葛根提取物高效液相色谱分析方法的优化

针对葛根提取物的复杂体系,分别从色谱模式、流动相、添加剂以及梯度洗脱条件几个方面对其高效液相色谱分析 方法进行了优化。其中梯度洗脱条件的优化是根据各组分在5次线性梯度下的保留时间并借助于CSASS软件快速准确地计 算出各组分的液相色谱保留参数a,c值以及峰形参数σ和τ,在此基础上使用CSASS软件对葛根提取物的色谱分离情况进行 高精度仿真预测,从而优化了梯度洗脱条件。考察了优化条件下的分析方法的精密度和重现性,结果表明该方法稳定、可 靠、重现性好。     

梯度洗脱

柱液相色谱有等度（isocratic）和梯度（gradient）2种洗脱方式．等度洗脱时,流动相的组成在色谱分离过程中保持不变;梯度洗脱是控制流动相的组成,使其在色谱分离过程中发生连续的变化．现在,很多HPLC实验室的仪器都有梯度洗脱的功能,为了充分利用仪器的这种功能,本文将讨论以下3个问题：一是为什么要使用梯度洗脱;二是如何对梯度洗脱程序进行优化;三是使用梯度洗脱时常见的问题．     

高效液相色谱用线性梯度洗脱求保留值方程

〕提出了采用线性梯度洗脱求取未知样品中溶质保留值方程的原理及其计算方法,用光二极管阵列扫描检测器解决了梯度洗脱条件下色谱峰的归宿。实验证明：用所得的保留值方程预测等度洗脱下容量因子k'的相对误差不大于3%,而用梯度洗脱下的半峰宽规律可以估算未知样品容量因子k的分布范围,以解决对未知样品是采用等度或梯度洗脱方式。最后,借助计算机仿真方法用于样品的优化,获得了满意的结果。     

反相高效液相色谱流动相组分最优化中初始条件的迅速选择

〕本文从梯度和等浓度两方面讨论了反相色谱流动相组分最优化过程中初始条件的迅速选择。讨论了不同梯度参数对确定初始流动相组分的影响;对不适于梯度洗脱的情况,提出了用逐步逼近的等浓度洗脱过程确定初始流动相组分的方法。以多环芳烃和去痛片组分为例验证了方法的可靠性。     

动态磁涂覆混合纳米固定相毛细管电色谱中芳香酸的输运特征研究

推导了芳香酸在动态磁涂覆混合纳米固定相开管毛细管柱中等度洗脱和二元台阶梯度洗脱条件下的输运方程, 考察了其在该色谱柱上的保留特征. 结果表明, 等度洗脱时, 电渗流方向及大小随着两种固定相配比的改变而改变, 溶质的容量因子与弱阴离子交换固定相和反相固定相比例(Fe₃O₄@SiO₂-NH₂︰Fe₃O₄@SiO₂-C₁₈)之间具有良好的线性关系, 拟合后相关系数大于0.9166. 二元台阶梯度洗脱条件下, 溶质的迁移时间可以通过其在等度洗脱条件下的洗脱时间加以预测. 溶质在经磷酸缓冲液浓度、有机调节剂浓度和pH值台阶梯度洗脱后, 其预测保留时间和实际保留时间之间的相对误差分别小于8.0%, 10%和5.8%. 构建的系统在优化的色谱条件下对水提天麻进行了分离, 其主要成分柠檬酸的保留时间预测值与实际值之间相对误差为11%.     

制备型液相色谱法分离纯化3-甲基吡啶光氯化产物中的2-氯-5-三氯甲基吡啶

利用制备型高效液相色谱从3-甲基吡啶光氯化产物中分离纯化得到2-氯-5-三氯甲基吡啶,对制备色谱的洗脱方式、洗脱剂组成及浓度、进样量等参数进行了优化。使用的制备柱为Zorbax-C18柱,以乙腈-水为流动相,采用速度梯度洗脱方式进行洗脱,用二极管阵列检测器在240 nm波长下检测,进样体积为100 μL。该方法的制备回收率为82.7%,相对标准偏差为4.0%（n=5）,产品纯度为99.01%。     

离子色谱法同时测定饮用水中强极性农药草甘膦、草铵膦、乙烯利和调节膦

建立了一种梯度洗脱-电导抑制-离子色谱同时测定4种强极性农药的方法.通过对淋洗液及浓度、色谱柱、柱温、进样量等条件的优化,得到最佳检测条件:色谱柱为IonPac AS11-HC分析柱及IonPac AG11-HC保护柱,柱温33℃,进样量50μL,RFIC系统的淋洗液自动发生器在线产生的KOH作为淋洗液,梯度洗脱,淋洗...     

液相色谱-串联质谱外标法定量分析中基质效应的评估

以苯巯基尿酸为目标化合物,考察了色谱分离条件(即强洗脱、弱洗脱及梯度洗脱)对采用外标法定量的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析中基质效应的影响。试验表明:①对无基质标准溶液的分析,以强洗脱条件下的灵敏度最高,且可实现高通量分析;②对同一基质不同浓度的试液,弱洗脱条件的基质效应明显改善,而梯度洗脱的结果最好;③对不同来源的基质和不同浓度的试验,在3种不同的色谱分离条件中以梯度洗脱效果最好,提高了分离度,减少了共流出,有效地降低了基质效应对目标物分析的影响。因此,在LC-MS/MS分析中,色谱分离条件的改善对降低基质效应对测定的影响十分重要。     

人参皂甙的反相高效液相色谱多台阶梯度优化方法

建立了一种反相高效液相色谱多台阶梯度分离人参皂甙的方法.该方法以乙腈-水溶液为流动相,通过一系列等度实验,获得了8种人参皂甙Rg1,Re,Rf,Rg2,Rb1,Rc,Rb2和Rd的色谱保留参数,发现两参数保留方程不适合用于人参皂甙这种天然产物的分离条件的优化,而三参数保留方程的高精度才可满足预测的要求.在三参数保留方程的基础上,通过计算确定了8种人参皂甙(包括3台阶梯度)的液相色谱分离条件.通过实验对此优化条件进行了验证,实验结果显示了较好的预测精度和分离度.将本方法用于分离人参皂甙,分析时间短且分离度高,显示了等度台阶梯度优化方法对确定色谱分离条件的优越性.     

退火遗传算法在液相色谱线性梯度分离条件优化中的应用

对于复杂样品的反相高效液相色谱分离,一般需在不同的流动相洗脱模式下进行。流动相线性梯度淋洗在分离方法发展中得到了广泛的应用。遗传算法作为一种新的全局优化搜索算法,已广泛应用于计算机科学等领域、作者也已成功地将遗传算法应用于液相色谱分离条件优化。本文将模拟退火演化方法引入遗传算法,并将退火遗     

固相萃取-高效液相色谱/串联质谱检测谷物中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和M1

建立了高效液相色谱/串联质谱(LC-MS/MS)同时检测谷物中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和M1的方法.并优化了液相色谱条件和质谱的相关参数.谷物样品经研磨成粉末后,直接经甲醇-水( V∶V=10∶90)提取,Oasis HLB固相萃取净化,乙腈-水(0.2％甲酸)梯度洗脱,选择电喷雾离子源(ESI),正离子扫描...     

中药指纹图谱的线性梯度分离条件的快速优化方法

提出了一种复杂样品线性梯度分离条件的快速优化方法.先通过4次线性梯度的初始实验,然后利用Excel规划求解工具获得准确的溶质保留方程系数.在此基础上利用网格搜索完成线性梯度的参数优化.整个优化策略通过对中药金银花提取液中各组分的分离得以验证.同时比较了网格搜索、遗传算法、遗传算法与规划求解联用的3种寻优算法.结果表明:3种方法优化结果接近,但运算时间有所差异.     

梯度洗脱优化-离子色谱-脉冲安培法分析婴幼儿配方乳粉中的糖和糖醇

建立了梯度洗脱优化-离子色谱-脉冲安培检测技术分析婴幼儿配方乳粉中麦芽糖醇、半乳糖、葡萄糖、蔗糖、果糖、乳糖6种与代谢疾病紧密相关的糖和糖醇的方法。该方法对样品的前处理、色谱柱的选择、淋洗液的梯度等色谱条件进行了优化,重点研究了淋洗液梯度对各组分分离效果的影响。将梯度洗脱程序分解为弱保留组分分离、乳糖分离、基质消除、系统平衡4个子程序,并分别对其进行了条件优化,实现了6种组分的完全分离,并有效解决了弱保留组分色谱峰易重叠、乳糖色谱峰易拖尾等现象。6种组分的线性范围为0.5~100 mg/L,相关系数（r）>0.99,方法的检出限（S/N=3）为0.06~0.40 mg/L。该方法具有分离度好、灵敏度高等优点,可满足例行分析的要求,同时也为淋洗液的梯度优化提供了可借鉴的方法。     

计算机辅助高效液相色谱梯度洗脱的优化

本文介绍了计算机辅助反相高效液相色谱梯度洗脱优化分离的方法。首先采用混合设计法，通过９个预试验建立目标函数，然后运用双因素（初始流动相组成Ｃ和梯度时间Ｔ）扫描技术，由计算机给出优化分离条件，实验结果和预示完全一致。     

梯度加压毛细管电色谱同时分离大黄提取液中5种蒽醌类化合物

建立了同时分离药用大黄提取液中大黄酸、芦荟大黄素、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚5种蒽醌类活性成分的梯度加压毛细管电色谱的新方法.实验结果显示,大黄提取液中的5种蒽醌化合物可在22min内完全分离,梯度洗脱微柱液相色谱的柱效为等度洗脱微柱液相色谱的6.63倍,梯度毛细管电色谱的柱效为梯度微柱液相色谱的4.6倍.     

胰岛素反相制备色谱的方法开发

以胰岛素反相制备色谱方法的开发和优化为目标,通过考察色谱保留参数、峰展宽及样品流出曲线的浓度分布等色谱参数,对流动相梯度、色谱填料、载样量等色谱条件进行了优化,并建立了胰岛素制备色谱峰参数的描述方法。结果表明,所建立的方法可快速筛选出最适于胰岛素分离的色谱条件(包括流动相梯度及分离填料),即流动相中的强洗脱溶剂(有机相)需采取缓梯度窄区间的变化条件,筛选出的分离填料需具备峰向两侧展宽且展宽程度较小、样品最高浓度居中分布的特点。将方法用于实际胰岛素粗品的纯化制备,获得了杂质去除效果好、胰岛素纯度高的产品。该法为胰岛素反相色谱纯化制备方法的快速建立提供了指导,具有较强的实用价值,同时为发展大分子化合物的制备色谱方法提供了参考。     

液相色谱梯度洗脱中的谱带压缩效应

谱带压缩效应是梯度洗脱区别于等度洗脱的重要特征。经典的范德姆特(van Deemter)理论塔板高度方程基于等度洗脱推导得到,因此不能对谱带压缩效应进行描述。在梯度洗脱中,保留因子(k)会随流动相组成(φ)的改变而发生变化,这就使得对梯度洗脱机理的研究要比等度洗脱复杂许多。该文对近10年来谱带压缩效应的研究进展,特别是溶剂强度模型(即描述ln k与φ关系的数学表达式)的非线性特征对谱带压缩因子(G)的影响进行了述评,指出为了更好地认识谱带压缩效应需要将这种非线性因素考虑在内。     

食品包装材料中13种增塑剂的毛细管气相色谱法测定

建立了索氏提取、固相萃取净化浓缩、毛细管气相色谱法测定塑料食品包装材料中13种增塑剂的方法.优化了固相萃取淋洗剂、洗脱剂和洗脱剂体积等参数.样品经正己烷索氏提取后,用硅胶小柱净化浓缩.以正己烷-甲苯为淋洗剂,2 mL乙酸乙酯为洗脱剂.过滤后的洗脱液用气相色谱仪分析.结果显示,13种增塑剂在0.1～1000 mg/L范围...     

离线全二维逆流色谱-液相色谱分离莪术油成分

中药挥发油成分复杂,一维色谱分离由于有限的峰容量难以完全分离中药挥发油成分,全二维气相色谱为分离挥发油成分提供了有力的方法,然而气相色谱一般无法用于天然活性成分的筛选。为建立挥发油成分全二维色谱分析新方法,研究建立以液相色谱为基础的全二维色谱分离分析方法。本文主要研究全二维逆流色谱-液相色谱分离莪术油成分的方法,并探讨两种色谱技术之间的正交性,为活性成分筛选提供新的技术支持。通过优化离线全二维逆流色谱-液相色谱分离方法,对全二维色谱峰容量、正交性和空间覆盖率进行度量。优化液相色谱分析条件并筛选逆流色谱分离两相溶剂体系,通过比色法筛选了逆流色谱两相溶剂体系并采用下相为流动相进行梯度洗脱。在290～375 min采用推挤洗脱,莪术油在第一维逆流色谱分离中达到了良好的分离。第二维反相高效液相色谱的流动相组成为乙腈(A)和水(B)。梯度洗脱程序为0～10 min, 50%A～65%A; 10～14 min, 65%A; 14～21 min, 65%A～85%A; 21～25 min, 85%A～95%A; 25～30 min, 95%A～55%A; 30～40 min, 55%A。在上述条件下...     

高效液相色谱梯度洗脱中弱溶剂的在线净化

利用一个在线净化预柱减少了高压梯度洗脱中由于试剂纯度不够造成的基线噪音。预柱的位置在溶剂泵Ａ和流动相混合器之间,由一个六通阀来控制。在线净化结果良好,有效地除去了空白梯度色谱图中的杂质峰,提高了梯度洗脱的分离重现性。该方法对开展梯度洗脱有实用价值。