经砷诱导人肝细胞L02获得砷耐受性的研究

砷是自然界普遍存在的毒性较强的类金属元素。几乎所有生物在进化中都产生了对砷毒性的耐受性。生物体对砷的耐受机制受到广泛关注。本实验采用低剂量(4μmol／L)NaAsO2诱导人体正常肝细胞株LO2,利用噻唑兰检测法(MTT)计算细胞生存率及半数致死量反映细胞对砷耐受性的改变，结果发现低剂量砷诱导6周后，在48h急性砷中毒试验中，实验组LC50为23．0μmol／L，对照组为11．9μmo1／L，实验组明显高于对照组，说明细胞对急性砷中毒耐受性明显提高。     

几种硬骨鱼纲、鸟纲动物血红蛋白与人血红蛋白氯仿沉淀试验的比较研究

采用淀粉-琼脂糖混合凝胶电泳的方法分析了硬骨鱼纲动物(鲤鱼、鲫鱼、泥鳅)、鸟纲动物(家鸽、家鸡、家鸭)和人的血红蛋白在氯仿沉淀试验中的稳定性,发现在泥鳅和家鸭的血红蛋白组分中存在对氯仿不稳定的成分,而在鲤鱼、鲫鱼、家鸽、家鸡的血红蛋白中未发现这种不稳定性.人血红蛋白A和血红蛋白A2对氯仿处理也表现稳定.研究结果提示硬骨鱼纲动物、鸟纲动物及人的血红蛋白对氯仿沉淀试验有不同表现,可能存在血红蛋白稳定多态性现象.     

光谱学研究洛美沙星与牛血红蛋白的作用机理

在pH值为7.4和离子强度0.1 mol·L-1的模拟人体生理条件下,利用荧光猝灭光谱、同步荧光光谱和紫外光谱研究了洛美沙星与牛血红蛋白的结合作用.从温度对猝灭作用的影响、紫外可见吸收光谱的变化判断牛血红蛋白与洛美沙星的荧光猝灭机理为动态猝灭,计算了猝灭常数.根据得到的热力学参数确定相互作用力主要为疏水作用.依据无辐射能量转移机理求出荧光受体和给体间的距离,由同步荧光光谱技术探讨洛美沙星对牛血红蛋白构象的影响.     

糖化血红蛋白对糖尿病诊断与治疗监测作用的研究

目的探讨糖化血红蛋白(HbA1c)在糖尿病(DM)诊断和治疗监测中的作用.方法检测91例DM及并发症患者的空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2hPG)及HbA1c浓度并进行比较分析.结果 HbA1c频数分布P50对应的HbA1c浓度为5.94%.HbA1c与FPG的相关系数r1=0.489 98,与2hPG的相关系数r2=0.299 95,HbA1c和FPG,2hPG有良好的相关性.HbA1c浓度与DM并发症的相关性分析显示:HbA1c含量越高,DM并发症的发生率也越高.结论 HbA1c对DM诊断有较高的特异性,对预测DM并发症及调整治疗方案有重要意义.     

人脂肪来源的干细胞体外培养特性及分化为肝细胞样细胞的研究

肝脏组织工程的兴起和不断发展使各种急慢性肝病得到彻底的治愈成为可能.而肝脏组织工程的发展很大程度上受制于种子细胞的来源不足.为了寻找理想的肝脏组织工程种子细胞，本实验从吸脂术所得的脂肪抽吸液中分离出干细胞，利用流式细胞仪、染色体核型分析等方法对其生长特性、表面标志及生长的稳定性作了分析；用含有肝细胞生长因子（HGF）和成纤维细胞生长因子（FGF-4）的条件培养基将其向肝细胞样细胞诱导分化，并利用RT-PCR及免疫荧光的方法检测了分化后细胞的标志物CK18，甲胎蛋白（AFP）和白蛋白以及分化后细胞的功能.结果显示，脂肪来源的干细胞不仅有良好的生物学稳定性，而且分化后的细胞表达了肝细胞的标志物且具有一定的肝细胞的功能.这为解决肝脏组织工程种子细胞来源的问题提供了可能.     

三唑醇、三唑酮对人肝细胞的毒性研究

首先通过人肝细胞凋亡检测技术研究三唑醇与三唑酮对人肝细胞生长抑制率的影响,在得出其对人肝细胞的毒性大小和毒性规律后,结合量子化学参数推测它们对人肝细胞的致毒机理.目的是为今后农药残留对人体肝脏的影响研究提供量化参考,并为三唑类新型药物目标分子的设计、合成、研发及筛选提供依据.     

用离子选择性电极研究氟离子、溴离子和碘离子与牛血红蛋白的相互作用

阴离子在生物体内被传输和吸收的时候通常是以阴离子-蛋白质二元复合物形式存在的,因此探讨蛋白质对阴离子的束缚对于深入理解营养物质在生命体内的传输和吸收具有十分重要的意义.本文运用离子选择性电极,在温度为288.15 K,298.15 K和308.15 K时研究了F-,Br- 和I- 与牛血红蛋白(BHb)的相互作用,着重讨论了温度和卤素离子结构对相互作用的影响以及造成影响的原因.     

OA对人肝细胞HL-7702和肝癌细胞Bel-7402增殖的影响和对细胞凋亡的诱导作用研究

 以人肝细胞HL-7702和肝癌细胞Bel-7402为研究对象,通过MTT法、细胞外部形态观察、Annexin V.FITC&;PI双染法及TUNEL法等方法,研究了腹泻性贝毒的主要组分大田软海绵酸（Okadaic acid, OA）对其增殖的影响及对细胞凋亡的诱导作用。结果表明：OA对人两株细胞的增殖均有显著的抑制作用,24 h IC₅₀分别为65 ng/mL和60 ng/mL,且这种抑制作用呈剂量依赖性。OA导致两株细胞的形态均发生明显变化：细胞变圆,脱壁,细胞膜形成泡状突起,最终形成膜包裹的凋亡小体。Annexin V.FITC和PI双染法及TUNEL法检测均发现：OA能够诱导两株细胞发生不同程度的凋亡,且凋亡细胞的比例与OA的浓度相关。以上结果表明：OA能够通过抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡而对人肝细胞和肝癌细胞造成影响,且这种影响的程度与OA的浓度和作用时间密切相关。     

去氢胆酸肟类衍生物的设计、合成与体外抗乙肝病毒活性研究

为进一步研究新型抗乙肝病毒活性药物,根据活性片段拼接原理设计了一系列新型结构的去氢胆酸肟类衍生物,并预测其抗乙肝病毒活性。以去氢胆酸为原料经过酯化(或酰胺化)、肟化等反应合成8种新化合物和1种已知化合物,其中,肟类3种,肟醚类6种,均为E构型。以1H NMR、13C NMR和MS测定其结构,发现肟化反应均发生在去氢胆酸3位的羰基上。体外抗乙肝病毒活性测试结果表明部分目标产物对乙肝e型抗原HBe Ag的分泌具有抑制活性,其中,化合物2a和2c的活性较好,其半数抑制浓度IC50分别为170.36μmol/L和97.34μmol/L。初步分析化合物的构效关系,发现甲氧肟醚类化合物活性最好。研究结果为该类结构的新药的研究提供了理论依据。     

内江猪与伍隍猪类缘关系的血红素结合蛋白(Hp)、血红蛋白(Hb)多态性研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法对内江猪、伍隍猪及其对照荣昌猪、杜洛克猪的Hp血清型和Hb进行分型研究,检出了HP~1、HP~2、HP~3三个等位基因控制的6种基因型和4种变异型,根据基因频率计算出四种类群的标准遗传距离并按最短距离法聚类,伍隍猪与内江猪遗传距离最近为0.00203、伍隍猪与荣昌猪为0.00333,伍隍猪与杜洛克最远为0.00850。显示伍隍猪与内江猪有紧密的类缘关系。在HP基因型种类分布上,伍隍猪为4+4种,即存在1—1~F、1—3~F、1~F—3和3—3~F等四种基因型的变异型,而内江猪为5+1种,只有1—3一种变异型存在,揭示两者除同一性外存在一定差异性。卡方检验表明,伍隍猪基因型分布偏离Hardy—Weinberg平衡规律,HP~1—1纯合子频度偏低HP~1—2偏高是失衡的主因,对此进行了讨论,四类群猪Hb均无多态性。     

BDE-209对人正常肝L-02细胞生长和凋亡的影响

采用Cell Counting Kit-8 (CCK-8)和Hoechst 33342/PI等, 分析十溴联苯醚(BDE-209)对人正常肝L-02细胞增殖和凋亡的影响。结果显示, 在不同浓度水平(0~70 μg/mL)的BDE-209中暴露24小时后, 细胞增殖抑制率随着BDE-209浓度的升高而升高。经SPSS-Probit-Logit法计算, 得出 BDE-209对人正常肝L-02细胞24小时的IC₅₀为127.08 ±24.93 μg/mL。在不同浓度水平(0~15 μg/mL)的BDE-209中暴露24小时后, 与对照组相比, 各剂量组细胞未出现明显的细胞形态变化, 仅在15 μg/mL剂量组观察到细胞减少的现象。凋亡染色后, 荧光显微镜检发现, 随着BDE-209浓度升高, 亮蓝、淡粉染色细胞数量增大, 人正常肝L-02细胞的凋亡率增高。与对照组相比, 各剂量组差异均具有统计学意义。分析结果表明, BDE-209可引起人正常肝L-02细胞增殖受到抑制, 并诱导细胞凋亡率增加。     

正常妊娠妇女血中尿素氮、肌酐、血红蛋白和白细胞水平变化研究

目的:研究正常妊娠妇女血中尿素氮(Urea)、肌酐(Crea)、血红蛋白(HGB)和白细胞(WBC)水平的变化,并探讨这些指标变化的原因以及对妊娠妇女的意义。方法:利用ADVIA2400型全自动生化分析仪和ABX-PENTRA60血液分析仪检测145例正常妊娠妇女与125例非妊娠体检女性(对照组)血浆尿素氮(Urea)、肌酐(Crea)、血红蛋白(HGB)和白细胞(WBC)。结果:正常妊娠妇女血浆尿素氮(Urea)、肌酐(Crea)、血红蛋白(HGB)浓度均较对照组下降,而白细胞(WBC)较对照组升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:正常妊娠妇女血浆中尿素氮(Urea)、肌酐(Crea)、血红蛋白(HGB)和白细胞(WBC)不能按照正常参考范围来考虑,应该对检测结果的特殊性予以充分考虑并建立正常妊娠妇女的参考范围。     

加氢焦化汽油中正、异构烃的吸附分离及优化利用

采用5A分子筛吸附分离加氢焦化汽油中的正、异构烃。以正构烃为优质乙烯裂解原料,非正构烃为优质催化重整原料或高辛烷值汽油调和组分,考察了正构烃的吸附曲线。结果表明:与加氢焦化汽油相比,正构烃在相同的工艺条件下可使乙烯收率提高11%,吸余油的芳烃潜含量提高14%。模拟计算结果表明:吸余油的研究法辛烷值提高约30个单位,可作为高辛烷值汽油调和组分,该分子管理的工艺路线可显著提高加氢焦化汽油的利用效率。     

胎儿肝脏的形态学研究

187例河南地区胎儿肝重、体重被测量,并用光镜观察肝的组织发生。结果表明:肝重(y)与体重(x)有显著的正相关关系,相关系数为0.9861,回归方程 =-0.0367+0.0417x;肝重随胎龄(x)变化的回归方程 =1.772e~(0.4359x);15-20周肝细胞渐排列为细长的索;23周以前肝中造血细胞(HC)甚多,24周肝血窦中HC数量减少,故肝中HC量减少时的顺序是先血窦后窦周隙;35周时各处HC数量大大减少,这提示,肝造血功能于35周急骤下降。     

重组人促红细胞生成素对K562/A02多药耐药和K562药物敏感细胞增殖的影响

用ＭＴＴ法测定了重组人促红细胞生成素（ｒｈｕ－ＥＰＯ）对Ｋ５６２／Ａ０２多药耐药细胞系细胞和Ｋ５６２药物敏感细胞增殖的影响。研究发现,Ｋ５６２／Ａ０２与浓度为００７８、０１５６Ｕ／ｍＬ的促红素分别孵育时,其增殖活力比无ｒｈｕ－ＥＰＯ因子组低（Ｐ＜００１）;而Ｋ５６２与上述同样浓度的ｒｈｕ－ＥＰＯ孵育条件下,其增殖活力与无因子组比较差异无显著性意义（Ｐ＞０２０）。以上结果表明,ｒｈｕ－ＥＰＯ可能有抑制Ｋ５６２／Ａ０２细胞增殖的作用,而对Ｋ５６２细胞增殖无影响,提示ｒｈｕ－ＥＰＯ可能对多药耐药白血病的治疗有一些效果     

Study on the Intermediate in the o-Phenylenediamine Oxidative Reaction Using Hemoglobin as A Mimetic Peroxidase in Aqueous-Organic Two Phase

Hemoglobin was used as a mimetic enzyme for peroxidase to catalyze the oxidative reaction ofo-phenylenediamine with H2O2 which functioned as an oxidant. The relationship between physicochemicalproperties of the intermediate and enzymatic activity of hemoglobin was studied. Since the solubility of theintermediate in the reaction is higher in butanol phase than in water phase, the intermediate itself diffusedfrom the aqueous phase to the butanol phase. The experimental results showed that the rate of product andthe stability of intermediate were associated with the temperature and the pH value of the buffer. The for-mation rate of intermediate and half-life period reveal the maximal in pH7, nevertheless, the whole rate ofthe catalytic reaction is the greatest in pH5, which the ratio of the initial rate in final product formationcompared to that intermediate formation is the greatest.     

人胎儿皮肤肥大细胞发育的定量研究

本文应用体视学方法，对海口地区３５例不同胎龄的人工引产胎儿及死胎皮肤标本进行肥大细胞定量研究，结果显示胎儿真皮中肥大细胞的体密度（Ｖｖ）和数密度（Ｎｖ）随着胎儿的发育而增加，体密度的变化较数密度变化明显．     

戊二醛交联固定血红蛋白对水中NO2-吸附性能的研究

报道了戊二醛交联法固定血红蛋白(hemoglobin,Hb)吸附水中NO2-的方法,并考察了浓度、温度、pH值、吸附时间及干扰离子对其吸附率的影响,确定了吸附的最佳条件:3 mg/LHCl活化处理2h,温度25℃,pH 6.5,吸附时间5h,此时吸附率达90%以上.用抗坏血酸作洗脱剂,经洗脱处理后可使固定化血红蛋白反复使用十次左右仍可使吸附率保持在90%以上.在动态吸附实验中,我们以0.5mL/min的流速分别将四种废水过柱处理,均有较好的效果,尤其是被NO2-污染了的饮用水.血红蛋白和洗脱剂抗坏血酸均对     

IL-24联合大蒜素体外抗肺癌细胞生长的实验研究

目的探讨抑癌基因IL-24联合大蒜素对肺癌A549细胞凋亡的影响,并初步探讨其作用机制.方法提取前期构建的p DC316-h IL-24-EGFP质粒,转染肺癌A549细胞,分为A组(空白对照组)、B组(单独大蒜素组(40μL/m L))、C组(脂质体+IL-24组)、D组(大蒜素(40μL/m L)+脂质体+IL-24).荧光显微镜下观察质粒的转染情况;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot法检测p DC316-h IL-24-EGFP、大蒜素和联合用药作用A5 4 9细胞4 8 h后IL-24,Bax,Bcl-2和Caspase-3蛋白表达水平.结果大蒜素(40μL/m L)和p DC316-h IL-24-EGFP单用48 h对A549细胞均有明显抑制作用;大蒜素(40μL/m L)联合p DC3 1 6-h IL-24-EGFP比单用p DC3 1 6-h IL-24-EGFP作用更强(P0.05);大蒜素(40μL/m L)、p DC316-h IL-24-EGFP和两药联用48 h后,A549细胞凋亡率分别为32.7%,39.4%和68.8%;大蒜素(40μL/m L)和/或IL-24作用于A549细胞48 h后,Bax/Bcl-2的比值及Caspase-3表达均上调,联合用药组效果尤其明显.结论p DC316-h IL-24-EGFP联合大蒜素可协同抑制人肺癌A549细胞生长,机制可能是通过调节基因Bax/Bcl-2的表达比率,并上调Caspase-3的表达,进而诱导A549细胞的凋亡.     

强力霉素对人非小细胞肺癌A549细胞的增殖抑制及促凋亡作用

为研究强力霉素体外对人非小细胞肺癌A549细胞的增殖及凋亡的影响。应用MTT比色法研究不同浓度强力霉素(2.5,5,10,20,50mg/L)对A549细胞增殖的影响。荧光显微镜、琼脂糖凝胶电泳、AnnexinV-PI双标法等多项方法,研究强力霉素对A549细胞的促凋亡作用;采用免疫组化的方法,观察药物作用后bcl-2和bax的表达。强力霉素作用后,A549细胞的吸光度值降低,并出现凋亡特有的细胞核改变DNA梯状条带,早期凋亡的细胞数增加,伴有bcl-2的下调,bax上调。这表明强力霉素可抑制人非小细胞肺癌A549细胞的生长,并诱导细胞发生凋亡,其诱导凋亡的作用可能与其调节bcl-2/bax的表达有关。