毛细管电泳法在测定蛋白多肽理化特性中的应用

蛋白质是生命物质基础,蛋白质性质和功能研究是生命科学现在和将来的研究热点之一。理化特性参数是分离、鉴定多肽或蛋白质的基础,已成为蛋白质组学重要研究内容之一。毛细管电泳是将电泳和色谱有机地结合在一起的快速分离技术,分离机制涉及到物质的荷电、分子空间结构和大小、扩散特性、相互作用等理化性质。通过对样品的定量分析或不同条件下迁移时间的变化,利用理化参数与浓度或迁移时间的定量关系,可以计算出多肽或蛋白质的理化特性参数。本文对近年来毛细管电泳测定蛋白质或多肽理化特性原理和方法进行了综述。     

应用毛细管区带电泳分离分析蛋白质及多肽

生命科学研究的迅速发展对生物大分子的分离分析提出了更高的要求,促使人们不断研究和开发新型的高效、快速、选择性好的分离分析方法。传统的电泳技术是目前生物化学及分子生物学实验室中常用的分离分析和制备手段,但它周期长,操作繁     

毛细管电泳：蛋白质,多肽分离分析的一项新技术

电泳和层析一直是研究蛋白质和多肽的重要方法。毛细管电泳除了具备凝胶电泳的高分辨力外,以其快速、定量、重复性好、灵敏度高及自动化程度高等诸多优点在近几年内成为蛋白质、多肽乃至其它生物分子分离分析的一项崭新且重要的技术。     

毛细管电泳法表征多肽及糖蛋白的稳定性

建立了毛细管电泳表征多肽和糖蛋白稳定性的方法。分别以血管紧张素II(Ang II)和植物血球凝集素(PHA)、牛凝血酶(B-Thr)、人凝血酶(H-Thr)、辣根过氧化物酶(HRP)4种糖蛋白为多肽和糖蛋白的模式分子。从样品浓度、电泳缓冲液、样品溶液pH和离子强度等方面优化了血管紧张素II的分离分析条件;从毛细管的选择、样品的电荷状态、电泳缓冲液的选择和分离电压的影响等方面讨论了糖蛋白的分离条件。Ang II和4种糖蛋白的稳定性试验结果表明:Ang II可在pH 7.4的硼酸盐缓冲液(0.02 mol/L)中于4℃下稳定放置48 h; 4种糖蛋白可在pH 7.4硼酸盐缓冲液(0.2 mol/L)中于20,4,-20℃下稳定放置48 h;放置时间大于一周且小于四周时,在-20℃下各蛋白质均保持稳定;放置时间大于两周且小于四周时,只有HRP在上述3个温度下均保持稳定。该方法具有高效、快速、简单、低成本的特点,可广泛应用于多肽和蛋白质的稳定性表征。     

毛细管电泳法表征离子液体与蛋白质的相互作用

基于毛细管区带电泳考察了不同离子液体的阳离子母核、烷基侧链碳原子数目和阴离子组成对牛血清白蛋白的影响,以及离子液体[C4mim]BF4与肌红蛋白、牛血清白蛋白、血红蛋白、牛凝血酶和转铁蛋白之间的相互作用。利用亲和毛细管电泳法比较了[C4mim]BF4与上述蛋白之间的相互作用,并计算得到结合常数Kb分别为1.24×107 L/mol,1.23×106 L/mol,5.75×104 L/mol和5.60×104 L/mol。结果表明,转铁蛋白、血红蛋白、肌红蛋白、牛血清白蛋白与离子液体的相互作用依次减弱,存在1～2个数量级的差异。结合毛细管区带电泳和亲和毛细管电泳模式可实现离子液体与多种蛋白质相互作用的定性与定量表征。     

高效毛细管电泳在核酸、蛋白质分析中的新进展

高效毛细管电泳以其分离效率高，分析速度快，样品和试剂用量少，易于实现自动化等优点，在核酸、蛋白质等生物样品的分析方面发挥着重要的作用并具有巨大的潜力。本文介绍了近两年来高效毛细管电泳技术的进展，特别是PCR／CE、CE／MS以及电泳芯片技术等方面的新发展，并综述了高效毛细管电泳在核酸、蛋白质分析方面的应用，同时对其前景进行了展望。     

奶制品中蛋白质测定的毛细管电泳法研究

本文利用毛细管电泳法研究了奶制品中蛋白成分的分离与测定。采用柠檬酸缓冲体系,对牛奶中的α-乳白蛋白(-αLa)、β-乳球蛋白(-βLg)、α-酷蛋白(-αCN)、β-酪蛋白(-βCN)、酪蛋白(-κCN)五种蛋白进行了很好的分离,其迁移时间和峰面积的相对标准偏差分别小于0.2%和5%;检出限分别为0.01、0.03、0.02、0.02、0.02 mg/mL;加标回收率范围为84%~103%。应用该法测定了多种奶制品中的蛋白质含量。本法简便、快速、准确,为牛奶及奶制品质量的监控提供了一种新的手段。     

径向电场调制毛细管电泳法用于蛋白质分离

利用自制的双向电场控制毛细管电泳新系统,考察了蛋白质的分离情况.结果发现,在低pH值下,通过施加径向电场,不仅可改变电渗流的大小和方向,而且能抑制蛋白质的吸附,进而实现对蛋白质分离效率和分离速度的调控.研究结果表明,可通过物理化学方法实现毛细管电泳的动态或随机调控,这对许多生物样品分离有实际意义.     

毛细管电泳的原理及应用(第四讲):毛细管电泳在氨基酸、肽及蛋白分析中的应用

毛细管电泳的原理及应用（第四讲）毛细管电泳在氨基酸、肽及蛋白分析中的应用罗国安王义明周国华（清华大学化学系北京１０００８４）１概述毛细管电泳（ＣＥ）的应用包括很多内容。被分析的物质有离子、小分子、生物大分子乃至高分子和粒子的分析;分析对象从无机物、有机物、生物体系乃至活体单个细胞的分析;含量测定范围可从常量到微量乃至几个分子的测定。本文只介绍应用最多的几方面内容,其中首推多肽和蛋白的分析,可以说它是ＣＥ最初的应用之一。     

微流控芯片毛细管电泳在蛋白质分离分析中的应用研究进展

重点介绍了近年来国内外在微流控芯片毛细管电泳法用于蛋白质分离分析方面的研究进展。按照分离模式的不同,综述了各种应用于蛋白质分离的微流控芯片毛细管电泳系统,讨论了抑制芯片中的蛋白吸附的各种方法,并展望了芯片毛细管电泳系统在蛋白质分离领域的发展前景。引用文献47篇。     

毛细管电泳技术在重大疾病特异性蛋白质分析中的应用

人类重大疾病特异性蛋白质的识别、鉴定等是目前生命科学亟待解决的问题。毛细管电泳技术用于蛋白质分析,具有装置简单、分析速度快、试剂和样品消耗少以及有多种分离模式和检测手段等特点。本文综述了毛细管电泳技术在人类重大疾病特异性蛋白质分析中的应用,包括肿瘤疾病、神经退行性疾病和输血性传染病等的特异性蛋白质检测。     

高效毛细管电泳在糖分析中的应用

本文评述了近年来毛细管电泳在糖分析中的发展状况和一些常见的分析方法，引用文献５１篇。     

聚乙类吡咯烷酮动态涂敷毛细管电泳柱分离碱性蛋白质

以聚乙烯吡咯烷酮（ＰＶＰ）为添加剂对毛细管柱进行动态修饰,用于碱性蛋白分离。对４种碱性蛋白质进行分离,实验结果表明聚乙烯吡咯烷酮能够很了地抑制电不渗流（ＥＯＦ）及碱性蛋白在石英毛细管壁上的吸附作用。在ｐＨ４．０,ＰＶＰ浓度（Ｗ／Ｖ）为０．４％时,ＥＯＦ仅为１．３５×１０＾－９ｍ＾２／Ｖ．ｓ,平均柱效可达５×１０＾５理论塔板数／ｍ。每次运行之间（ｎ＝６）,天与天之间（ｎ＝６）,迁移时间的相对标准偏差     

电泳毛细管的改性及其在酶和单克隆抗体分离分析中的应用

用壁处理办法对高性能毛细管电泳的毛细管柱进行改性,在Bio-Rad HPE-100中用肽测得组分的平均柱效为200000/m,使用寿命在200次以上。对纤维素酶.尿酶等一系列的样品作了分离和测定,尿酶5次重复测定的相对标准偏差小于1％。在10min内分离并测定了由细胞瘤培养的实际样品中的抗乙肝抗体(HBsAG),反映迁移时间重复性的相对标准偏差为1.87％,并作出了相应校正曲线。     

毛细管电泳在火炸药分析中的应用

综述了近年来毛细管电泳在火炸药领域的应用现状，包括各种分离模式、检测器以及毛细管电泳芯片的应用，并对该技术在火炸药分析中的应用前景作了展望，提出了新的发展方向。引用文献45篇。     

赖氨酸的毛细管电泳特性及测定

研究了缓冲液pH和操作温度对赖氨酸毛细管区带电泳分离中运行电流、电渗迁移率、峰形等参数的影响,确定了赖氨酸电泳分离的最佳实验条件,建立了毛细管区带电泳测定赖氨酸的方法。线性范围为0．1－3．0g/L,检出限为0．03g/L。该法操作简便迅速,重复性好。用于赖氨酸发酵液中赖氨酸的含量测定,结果令人满意。     

毛细管电泳在生物大分子分析中的应用研究进展

近年来,毛细管电泳技术以其高效、微量、分离模式多样等优势,在生物大分子分析领域得到了日益广泛的应用.综述了毛细管电泳技术在多糖、蛋白质、核酸和脂质中的应用,并对其相关的样品制备、毛细管内壁吸附、仪器的研制等方面存在的问题进行分析和展望,以期为毛细管电泳技术在生物大分子领域的推广应用提供借鉴.     

毛细管电泳在火炸药研究中的应用

近年来,毛细管电泳以其高效、快速、微量的特点,在火炸药分析领域被广泛应用并迅速发展。本文从毛细管区带电泳、胶束电动毛细管色谱、毛细管电色谱、芯片毛细管电泳、微乳毛细管电动色谱这五种毛细管电泳的模式出发,结合本实验室的最新研究进展,综述毛细管电泳在火炸药研究中的应用。     

毛细管区带电泳中蛋白质的吸附及其解决方法

本文评述毛细管区带电泳中蛋白质的吸附及解决办法,内容包括吸附的原因,通过缓冲溶液组成的变化、通过毛细管内壁改性、通过附加电场等方法降低吸附。对毛细管内壁电荷密度等方法降低吸附。尤其对毛细管内壁改性方法,改性对电渗流及分离效率的影响,改性的稳定性和重复性等进行了较为详细的阐述。