扫描电镜生物制样的改进

扫描电镜生物制样的改进李庚午，朱命炜，张根发（河南师范大学生物系，新乡４５３００２）利用ＳＥＭ观察生物材料，因生物材料不导电而必须在观察前进行一系列处理，在这些过程中以固定、脱水、干燥、喷镀几个环节尤为重要，加之生物材料种类繁杂，其制样方法各环节的种...     

扫描电镜的孢粉制样技术

本文介绍了三种扫描电镜的孢粉制样技术,即盖玻片涂片法、铜片涂片法及铜台挑入法。本文对这三种方法进行比较,说明各自的优缺点。     

植物细胞分离的扫描电镜制样技术

植物细胞分离制样技术,原是应用于光学显微镜的细胞学的研究,我们将该技术中的固定、氧化、水解和分离程序与扫描电镜植物组织块常规制样方法中的脱水、临界点干燥程序相结合,形成了一种扫描电镜植物细胞分离制样方法,该方法的应用不仅使分离细胞的研究由光镜扩展至扫描电镜而且与扫描电镜植物组织块的常规方法等在细胞形态学研究方面可从互为对照和补充。     

明胶膜收集游离细胞的扫描电镜制样方法

明胶膜收集游离细胞的扫描电镜制样方法金立强（南京铁道医学院电镜室，南京２１０００９）游离细胞在样品台上能单层分布，避免污染、变形和脱落，是扫描电镜样品制备的重要技术要求。其中，提高游离细胞的附着能力，更是要解决的问题。本文就此介绍采用明胶膜滴片法制样...     

单用叔丁醇的扫描电镜样品制备法

单用叔丁醇扫描电镜样品制备法。是在叔丁醇冷冻干燥法的基础上作适当改良,以叔丁醇代替酒精脱水,不需进行置换直接进行叔丁醇冷冻干燥。我们用此法获得满意的结果,兹介绍如下。材料和方法将常规取材的新鲜标本,大白鼠气管、肾脏、小肠等组织,用生理盐水冲洗干净后迅速放入3％戊二醛固定液中固定2h。用0.1mol/L磷酸缓冲液冲洗3次,每次10min。用1％锇酸水溶液后固定1h。用双重蒸馏水冲洗3次,每次10min。用50％,70％,80％,90％,95％,100％的液体叔丁醇梯度脱水置换,每次10min。最后100％的叔丁醇需换两次。将纯叔丁醇在4℃冰箱中降温10min后,放入真空干燥器中干燥40min。等干燥后的样品温度升到室温后再取出,用导电胶贴在样品托上。用日产JFIC-1100型离子溅射仪镀膜5min。用日产林S-520型扫描电子显微镜观察照相。     

用于污水处理的微生物制样方法和扫描电镜观察

微生物种类繁多、代谢类型多、分解能力强、繁殖速度快。用微生物处理污水，是目前效果最好的生物法。广泛地应用于环境保护、环境监测中。     

胖大海三种扫描电镜制样方法的观察比较

以直接烘干、常规生物电镜样品制备和烘干加锇酸熏染电镜样品制备三种方法分别处理梧桐科植物胖大海干燥成熟种子,进行扫描电镜观察和比较分析.结果显示:胖大海外层种皮薄而脆,表面具不规则细皱纹,表皮细胞呈多边形,腺鳞和气孔丰富,有少量星状非腺毛;中层种皮较厚,细胞大小不一,壁薄易破,呈管状簇网状排列,其间分布有革质带、革质筛孔、螺纹及环纹导管,吸水后高度膨胀而易使外层种皮破裂剥离.内层种皮较薄而光滑,细胞呈多边形,大小不一,层叠排列;二片胚乳肥厚,细胞呈立方或短棒状,排列整齐;子叶菲薄,细胞呈长方形或多边形,排列紧密,气孔丰富.常规生物电镜制样,一定程度上反映了吸水膨胀后的胖大海超微形态结构,其图像清晰,但易受结构破坏缺失而影响整体观察;而烘干加锇酸熏染电镜制样,能更好地保存干燥胖大海结构,同时可获得高质量图像,二者相辅相成,有助于较全面了解胖大海超微形态结构的特点.     

改良游离细胞扫描电镜制样方法适用于凋亡细胞观察

利用常规游离细胞扫描电镜制样方法制备的凋亡细胞样品,镜下凋亡检出率较低,细胞容易脱落变形,不能满足观察要求。本文采用200μmol／L双氢青蒿素作用前列腺癌PC-3细胞48h,诱导细胞凋亡;通过改良的制样方法制样并观察凋亡细胞超微结构。结果显示,凋亡细胞和凋亡小体阳性率明显提高,细胞贴附紧密、分布均匀,凋亡细胞超微结构比透射电镜更直观形象。     

基于扫描电镜表征膜截面样品的制样技巧

高分子膜可用于水处理分离、气体分离、光电膜和医用膜等多个领域,具有重要的研究意义.扫描电镜是表征膜结构和形貌的重要技术手段,实验中发现基膜使用高分子纤维层层压制的膜样品在液氮中韧性强无法脆断,膜截面扫描电镜测试结果不理想.针对这一类膜截面制样难成功率低的问题,根据冷冻切片机的原理,本文提出四种简单易操作的膜截面样品制样...     

趾甲镰刀菌病真菌的扫描电镜观察和特殊制样方法

本文经反复摸索对比,总结出一套简便、完整、快捷的真菌扫描电镜（SEM）样品制备方法,并对分离培养趾甲镰刀菌病的镰刀菌（Fusarium,F）进行了表面超微结构观察。在SEM下可清晰地分辨出真菌的菌丝和大、小分生孢子。茵丝粗细均匀,形态饱满,表面有较规律且微微隆起的分隔,其上偶有分支,彼此连通。大、小分生孢子则以孢尖或孢体依附贴合于菌丝上,其中大分生抱子较稀疏,呈镰刀形或纺锤形,两端较尖,孢体稍弯曲,背腹明显,有2～5个环状竹节样膨隆,其中小分生孢子较密集,呈卵圆形或梨形,无或偶见一隔膜,且两种孢子均有顶端和侧壁出芽。SEM观察结果为真菌的病原学分类和抗真菌药物筛选等方面提供了形态学依据。     

利用离子蚀刻对扫描电镜载片做亲水化处理

本文采用离子蚀刻技术,对扫描电镜的样品载片进行亲水化处理。经上述处理后的载片,可以均匀地吸附各种游离细胞,避免了样品重叠现象给扫描电镜观察带来的不便。     

绿茶多糖的扫描电镜制样新方法及原子力显微镜观察

利用扫描电镜（SEM）和原子力显微镜（AFM）对绿茶多糖及酶解绿茶多糖试样进行显微成像,得到颗粒状或由单个颗粒聚集成的形貌结构。结果表明：改进制样方法的扫描电镜观察结果与原子力显微镜成像基本一致,说明了改进后的扫描电镜制样方法是一种简单有效的方法。实验结果还在一定程度上解释了绿茶多糖经酶解后其微观形态的变化情况。     

雨生红球藻的冷冻扫描电镜制样条件初探

为了探索针对雨生红球藻的冷冻扫描电镜制样条件,以固体琼脂和液体培养的藻细胞为材料,比较了琼脂培养基直接粘台和藻液滴于预先粘台的滤纸两种粘台方式和－90℃下分别升华2 min、10 min、20 min和30 min四种升华时间对成像效果的影响。结果表明：上述两种粘台方式均可获得满意的观察效果,比较而言滤纸法效果更好;－90℃升华2 min即可将藻细胞表面完全暴露,获得满意的观察效果,而长达30 min的升华时间也不会对细胞表面结构造成损伤。     

泥页岩样品自然断面与氩离子抛光扫描电镜 制样方法的比较与应用

根据不同的研究目的,泥页岩的扫描电镜实验常用自然断面和氩离子抛光两种制样方法.自然断面的样品一般利用二次电子(SE)信号成像,反映样品表面原始形貌,图像立体感强,是最常用的制样方法.自然断面方法适合观察较大的孔隙结构,矿物及有机质形态特征,有机显微组分等.氩离子抛光样品一般利用背散射(BSE)信号成像,反映样品原子序数差异,容易区分有机质与矿物质.氩离子抛光样品表面光滑平整,适合观察泥页岩中纳米级孔隙,能直观地观察到矿物及有机质的颗粒大小及分布情况,但经过切割、研磨和抛光等一系列复杂的处理过程,样品原始形貌受到一定的破坏,会损失掉一些有用信息.本文详细比较了自然断面与氩离子抛光两种制样方法的特点及适用条件,指出如何根据样品特征及研究目的选择合适的制样方法.     

线虫扫描电镜样品制备技术的比较

扫描电镜是线虫分类研究中不可缺少的重要工具.本研究利用昆虫线虫小杆属Rhabdtis sp.、三等齿属Pelodera teres、植物根结线虫三种线虫为试材进行了戊二醛固定和戊二醛-锇酸双固定技术、CO2临界点干燥和真空冷冻干燥技术及相互组合技术的比较研究.结果表明戊二醛一锇酸双固定和真空冷冻干燥组合的制样技术更适合线虫保持较好的形态结构,经该制样方法处理的线虫体表不易变形,为线虫扫描电镜制样可参照的方法.     

柑桔寄生线虫扫描电镜制样技术比较研究

应用组织导电法(MPA和CLPG导电液)、环氧树脂包埋法、空气干燥法、CO2临界点干燥法(选用不同的固定剂和脱水剂)等六种方法制样，对云南省柑桔寄生线虫：半穿刺线虫(图1)、短体线虫(图2)、螺旋线虫(图3)进行扫描电镜观察，经过比较，认为用戊二醛-锇酸双固定、酒精梯度脱水、CO2临界点干燥法制样效果优于其它方法：虫体表面环纹、侧线、阴门、肛门、交合刺等明显易见，清晰度好。     

扫描电镜细胞样品制备方法的改进

扫描电镜已广泛用于对细胞表面结构的观察，但在细胞样品制备过程中，往往因脱水或干燥引起细胞体积或表面结构的改变，导致观察结果出现误差或失真。为了避免这类问题，我们以鱼类培养细胞为材料，对其扫描电镜样品制备技术进行了一些改进，举例如下。     

应用扫描电镜技术显示染色体方法的初探

光镜观察染色体,已沿续多年。扫描电镜问世以来,尤其是近10年来,国内外学者选用光镜观察认定的染色体标本,再重新用锇酸(1％O_sO_4)、丹宁酸(2％)浸渍,然后进行漂洗、自然干燥、黄金离子镀膜后上镜观察。其目的试图经电镜放大之后与光镜观察结果进行对比。近几年我们试用扫描电镜技术,经反复试验,成功地制备了染色体样品。其方法独特,结构新颖,为研究染色体开创了一条新路。一、材料与样品制作取临床病人静脉血0.5ml,注入装有1ml培养基(1640)的培养瓶中,置37℃培养箱72小时,取材前2小时加入秋水仙素1滴(10μg/ml),然后将其倒入离心管离心10分钟(2000转/分),弃上     

果蝇的透射电镜制样方法研究

果蝇作为一种模式生物,被广泛应用于遗传学、发育的基因调控、人类疾病机制等研究。透射电镜能够观察细胞的超微结构及其变化,是研究果蝇细胞生物学的重要方法之一。本实验研究发现,果蝇样本固定前用双面刀片快速切下头部,固定液能快速有效地固定其体内组织成分,防止内部组织溶解;使用琼脂预包埋果蝇样本,将其修整为长方体,增加其自重,固定其包埋方向,为后续目标位置的超薄切片起到定位作用。