白杨素与人免疫球蛋白结合作用的光谱行为

在模拟人体生理条件下,采用荧光光谱和紫外-可见吸收光谱法研究了在不同温度下,白杨素与人免疫球蛋白结合反应的光谱行为。结果表明,白杨素与人免疫球蛋白的相互作用为静态猝灭过程,求出了不同温度下的猝灭常数。根据Frster的非辐射能量转移理论,计算出白杨素在蛋白质中的结合     

基于多光谱技术和计算机模拟研究牡荆素抑制α-淀粉酶的分子机制

本文采用多种光谱学方法结合计算机模拟手段,通过研究牡荆素对α-淀粉酶的抑制作用、相互作用的结合特性和空间结合构象及其诱导酶分子结构的变化对酶催化底物的影响,进而阐释牡荆素抑制α-淀粉酶的分子机制。结果表明,牡荆素以可逆性竞争的方式抑制α-淀粉酶的活性,其半抑制浓度(IC50值)为2.25×10-3 mol·L-1,抑制常数为(2.28±0.13)×10-3mol·L-1。牡荆素也能够与淀粉结合来减少淀粉的消化分解为葡萄糖。牡荆素通过单一静态方式猝灭α-淀粉酶的内源荧光,其中荧光基团Trp残基的贡献大于Tyr残基。牡荆素结合在α-淀粉酶的一个位点处,结合常数Ka为103数量级,主要依靠疏水力驱动,两者结合作用使α-淀粉酶的α-螺旋含量降低,β-折叠和β-转角含量增加,表面疏水性减小,酶结构趋于松散。分子模拟显示,牡荆素能够对接于α-淀粉酶的活性空腔,并与周围的氨基酸残基Asp197、Glu233、Ile235、His299、Asp300与His305等发生相互作用。推测牡荆素通过与α-淀粉酶结合,改变了酶分子的构象,并且与底物竞争α-淀粉酶的活性位点,而阻碍了底物被酶分解,进而抑制了α-淀粉酶的活性。     

磷脂酰肌醇3-激酶与其抑制剂芹菜素的分子对接

采用AutoDock3.05分子对接软件包,以磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)的晶体结构和芹菜素的空间结构为基础,对PI3K和芹菜素的相互作用机制进行了分子对接研究,为芹菜素的抗肿瘤机制提供理论依据.芹菜素是PI3K的有效抑制剂,分子对接结果表明,芹菜素与PI3K发生了强烈的结合作用,结合自由能达到-33.1 kJ·mol-1;结合位点位于该酶底物ATP的结合位点上,与底物形成竞争性结合,从而导致PI3K的酶活性受到抑制;在结合中,疏水力、氢键和静电作用力对芹菜素和PI3K复合物的形成与稳定发挥了重要作用.     

硫硒化镉纳米颗粒对胰高血糖素聚集的影响

利用原子力显微镜、傅里叶变换红外光谱仪和荧光光度计等研究了硫硒化镉纳米颗粒对胰高血糖素聚集的影响, 包括聚集形成纤维数量的多少、纤维的生长速度等. 结果表明: 硫硒化镉纳米颗粒能够抑制胰高血糖素多肽的聚集, 并且随着颗粒浓度的增加, 其抑制胰高血糖素维化的程度也明显加剧. 另外, 还对纳米颗粒抑制胰高血糖素聚集的机理进行了初步讨论.     

内皮细胞生长抑制素 --抗肿瘤血管生成的细胞因子

综述了内皮细胞生长抑制素的结构和功能;探讨了其与胶原蛋白Ⅹ　Ⅷ的关系以及抗血管生成、抗肿瘤生长和转移的可能机理;展望了其在肿瘤诊断、治疗等方面的应用前景.内皮细胞生长抑制素是胶原蛋白Ⅹ　ⅧC-末端的酶解产物,在血管生成过程中起负调控作用,通过阻断血管生成的信号并诱导内皮细胞的凋亡而特异性地抑制内皮细胞的迁移和新血管的生成,从而抑制肿瘤的生长和转移.其抗血管生成的机制目前尚未完全清楚,研究显示它是一个结合紧密的球状折叠分子,一面富含精氨酸残基,是肝素的结合位点,推测与抗血管生成的机制有关.内皮细胞生长抑制素作为抗肿瘤的内源性药物,具有高效性,低毒性,无耐药性等优点.     

碳源、氮源、金属离子和维生素对虫生真菌粉虱座壳孢孢子萌发、菌丝生长和产孢的影响

研究了12种碳源、10种氮源、6种金属离子和6种维生素对粉虱座壳孢的孢子萌发率、菌丝生长和产孢量的影响.D-木糖、D-果糖、D-半乳糖对孢子萌发有极显着的抑制作用.最有利于菌丝生长的碳源为可溶性淀粉,其次为蔗糖、甘露醇和山梨醇.碳源极显着地抑制产孢,其中肌醇的抑制能力最强.酵母浸粉、胰蛋白胨、干酪素、蛋白胨和牛肉浸膏最能促进孢子萌发,可是硝酸钠、尿素和酵母浸膏明显抑制孢子萌发.胰蛋白胨、干酪素和牛肉浸膏最有利于菌丝生长.所有氮源均有利于增加产孢量,其中酵母浸粉、胰蛋白胨和酵母浸膏为最好的产孢氮源,而硫酸铵的作用最小.Zn2+能显著地促进孢子萌发,而Cu2+强烈地抑制菌丝生长.除了Fe2+极显着地促进产孢外,其它金属离子对产孢均表现出抑制作用.VB1、VB5、VC和VB6均促进萌发,其中VB5效果显著.这些维生素对菌丝生长均无显著影响,但极显着地抑制产孢,其中VB6的抑制效果最明显.     

欧前胡素对酪氨酸酶的抑制作用及机制

采用紫外、荧光和圆二色光谱法并结合分子模拟技术研究了欧前胡素对酪氨酸酶的抑制作用及其机制。结果表明,欧前胡素是一种可逆的混合型抑制剂,半数抑制浓度(IC50)为7.90×10-5 mol·L-1。欧前胡素通过静态型方式猝灭酪氨酸酶的内源性荧光,两者有一个结合位点。25℃时结合常数为2.90×103 L·mol-1,疏水作用力是驱动两者结合的主要作用力。同步荧光和圆二色谱分析表明,欧前胡素对酪氨酸酶中酪氨酸和色氨酸残基周围的微环境几乎不产生影响,但导致酪氨酸酶二级结构变得松散。分子模拟显示,欧前胡素占据酪氨酸酶的活性中心位点,并与His244,Val283,Val286,His263等氨基酸残基相互作用,阻碍了底物结合到酶的活性中心,从而降低酪氨酸酶的催化活性。     

光谱法研究刺芒柄花素与牛血清白蛋白的相互作用

在生理pH7.4条件下,应用光谱法研究药物小分子刺芒柄花素与牛血清白蛋白相互作用机理。通过荧光法和紫外吸收光谱法确定了刺芒柄花素对牛血清白蛋白的荧光猝灭机制。采用Stern-Volmer方程求出相互作用的猝灭常数,双对数方程求出结合常数Ka和结合位点数n,进而利用热力学公式判别作用力类型。结果表明:刺芒柄花素与牛血清白蛋白的相互作用的荧光猝灭属于静态方式,298 K时结合常数Ka为1.39×106L.mol-1,结合位点数为1,而主要作用力类型是静电作用。用紫外与同步荧光光谱法研究了刺芒柄花素对BSA构象的影响。     

P-选择素亲和含糖聚合物的合成及其抗黏附性能

岩藻糖和N-乙酰神经氨酸甲酯经乙酰化反应后,用叠氮基取代其1号位的基团,再与丙烯酰胺丙炔经Click反应合成了两种带有不饱和乙烯双键、可聚合的乙酰化含糖单体。这两种单体通过可逆加成-断裂链转移聚合法共聚合后,再脱乙酰化,制备了一种模拟P-选择素糖蛋白配体1(PSGL-1)结构的新型含糖聚合物GP-SF。采用磁共振技术对以上含糖单体及含糖聚合物GP-SF进行表征,通过黏附实验对GP-SF与P-选择素的结合能力进行测试,并考察了GP-SF在体外对B16细胞-血小板黏附的抑制能力和对COS 7细胞的细胞毒性。实验结果表明,该含糖聚合物能够通过竞争性结合P-选择素,抑制P-选择素与B16细胞的黏附,黏附抑制率达到62.7%,且具有良好的生物安全性。     

解脂耶氏酵母W29产脂肪酶最佳条件

优化了解脂耶氏酵母W29的产酶条件,了解了解脂耶氏酵母W29的产酶能力。研究结果表明,该菌株产脂肪酶的最佳条件为:发酵温度30℃、起始pH 7.0、摇床转速150r.min-1、橄榄油含量7.0g.L-1、接种量2.5%、培养时间60h。在该条件下,解脂耶氏酵母W29所产脂肪酶的活性为7.7μ.mL-1。结果提示,解脂耶氏酵母W29在处理油脂废水时能产生较高活性的脂肪酶,可进一步实现废水处理的资源化利用。     

在有机介质中固定化脂肪酶反应特性及其动力学研究

采用酶工程固定化技术,研究了固定化脂肪酶在生物反应器的有机介质中的反应特性及其催化动力学,探讨了脂肪酶水解植物油脂制备脂肪酸反应中的最适固定化载体、底物和反应条件.结果表明最适酶为酵母脂肪酶;最适固定化脂肪酶载体为硅藻土Celite545;最适底物为樟核油和棕榈油;最适反应条件是500 r/min,pH6.5,35℃,底物浓度60%.动力学研究结果表明Km2.35×10-2mol/L,Vm=0.75mol/L.min.     

靶向二肽基肽酶维药体外筛选模型的建立及应用

二肽基肽酶IV（dipeptidyl peptidaseIV,DPPIV）是治疗Ⅱ型糖尿病的新靶点,糖依赖性胰岛素释放肽和肠促胰岛素胰高血糖素样肽-1在体内有促进胰岛β细胞分泌胰岛素,胰岛素的生物合成,β细胞的生长并抑制其凋亡和抑制血糖升高等功能．二肽基肽酶Ⅳ可快速降解糖依赖性胰岛素释放肽和肠促胰岛素胰高血糖素样肽-1,使其失去生物活性．本实验利用Caco-2细胞中所得到的二肽基肽酶IV,优化酶活筛选体系．确定了二肽基肽酶Ⅳ最适底物Gly-Pro-pNA浓度为0.064 mg/mL、反应温度37℃、反应时间30 min和竞争性抑制剂Ile-Pro-Ile浓度0.68 mmol/L,从而建立了靶向二肽基肽酶Ⅳ的快速筛选体系．应用该模型,对18种维药提取物进行了筛选．本研究结果将为维药的进一步开发和利用提供了理论依据.     

白杨素锰配合物消除超氧基阴离子自由基的理论

采用量子化学中的DFT法,在uB3LYP水平上,添加溶剂化效应用高斯09程序包优化了O2˙-,白杨素（Chrysin）,及2Chrysin-Mn2+,2Chrysin-Mn3+与超氧基自由基阴离子相互作用后的2Chrysin-Mn2+-O2˙-,2Chrysin-Mn3+-O2˙-的几何构型,并在同样的计算水平上计算和分析了频率和NBO电荷,得到相应的优化后的几何优化参数,电荷变化,能量,电子密度等。得出白杨素锰配合物与超氧基自由基阴离子有较强的相互作用;配合物几何构型趋于保持原有的平面结构,但自由基构型的发生了变化,配合物对自由基阴离子有很好的消除作用;而从能量上看2Chrysin-Mn3+分子比2Chrysin-Mn2+分子有更好的消除作用。     

萤光素-Dy(Ⅲ)配合物与鲱鱼精DNA的作用方式

研究了Tris-HCl(pH7.40)缓冲溶液中萤光素(F)与稀土金属离子Dy(Ⅲ)形成的配合物Dy(Ⅲ)(F)3与鲱鱼精DNA的相互作用机制,实验测得Dy(Ⅲ)(F)3与鲱鱼精DNA的结合比为5:1,表观摩尔吸光系数ε=1.14×105L·mol-1·cm-1,Dy(Ⅲ)(F)3与鲱鱼精DNA的结合常数K14℃=1.78×104L·mol-1,14℃时ΔrHm=1.03×104J·mol-1,ΔrSm=1.17×102J·mol-1·K-1,ΔrGm=-2.34×104J·mol-1.Dy(Ⅲ)(F)3与鲱鱼精DNA主要以部分嵌插和沟渠结合方式发生作用,作用过程为熵驱动.     

瑞香素与β-乳球蛋白的结合特性及其对β-乳球蛋白结构的影响

本实验模拟人体生理酸度(pH 7.4),采用荧光光谱法、圆二色光谱法和分子模拟技术,研究了瑞香素与β-乳球蛋白(β-LG)的结合特性及瑞香素对BLG结构的影响。结果表明,瑞香素对β-LG内源荧光有较强的猝灭能力,荧光猝灭机制属于形成复合物的单一静态猝灭。β-LG与瑞香素的结合位点数为1,结合常数为104 L·mol-1数量级。计算得到的热力学参数熵变和焓变均为正值,表明疏水作用是驱动瑞香素-β-LG复合物形成的主要作用力。分子模拟结果显示,瑞香素插入β-LG疏水空腔,与Ala80,Glu55,Leu54,Leu93,Lys75,Ile78,Pro79,Phe82,Thr76等氨基酸残基发生相互作用。同步荧光光谱和圆二色光谱结果显示,瑞香素与β-LG结合导致β-LG色氨酸残基周围微环境的疏水性降低,α-helix和β-折叠含量增加,β-转角与无规卷曲含量降低,β-LG的结构变得更加紧密。     

米曲霉(Aspergillus oryzae)黄酒小曲4转化体系的构建及脂肪酶的异源表达

以米曲霉(Aspergillus oryzae)H4为研究对象,初步探究了其对潮霉素的敏感度及原生质体的制备时间。在0.1 mmol·L~(-1)氯丙嗪和150μg·mL~(-1)潮霉素B共同存在的条件下,H4的生长被完全抑制;在酶解时间为3.5 h时,H4的原生质体有最佳的再生率33%。成功构建了重组表达载体pUC18-hygB-LIP并转化至米曲霉H4中。在液态发酵条件下,脂肪酶活力最高的转化子的酶活力比出发菌株H4高10.16 U·mL~(-1)。     

关于具有σ-结构的环(Ⅰ)

<正> §1引言在[1]中首先引进了结合环的σ—结构,并得到相应的理想论中有关结果。本文改进其中σ—素理想和σ—准素理想的概念,将其结果更一般化。在本文中,总假设R表示结合环。     

多聚螯合物酶联抗体交联磁性纳米乳胶的脂联素免疫透射比浊方法研究

采用多聚螯合物酶联抗体交联磁性纳米乳胶的脂联素免疫透射比浊法检测了血清中脂联素. 发现多聚螯合物酶上含有大量HRP酶, 可以极大地放大检测信号; 在优化条件下, 免疫比浊信号强度在脂联素0.005~0.2ng?mL-1范围内变化时, 并随着ADPN浓度的增加呈线性关系(R2=0.998), 检出限为2 pg?mL-1. 该方法能成功用于血清样本中脂联素的检测.     

黑曲霉脂肪酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

根据黑曲霉F044脂肪酶N-端氨基酸序列，运用生物信息学方法，找到与黑曲霉脂肪酶基因同源的候选基因A84689．根据该基因序列，设计引物直接经RT—PCR扩增得到黑曲霉脂肪酶全长基因anl．anl全长1044bp，含3个内含子，编码297个氨基酸（含信号肽27个氨基酸），与其他脂肪酶基因没有明显的同源性．将成熟脂肪酶基因连接到pPIC9K载体上得到重组表达质粒，转化P．pastoris GSll5．脂肪酶基因在P．pastoris GSll5中实现了分泌性表达．     

恩诺沙星与脱氧核糖核酸的相互作用

采用紫外光谱和荧光光谱法,在生理条件下(pH=7.4)对恩诺沙星(ENR)与小牛胸腺脱氧核糖核酸(ct-DNA)的作用方式进行了研究。证实了恩诺沙星通过嵌插方式和静电结合方式与DNA发生相互作用。实验表明,DNA能猝灭恩诺沙星的内源性荧光,DNA与恩诺沙星的相互作用为静态猝灭过程,其结合常数为2.73×105L.mol-1,结合位点数为1.12。