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高效离子交换色谱法分离和纯化蛋白质时,蛋白质在色谱柱上的不可逆吸附使柱效降低,柱压升高。本文使用2%的胰蛋白酶溶液在37℃下处理TSKgelCM-5PW和TSKgelDEAE-5PW(7×7.5mmI.D.)离子交换色谱柱24h后,柱压显著降低,柱效提高4~13倍,交换容量也得到恢复。离子交换色谱柱的恢复程度和交换容量与处理液的用量有关。 相似文献
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计算机辅助柱色谱最优化分离氨基酸王琴孙,颜炳文,王寿亭,陶雪(南开大学元素有机化学研究所,天津,300071)(南开大学高分子化学研究所)关键词计算机,色谱最优化,柱色谱微型计算机的发展推动了整个色谱优化领域的发展,也陆续出现了一些优化分离方法[1~... 相似文献
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本文从理论上推导出程序柱柱效及分离度的函数关系式,并将程序柱与常规柱进行比较,理论计算和实验结果都表明正切程序柱是一种较理想的程序柱。 相似文献
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采用MEMS技术设计了一种多道微型气相色谱柱,运用深槽刻蚀技术(DRIE),对器件刻蚀深400μm,微型色谱柱总长度为50cm,每道宽40μm,4道多道柱。采用静态涂覆法对色谱柱涂覆SE-54固定相。将多道色谱柱与30 m长的安捷伦HP-5毛细管柱多道色谱柱比较,烷烃混合物在两种柱内都被完全分离,混合物在多道柱内的保留时间比在毛细管柱内缩短了两倍,塔板数达到15342 plates/m,是毛细管柱的3倍。多道色谱柱被用于分离苯,甲苯及苯酚致癌组分,所有组分在1 min之内被完全分离。在时间上比之前报道的6 m长微型色谱柱缩短了3倍,实现了快速分离效果。 相似文献
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电色谱中中性溶质柱内富集研究 总被引:2,自引:0,他引:2
中性溶质在毛细管电色谱中的富集可以通过调节有机调节剂在运行缓冲溶液和进样区段中的浓度及适当增加进样长度业实现,富集作用主要由两种过程控制,即进样过程中的自富集作用和运行过程中的一般输运富集作用,采用弛豫理论的研究方法得到了描述富集效果与操作条件关系的理论表达式,结果表明:随进样长度的增加,可以有效提高富集效果;进样长度对柱效的影响也与有机调节剂的浓度有关,当其在两区段中的浓度差别较大时,适当加长进样时间并不会对柱效产生太大的影响,对安息香和美芬妥因两种药物的实验研究达到了超过100倍的富集效果。 相似文献
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混合物的分离是分析测试中的常用技术 ,柱层析是常用的分离方法之一。而传统的色谱柱由于对样品的受纳容量较小和分离速度较慢 ,无法满足某些研究的需要。本法采用并改进了一种分离快速、使用方便、易于制作的VLC柱 ,为含磷化合物的复杂反应产物的研究提供了有效工具。VLC柱全称为VacuumLiquidChromato graphy ,即真空液相色谱。这是一种制备色谱 ,其流体由于柱下端产生负压而流出。该柱的使用最早于1977年由Coll报道[1,2 ] 。Coll及其合作者采用这种柱子顺利地进行了一些天然产物的分离 ,但关于柱… 相似文献
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在微流控芯片分析中,由于微流通道微小的尺寸和检测器灵敏度的限制,容易出现诸如样品相对过载等引起溶质带偏离高斯分布(如前拖尾或者后拖尾等)的现象.引起溶质带峰形不对称的原因主要是由于吸附等温线[1]和溶质带经过检测器时,由空间分布转化为时间分布所引起的扭曲所致[2]. 相似文献
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P350微孔快速色谱柱分离富集铀的性能研究 总被引:10,自引:0,他引:10
以铀为例研究了P350萃淋树脂微孔色谱柱的性能。结果表明,柱径和树脂粒度是影响柱效的主要因素,当柱径为2~3mm,树脂粒度为120~140目时,上柱流速可为1~8mL/min,洗脱体积仅为1mL.理论塔板高度比内径为7mm的常现柱下降2个数量级以上,并可节省大量试剂。提出抽空洗脱方式,解决了空床体积影响柱效的难题。 相似文献
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It was the intention of this paper to show some recent developments in thin layer chroma-togrphy aiming at increasing the separation efficiency by instrumental means and techniquesusing existing separation layers. Gradient elution in the normal phase is a most efficient wayto achieve this goal. Multi-dimensional separations by coupling gradient elution column liquid chromatography inthe reversed phase with AMD gradient elution in normal phase is suitable to achieve newdimensions of separation numbers. Assuming that the N numbers reported for HPLC translateinto separation numbers near 100, by coupling the two kinds of chromatography, separationnumbers around 500 become practically usable. 相似文献
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计算机辅助高效液相色谱(HPLC)分离条件优化可以低成本、快速地得到优化的分离条,因而已较为广泛地用于复杂样品的分离分析。基于移动重叠分离图方法,又发展了一种新型的多台阶梯度分离条件的优化方法可调移动重叠分离图法。该方法通过预测不同流动相条件下各组分的保留时间、峰宽和分离度,绘制出对于样品中各组分的重叠分离区域图。在对当前台阶流动相组成进行优化的同时,考虑其对后面一到两个台阶上流出组分保留的影响,实时地重新绘制对于后面台阶上流出组分的重叠分离区域图。通过观察当前台阶流动相条件对当前台阶和后面台阶上流出组分分离的影响,综合考虑样品中所有组分的分离情况,找到更接近全局最优的分离条件。通过扫描的方法对优化得到的分离条件进行微调,能够进一步提高分离效果。采用文献数据对可调移动重叠分离图法的应用加以说明,在二元流动相体系下,证明了该方法在HPLC方法建立方面的优越性。 相似文献
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The influence of a hydrostatic counter pressure on basic mobility equations in MEKC was analyzed theoretically and investigated experimentally. Taking into account the influence of counter pressure, the modified mobility equations predict a decreased migration time ratio t0/tMC, which was confirmed by results obtained in SDS-MEKC separation of a homologous series of n-alkyl phenyl ketones. As a result, the migration time window could be enlarged in a simple way without having to change the chemistry of the system. Although counter pressures reduce peak efficiency in MEKC by disturbing the plug profile, the concomitant enlargement of the migration time window compensates for this effect. Especially for later migrating compounds, peak resolution could be enhanced at moderate counter pressures. The overall peak capacities within the whole migration window increases slightly when applying counter pressures up to 10 mbar. 相似文献
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建立了亲水/反相二维制备液相色谱(Pre-2D-HILIC/RPLC)分离纯化络石藤中化学成分的分析方法。络石藤药材经醇提、活性炭脱色后用反相固相萃取柱除去色素和强极性物质,最终得到干燥的浅黄色粉末。一维亲水色谱选择Click XIon色谱柱(250 mm×20 mm,10μm)作为固定相,水和乙腈作为流动相,进行梯度洗脱,以紫外触发模式收集馏分,共得到15个组分。二维反相色谱选择C18色谱柱(250 mm×20 mm,5μm)作为固定相,水和乙腈作为流动相,进行梯度洗脱,最终得到14个高纯度化合物,并通过质谱和核磁共振对其进行确认。实验结果表明,该法具有良好的正交选择性,可以有效提高分离度和峰容量,对于分离络石藤等复杂样品具有重要意义。 相似文献
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The geometric structures, infrared spectra and hydrogen bond binding energies of the various hydrogen‐bonded Res?‐water complexes in states S0 and S1 have been calculated using the density functional theory (DFT) and time‐dependent density functional theory (TD‐DFT) methods, respectively. Based on the changes of the hydrogen bond lengths and binding energies as well as the spectral shifts of the vibrational mode of the hydroxyl groups, it is demonstrated that hydrogen bonds HB‐II, HB‐III and HB‐IV are strengthened while hydrogen bond HB‐I is weakened in the four singly hydrogen‐bonded Res?‐Water complexes upon photoexcitation. When the four hydrogen bonds are formed simultaneously between one resorufin anion and four water molecules in the Res?‐4Water complex, all the hydrogen bonds are weakened in both the ground and excited states compared with those in the corresponding singly hydrogen‐bonded Res?‐Water complexes. Furthermore, in complex Res?‐4Water, hydrogen bonds HB‐II and HB‐IV are strengthened while hydrogen bonds HB‐I and HB‐III are weakened after the electronic excitation. The hydrogen bond strengthening and weakening in the various hydrogen‐bonded Res?‐water complexes should be due to the redistribution of the charges among the four heteroatoms (O1‐3 and N1) within the resorufin molecule upon the optical excitation. 相似文献