高效液相色谱分析兔脑脊液中脑啡肽、脑新肽和P物质

应用高效液相色谱法分析神经肽的报道,近几年来逐渐在增多,已成功地对各种组织和体液中的肽进行分析。但在用紫外检测时,由于灵敏度低,受到一定限制。一般改进的办法是将邻苯二甲醛与肽反应,生成具有强荧光的衍生物,如用荧光检测器     

超高效液相色谱法同时测定盐酸丁丙诺啡舌下含片中丁丙诺啡和纳洛酮的含量

建立了同时检测丁丙诺啡和纳洛酮的超高效液相色谱的分析方法.分析柱为Waters Acquity BEH C18超高效液相色谱柱,紫外检测波长为280 nm,流动相为甲醇-甲酸(0.2%)水,梯度洗脱,两种分析物在3 min内即可达到良好分离.纳洛酮和丁丙诺啡的线性范围分别为1～25 μg/mL,2～50 μg/mL,线性相关系数分别为0.9992,0.9995.检出限为0.2μg/mL.考察了甲醇和乙腈两种流动相体系对样品的分离效果,发现甲醇流动相体系的响应高于乙腈流动相体系.在优化条件下,对丁丙诺啡舌下含片以及加标后样品进行测定,且对其方法学进行考察,加标平均回收率在91.3%～100.1%之间,RSD小于5%.     

GnRHa对去垂体大鼠卵巢tPA和PAI-1基因表达的调节

给去垂体大鼠注射促性腺激素释放激素(GnRH)的类似物(GnRHa)可诱导卵巢颗粒细胞(GC)和膜间质细胞(TI)组织型纤溶酶原激活因子(tPA)和抑制因子(PAI-1)基因在时间上和不同细胞间的协调表达。tPA主要由GC产生,GC也分泌少量PAI-1;而卵巢中的PAI-1主要由TI产生,TI也分泌少量tPA。在排卵前GC和TI中tPA mRNA和生物活性均达到高峰;与此相反,PAI-1的表达在GC和TI中却完全不同,TI中的PAI-1 mRNA和生物活性在tPA峰值前6h达到最高水平;而GC中的PAI-1峰值却出现在排卵后。上述变化与人绒毛膜促性腺激素(hCG)诱导正常大鼠排卵所引起的两种基因的表达的动力学变化无异。这些结果提示,hCG(通过PKA途径)和GnRHa(通过PKC途径)这两种不同的调控信号可通过各自不同的受体,经过不同的信息传递系统而最终影响tPA和PAI-1基因的相同的协调表达引起排卵。     

电针耐受时大鼠脑内血管紧张素Ⅱ的生成和释放加速

本文研究表明,电针耐受时大鼠脑脊液中All样免疫活性物质(AII-ir)的浓度增高,脑内AII-ir和AI-ir的含量也明显增高。并观察到,电针1和3h的大鼠脑提取物经分子筛层析,发现大分子前体AII-ir峰明显右移,并出现小分子AII-ir峰。经高效液相层析鉴定,电针后出现的小分子AII-ir峰与AII标准品具有相同的保留时间。结果表明,长时间电针加速了脑内AII的生成和释放,这可能是AII参与电针耐受的机理之一。     

hCG和GnRHa诱发去垂体大鼠排卵及卵巢PA活性变化的比较研究

促性腺激素释放激素类似物(GnRHa)能诱导去垂体大鼠排卵,与hCG相比,所诱导出的排卵时间提前2-4h.GnRH拮抗物能完全阻断GnRHa和hCG不是作用在同一受体部位上.GnRHa也同hCG一样,只增加卵巢中组织型纤蛋白溶酶原激活因子(tPA)活性,而对尿激酶型PA(uPA)无明显影响.由hCG和GnRHa所诱导的卵巢tPA活性皆在排卵前达到高峰;GnRHa也能刺激卵丘-卵母细胞复合体中tPA活性;注射hCG明显增加血清孕酮水平,而GnRHa对血清孕酮含量没有明显影响.实验说明,GnRHa和hCG诱导排卵可能都是通过增加卵巢中tPA的活性这一共同途径而实现的.     

二氯化锰慢性染毒对大鼠脏器和血液元素含量的影响

用ＭｎＣｌ２水溶液通过气管和腹腔二条途径对Ｗｉｓｔａｒ大鼠染毒，气管染毒４个月，总量达（７４．４９～１８．５９）×１０－６，腹腔染毒４个月，总量达（１１４５．２６～５７２，４）×１０－６．采用原子吸收光谱法，测定了大鼠肝、脾、肺、肾、脑和血液中锰、钙、镁元素的含量．结果：脑、肺组织中锰元素含量显著高于对照组（Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１），脾脏钙元素和血液镁元素含量显著低于对照组（Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１）．提示：慢性锰中毒对脏器与血液中元素含量的影响不可忽视．     

高效液相色谱法测定大鼠血浆和全血中核黄素的含量

为了直接反映核黄素营养状况对血中核黄素水平的影响,建立了高效液相色谱测定大鼠血浆及全血中核黄素含量的方法。采用Diamonsil C 18 色谱柱(250 mm×4.6 mm i.d.,5 μm)分离,以甲醇-5 mmol/L 乙酸铵(体积比为35∶65)为流动相,流速1.2 mL/min ,荧光检测器检测(激发波长:450 nm,发射波长:520 nm)。样品经乙腈、三氯甲烷处理后进样分析。核黄素测定的线性范围为5～200 nmol/L ,最低检测限为2.5 nmol/L (S/N＝2),日     

气相色谱-质谱法测定大鼠血浆和肝匀浆中丙二醛含量

提出了用气相色谱-质谱法测定大鼠血浆和肝匀浆中丙二醛(MDA)含量。样品与1.0mol.L-1氢氧化钠溶液在60℃水浴中反应60min产生丙二醛,加入五氟苯肼(PFPH)衍生化试剂进行衍生化,所得衍生化产物通过HP-5MS色谱柱分离,采用电子轰击离子源选择离子监测模式进行质谱测定。丙二醛-五氟苯肼衍生物(MDA-PFPH)定量离子为m/z 234,内标物甲基丙二醛衍生物(Me-MDA-PFPH)定量离子为m/z248。血浆和肝匀浆中丙二醛的线性范围分别为1.0～50.0μmol.L-1和50～500μmol.L-1,加标回收率分别在94.6%～103%和93.2～106%之间。方法的日内、日间相对标准偏差(n=6)均小于5%。     

不同发育阶段大鼠NaF与血清生化和元素含量慢性反应的研究

不同日龄３批雄性大鼠饲氟浓度５３．２＊１０＾－６,实验３个月。结果表明,与同日龄正常对照组相比,杆、肾铝显著升高的断乳２周大鼠的血清钙,ＲＢＣ、Ｈｂ含量、红细胞平均血红蛋白量、全血锌,全血铁,骨钙,骨磷含量均出现显著变化。２８０日龄且的体重和全血磷受影响较为显著。     

高效液相色谱法测定大鼠心肌组织中次黄嘌呤,肌苷和腺苷含量

研究了一种快速、简便测定大鼠心肌组织中次黄嘌呤（ＨＸ）、肌苷（Ｉ）和腺苷（ＡＤＯ）的高效液相色谱法。采用ＷａｔｅｒｓμＢｏｎｄａｐａｋＣ_（１８）色谱柱，含７％甲醇的２ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸钠缓冲液（ｐＨ＝６．０）为流动相，等比洗脱，２５４ｎｍ处紫外检测，１２ｍｉｎ内即可分析一个样品。本法生物样本预处理简单，因而平均回收率达９５％以上。ＨＸ在５．０～５００ｎｇ，Ｉ和ＡＤＯ在１０～１０００ｎｇ范围内，线性关系良好，相对标准偏差分别低于３．４０％（日内）和５．２０％（日间），并测定了３０份心肌组织中次黄嘌呤、肌苷和腺苷的含量。对所用的色谱分析条件进行了讨论。     

富硒肝对大鼠GSH Px、GSH和游离巯基含量的影响

为观察富硒肝和亚硒酸钠对大鼠抗氧化能力的影响。将6只大鼠分为两组:A组用亚硒酸钠[按Se元素计,6μg/(只.d)]灌胃,B组用富硒肝[按Se元素计,6μg/(只.d)]灌胃。于灌胃第0、4、8、12、16、20天内眦采血,测定血浆和血细胞内液中GSH-Px活力以及GSH、游离巯基的含量。结果表明:①给药20 d后A、B组血浆和血细胞内液GSH-Px活力和GSH含量均明显高于灌胃前(P0.05);②A、B组血浆中游离巯基的含量略有增加,而血细胞内含量则大幅降低(P0.05)。结论:经口给予富硒肝可诱导大鼠产生较多的抗氧化物质,增强大鼠的抗氧化能力。其作用可达同剂量亚硒酸钠水平。     

N-末端B型利钠肽原和D-二聚体联合检测在慢性心力衰竭患者中的临床应用价值

目的探讨NT-Pro BNP和D-二聚体联合检测在慢性心力衰竭患者中的诊断价值。方法选取2012年10月到2014年9月天津市静海县静海镇医院收取的CHF患者共79例为CHF组,并选取同一时期健康体检者79例作为对照组。依据美国纽约心脏病协会(New York Heart Association,简称NYHA)方案对CHF患者进行心功能分级,对比不同患者的NT-Pro BNP和DD水平。结果 CHF组患者的NT-Pro BNP水平、D-D水平均显著地高于对照组(P<0.01)。Ⅳ级CHF患者的NT-Pro BNP和D-D水平均显著地高于Ⅲ级、Ⅱ级和Ⅰ级患者(P<0.01)。NTBNP水平、D-D水平与NYHA分级呈正相关(P<0.05)。结论联合检测NT-Pro BNP、D-D水平可准确地反映心功能,可作为CHF患者早期诊断、鉴别诊断、指导治疗及预后判断的重要指标。     

高效液相色谱/电化学法测定大鼠血液和脑组织中单胺类物质的含量

建立了高效液相色谱／电化学检测法测定大鼠脑组织和血液中单胺递质及其代谢产物的方法。能同时测定去甲肾上腺素（NE）、肾上腺素（E）、3,4-二羟基苯乙酸（DOPAC）、多巴胺（DA）、高香草酸（HAV）、5-羟色胺（5-HT）,并能和内标3,4-二羟卞胺（DHBA）分离良好。本方法快速、简便,回收率为92％-105％,线性范围2．8-680ng／mL,检出限为0．05ng（S／N=3）。本方法已应用在服用中药的大鼠下丘脑组织及血液的测定中,数据显示,本法能满足测定要求。