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利用壳寡糖(COS)对纯化后的云芝漆酶(EC1.10.3.2)进行化学修饰以改善其活性和稳定性.最优化学修饰条件:温度5℃,pH=4.0,100mgNaIO4,20mgCOS.在此条件下得到的修饰酶(COS-TvL)的活性(456.00U/mg)为天然酶(TvL)活性(314.39U/mg)的145.04%.十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)结果表明,TvL的3条肽链相对分子质量为58100,45200和21600,而COS-TvL的3条肽链相对分子质量为62900,53300和39700,说明酶分子修饰成功,氨基修饰率为30.7%.TvL的最适pH值在4.0附近,而COS-TvL的最适pH值在3.5~4.0之间.TvL的最适温度为40℃,而COS-TvL的最适温度为45℃.动力学研究结果显示,TvL的Km=9.929mmol/L,vmax=714.29mmol/(mg·min);而COS-TvL的Km=8.989mmol/L,vmax=1250mmol/(mg·min).通过红外光谱、紫外吸收光谱、紫外差示光谱和荧光发射光谱对TvL和COS-TvL进行了结构表征. 相似文献
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黑曲霉木聚糖酶同工酶的性质及圆二色谱分析 总被引:1,自引:0,他引:1
对黑曲霉木聚糖酶同工酶的酶学性质及圆二色谱(CD)进行了研究.结果表明,黑曲霉木聚糖酶粗酶液经离心、超滤及SephadexG-75凝胶层析后,分离得到了两个黑曲霉木聚糖酶同工酶组分XⅠ,XⅡ,其最适反应温度均为45℃~55℃,最佳反应pH值均为4 8~5 5,SDS-PAGE法测得XⅠ,XⅡ的相对分子质量分别为2.2×104和4.0×104.XⅠ与XⅡ的CD光谱表明,XⅠ,XⅡ分别在218和215nm处有最大负峰,说明β-折叠结构是组分XⅠ,XⅡ具有木聚糖酶活性的主要结构,也是它们发挥催化功能的结构基础. 相似文献
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电聚吡咯固定化酷氨酸酶电极的制备及性能 总被引:2,自引:0,他引:2
在应用恒电位法电化学聚合吡咯的同时 ,将酪氨酸酶固定在导电聚吡咯膜内 ,制成一种灵敏、稳定的酪氨酸电极 .讨论了溶液 pH值和聚合电位对酶固定化的影响 ,对酶分子嵌入吡咯膜前后的SEM图和CV曲线进行了分析、比较 .该电极对甲苯酚响应的线性范围为 5 .0× 10 -8~ 1.0× 10 -6mol/L ,最适 pH值为 6 .6 ,酶反应表观上遵循Michaelis_Menten动力学 ,表观米氏常数为 2 .2× 10 -5mol/L . 相似文献
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流动注射化学发光法测定水样中的痕量亚硝酸根 总被引:11,自引:0,他引:11
亚硝酸根对鲁米诺溴酸钾体系的化学发光具有显著增强作用。据此,结合流动注射技术,建立了一种简单、快速测定NO-2的新方法。方法的线性范围为4.0×10-12~4.0×10-9g/L;检出限为2.0×10-12g/L(3σ);分别对1.0×10-11g/L和4.0×10-10g/L的NO-2进行了平行测定(n=11),其相对标准偏差分别为1.3%与1.5%。用于实验室自来水、饮用纯净水以及雨水中的NO-2的测定,回收率为94%~105%,取得了满意的结果。 相似文献
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反相流动注射化学发光法测定单宁 总被引:8,自引:0,他引:8
在碱性介质中 ,单宁对高碘酸钾氧化鲁米诺的化学发光反应有较强的增敏作用 ,据此建立了反相流动注射化学发光测定单宁的新方法 ,并研究了最佳反应条件。该方法快速、准确、线性范围宽 ,测定单宁的检出限为 1 .1 2× 1 0 - 9g/ m L,方法的线性范围为 2 .0× 1 0 - 8~ 6 .0× 1 0 - 6 g/ m L,对于 4.0× 1 0 - 6 g/ m L单宁 1 0次测定的相对标准偏差为 0 .79%。应用于中药五倍子、诃子中单宁的测定 ,结果满意 相似文献
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乙基罗凡明B指示反应动力学光度法测定痕量铱 总被引:4,自引:0,他引:4
提出了动力学光度法测定铱。在磷酸 -氯化钠介质中 ,Ir( )催化高碘酸钾氧化乙基罗丹明 B( ERB)形成褪色化合物 ,适宜条件为 c Na Cl=0 .0 2 mol/ L ,c H3PO4 =0 .1 0 mol/ L ,c KIO4 =2 .0× 1 0 - 3mol/ L ,c ERB=1 .7× 1 0 - 5mol/ L ,I=0 .0 2 ,90℃。铱浓度在 0 .4~ 32μg/L范围校正曲线成直线 ,检出限为 4.0× 1 0 - 10 g/ m L,对 2 0 μg/ L铱测定 1 1次的 RSD为1 .55% ,体系至少稳定 8h。考察了 30多种共存离子的影响。本法满意地用于某些冶金产品和矿石中铱的测定。铱催化反应对 Ir( )、ERB、KIO4 和 H3PO4 均为一级反应 ,表观活化能为 75.82 k J/ mol,探讨了反应机理 相似文献
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NaIO4-H2O2-盐酸异丙肾上腺素-Cu2+体系化学发光测定盐酸异丙肾上腺素 总被引:1,自引:0,他引:1
在磷酸介质中,过氧化氢存在下,加入少量Cu2+的盐酸异丙肾上腺素试液经80℃水浴加热处理后与高碘酸钠反应产生强烈的化学发光.据此,结合流动注射技术建立了一种测定盐酸异丙肾上腺素的化学发光分析新方法.方法的线性范围为1.0×10-9~7.0×10-7 g/mL,检出限为4.0×10-10g/mL,相对标准偏差为3.0%(1.0×10-8g/mL盐酸异丙肾上腺素,n=11).该法用于注射液中盐酸异丙肾上腺素的测定,回收率为97%~103%. 相似文献
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滂胺天蓝-氨基糖苷类抗生素的显色反应及其分析应用 总被引:6,自引:1,他引:6
在 pH2.0~7.0的条件下 ,滂胺天蓝(PSB)与硫酸卡那霉素(KANA)、硫酸庆大霉素(GEN)和硫酸新霉素(NEO)等氨基糖苷类抗生素反应生成蓝色离子缔合物 ,最大显色波长位于686~690nm ,线性范围分别为0~14.0、0~12.5、0~14.0mg/L ,摩尔吸光系数(ε)分别为1.53×104、1.12×104、1.47×104L/(mol·cm) ;最大褪色波长位于620~622nm ,线性范围分别为0~14.0、0~12.0、0~14.0mg/L ,摩尔吸光系数(ε)分别为1.41×104、1.43×104、2.42×104L/(mol·cm) ;当用双波长叠加法测定时 ,ε值分别为2.94×104、2.55×104、3.89×104L/(mol·cm) ;探讨了适宜的反应条件 ;该法用于市售药物中氨基糖苷类抗生素含量的测定 ,结果令人满意 相似文献
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壳聚糖-精氨酸树脂固定化胰凝乳蛋白酶及其性质 总被引:1,自引:0,他引:1
以具柔性亲水手臂的壳聚糖-精氨酸树脂为载体,用戊二醛交联胰凝乳蛋白酶,获得壳聚糖-精氨酸树脂固定化胰凝乳蛋白酶. 最佳固定化条件为:m(酶)∶ m(载体)=20∶ 1 000、戊二醛体积分数为1.0%、pH=5.20、30 ℃交联60 min. 固定化酶活力达850 U/g,Km为1.83 mmol/L,比游离酶增大33.6%,比交联壳聚糖固定化酶低24.0%. 壳聚糖-精氨酸树脂固定化胰凝乳蛋白酶水解时间进程曲线与游离酶基本一致,均在反应30 min达到最大速率,最适温度为70 ℃,比游离酶升高10 ℃;在75 ℃时的半衰期可达6.0 h,比游离酶提高约4.3倍;最适pH值为5.92,比游离酶向酸性偏移2pH单位. 4 ℃贮存半衰期为49 d. 相似文献
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无机偶合流动注射化学发光测定钛的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
基于钛(Ⅲ)对铬(Ⅵ)氧化I-产生I2的诱导作用,和I2氧化鲁米诺产生化学发光的反应,建立了无机偶合反应流动注射化学发光测定痕量钛的新方法。方法线性范围为1×10-9~1×10-5g/mL,RSD=3.0%(n=11,ρ=1×10-7g/mL),检出限为4.0×10-10g/mL。方法用于人发样品中钛的测定。 相似文献
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基于在3.2×10-2 mol/LNH3·H2O -NH4Cl(pH9.5) -1.4×10-2 mol/LK2S2O8 支持电解质中 ,磷酸氯喹于 -1.62V(vs.SCE)产生的极谱催化波 ,拟订了测定磷酸氯喹的新方法 ;其二阶导数峰峰电流与磷酸氯喹浓度在1.0×10 -9~1.0×10 -5mol/L范围内呈线性关系 (r=0.9988 ,n=9) ,检出限为4.0×10 -10mol/L;本方法灵敏、简便、快速 ,回收率在95 %~104 %之间 ;对片剂中磷酸氯喹的测定结果与标示值相符良好。 相似文献
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采用UV-Vis光谱法研究了茜素红S(ARS)与5'-鸟苷酸(5'-GMP)在pH 4.80的弱酸性缓冲溶液中生成络合物的结合反应.与试剂比较,络合物的最大吸收峰红移92 nm,测得络合物和表观摩尔吸光系数为ε=1.3×104 L·mol-1·cm-1;最大结合数n=10;浓度线性范围0.2~16 mg/L;检出限为6.1×10-8 mol/L.研究了ARS与5'-GMP是分子间作用力的结合反应,并对时间、温度、离子强度对结合反应的影响,以及无机物、生物物质对反应体系的干扰情况进行了初步研究. 相似文献
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测定了水溶液中硫氰酸钨(Ⅴ)络合物的吸收光谱,最大吸收波长为405 nm.在盐酸浓度为3.56 mol/L、离子强度为0.088 mol/L的溶液中,硫氰酸钾溶液浓度在0.018~0.088 mol/L范围内,与硫氰酸钨(Ⅴ)络合物的平均摩尔吸光系数△-ε呈函数关系.测得络合物的络合比为14.计算出络合物的各级累积稳定常数和摩尔吸光系数分别为β1=40.73,β2=1.10×103,β3=2.40×104,β4=4.16×105,Δε1=9.33×103,Δε2=9.64×103,Δε3=9.93×103,Δε4=1.10×104(t=17.7℃). 相似文献
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