 总被引:2,自引:2,他引:2
锌、铝同7-碘-8羟基喹啉-5-磺酸-溴化十六烷基三甲铵形成的络合物荧光光谱严重重叠,分离度仅为0.26。本文以该体系为例,着重考察了卡尔曼滤波法解析谱峰严重重叠体系的潜力。结果表明,在锌、铝络合物峰值处,当铝络合物的荧光强度小于锌络合物的荧光强度时,二者均可得到满意的分析结果,当铝络合物的荧光强度大于锌络合物的荧光强度时,锌的分析结果显著变差。在此情况下,用卡尔曼滤波法处理同步荧光光谱数据,分析 相似文献
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Giorgio Colombo Gianluca Ottolina Giacomo Carrea 《Monatshefte für Chemie / Chemical Monthly》2000,131(6):527-547
Summary. In this article we review how molecular modeling techniques can be used to shed some light on the influence of organic solvents
on the molecular characteristics of proteins and enzymes. Molecular dynamic simulations on bovine pancreas trypsin inhibitor,
chymotrypsin, and subtilisin make it possible to get a deeper understanding into how increased intramolecular interactions
improve conformational rigidity, thus explaining the lower reactivity and the higher thermostability of enzymes in non-aqueous
media. The application of thermodynamics-based models allows first qualitative predictions on the selectivity of many reaction
types; however, the application of quantum mechanical/molecular mechanical methods is required for the development of quantitative
models of actual reactivity patterns.
Received November 18, 1999. Accepted (revised) February 8, 2000 相似文献
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猪胰脂肪酶的固定化及其在有机相中催化丁酸甲酯和正丁醇的酯交换反应研究 总被引:1,自引:0,他引:1
考察了大孔苯乙烯-二乙烯苯交联共聚物的交联度、致孔剂量及胺化试剂对载体固定化猪胰脂肪酶的影响。选择出一种最佳载体对猪胰脂肪酶进行固定化,对比了自由酶和固定化酶在有机相中催化丁酸甲酯和正丁醇的酯交换反应。结果表明,酶经固定化后催化反应活力比自由酶提高近1倍。 相似文献
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Summary. The transesterification of chiral (−)-pinanediol methylboronic ester was studied with various structurally modified diols
by 1H NMR to understand the factors influencing the unusual stability of this boronic ester as well as to find ways of recovering
pinanediol from its methylboronic ester. In all the cases, reactions were allowed to proceed to equilibrium. The preliminary
experiments indeed have shown some encouraging results (displacement of pinanediol up to 40–53%). Amongst cyclopentane-based
cis-1,2-diols, endo-2-phenyl-exo,exo-2,3-norbornane-diol appeared to be the most effective diol in displacing pinanediol (38%). In the cases of pinane-based diols,
the best result was obtained with 2-ethyl-6,6-dimethylbicyclo[3.1.1]heptane-cis-2,3-diol (53%). It was interesting to observe that the transesterification with 2-phenyl-6,6-dimethylbicyclo[3.1.1]heptane-cis-2,3-diol resulted in a 50% conversion after 4 days only, whereas the former diol took 24 days to reach equilibrium. 相似文献