酶标分析仪波长标准物质的研制

以硫化锌为高折射材料和冰晶石为低反射材料,利用真空镀膜技术、光学极值法检测膜厚技术镀制了窄带全介质干涉滤光片,K9玻璃为薄膜保护层,采用切割、粗磨、精磨、抛光、镀膜等光学工艺制得酶标分析仪波长标准物质,经均匀性、稳定性考核合格后,由紫外可见近红外分光光度计标准装置对标准物质定值。研制的酶标分析仪波长标准物质定制结果扩展不确定度为0.7 nm(k=2),使用方便,量值准确、稳定,技术指标满足酶标分析仪波长示值误差及重复性检定/校准工作的需要。     

荧光法酶标分析仪的校准方法

参考荧光法酶标分析仪的工作原理、出厂指标及相关标准，建立了荧光法酶标分析仪的校准方法。参考相关计量技术规范，对荧光法酶标仪的计量技术指标进行了研究，荧光法酶标分析仪的主要校准项目有检出限、测量线性、测量重复性。参考指标为线性相关系数不小于0.995，检出限不大于5×10^-10 g/mL，测量重复性不大于1.5%。利用校准案例对校准方法进行验证，结果表明建立的校准方法科学合理、可操作强，可为荧光法酶标分析仪的计量校准作参考。     

酶标分析仪检定用中性滤光片的校准

提出酶标分析仪检定用中性滤光片的校准方法，并用校准实例对校准方法进行了验证。结合校准方法，根据JJF 1059.1—2012《测量不确定度评定与表示》建立了数学模型，不确定度的来源有测量结果的重复性、分光光度计透射比误差、分光光度计杂散辐射、中性滤光片年稳定性、中性滤光片均匀性，按该校准方法校准的中性滤光片，校准结果的不确定度为U=0.005(k=2)，校准结果能够满足JJG 861—2007《酶标分析仪检定规程》对中性滤光片不确定度U≤0.01(k=2)的要求，可用于开展酶标分析仪吸光度值的校准工作。     

酶解小麦蛋白产物-还原糖美拉德反应的光谱研究

采用紫外-可见吸收光谱和荧光光谱研究了酶解小麦蛋白产物与还原糖不同加热条件下的美拉德反应及其产物.美拉德反应在紫外区240和294 nm产生两个特征峰,荧光的最大激发和发射波长为347和450 nm;随反应进行,紫外光吸收和荧光强度迅速增加,表明美拉德反应进入高级阶段,产生的糠醛类、呋喃酮类、吡喃酮类、噻吩类及噻唑类等小分子物质表现较大的积累速率.温度升高,强度增加速率增大.在较高温度时,紫外光吸收出现最大平稳值;荧光强度则到达最大值后降低,表明小分子物质间或与肽聚合生成大分子黑素类物质,小分子物质的积累表现消除速率,反应进入终级阶段.     

酶促反应热动力学方程的研究

由酶促反应速率方程积分式和酶促反应中能量变化与物质参与反应量的关系推出了单底物酶促反应的热动力学方程。并用精氨酸的酶促水解反应进行了验证,求出的米氏常数K_m和最大速率Vmax与文献值相符。     

Nafion膜修饰无分离步骤的IgM电化学免疫传感器研究

发展了一种基于Nation膜修饰电极构制的无分离步骤的异相免疫分析法,羊抗人IgM抗血清和邻氨基酚通过Nation膜固定在电极表面,形成生物敏感膜。采用竞争吸附免疫分析法,以HRP—IgM作标记物,只有结合在生物敏感膜的酶标物才能催化邻氨基酚与H2O2的反应,产生电分析信号,从而与游离在溶液里的酶标物区分开。因此分析过程勿需洗脱步骤,简化了分析过程,在优化的条件下,对IgM的检测范围为0．07～1．8mg／L。该分析技术操作简单、分析速度快。     

对位取代酚类物质的光化学荧光测定研究

指出了碱性介质中，对羟基苯乙酸、对羟基苯丙酸、高香草酸、对甲基酚和补势息痛等对位取代酚类物质的溶液，在光照下发生自氧化还原反应，产生荧光二聚体，此二聚体与酶反应产物具有相的荧光光谱行为。在不同介质中，二聚体的生成速率及其荧光强度明显不同。     

用温度敏感高分子为载体的激光光声免疫分析及其应用

将单克隆抗乙肝表面抗原体抗与温度敏感高分子聚Ｎ－异丙基丙烯酰胺连接，中液相中与抗原、酶标抗体反应，通过热沉淀实现与游离酶标体抗体的异相分离。高分子载休的引入能减少非特异性吸附，罗大相载体聚乙烯酶标板更有利于激光光声技术高灵敏度优势的。同时，采用０．５％的十二烷基硫酸钠水溶液作显色终止剂，易与Ｈｅ－Ｎｅ激光波长匹配，实现了对低值乙肝表面抗原阳性血清的检测。     

铁（Ⅲ）卟啉轴向配位反应热力学研究

对金属卟啉与咪唑类物质的轴向配位反应的研究始于对生物化学酶的结构模拟。随着卟啉化学研究的深入和扩展,人们逐渐发现轴向配体的作用不容忽视。对各类卟啉体系,轴向配体的存在与否常会产生很大的影响。因此,研究卟啉化合物的轴向配位反应具有重要意义。     

以变色酸2R为底物测定辣根过氧化物酶的研究

变色酸 2R(CT2R)是一种具有电化学活性的物质 ,在碱性条件下 ,该物质在滴汞电极上 - 6 6 0mV(vs.SCE)左右产生还原波 ,加入H2 O2 和辣根过氧化物酶 (HRP)后 ,该物质被氧化生成具有非电化学活性的物质 ,导致溶液中游离的CT2R浓度降低 ,相应还原波波高降低 ,HRP在一定含量范围内与伏安峰的降低值具有良好的线性关系。通过测定波高的降低值可测定HRP ,测定游离HRP的线性范围是 4 .0× 10 -5～ 4 .0× 10 -3 g/L。对酶促反应的动力学进行了研究 ,反应的米氏常数Km =1.38mmol/L ,最大反应速率Vmax=5 3.9nA/min。     

细菌生长速率的测定及其热力学性质的研究

细菌生长是一系列非常复杂的生化反应的结果。为了使问题简化、便于采用物理化学的理论和方法对其进行处理,可假设细菌在培养基中的分裂、生长分为三个阶段进行。首先是底物进行扩散,并与细菌表面的活性物质进行作用(如输运过程);其次是细菌将底物吸收到细胞内形成细胞-底物复合物;然后是细胞-底物复合物在其内部一系列酶的作用下产生酶促反应,进行分裂生长和排出代谢产物。现用下式表示:     

模拟过氧化物酶催化性能的研究

过氧化物酶(POD)能催化H₂O₂氧化一系列氢供体(DH₂)转化成氧化型供体(D)。氢供体可以是邻联二茴香胺、4-氨基安替比林和苯酚及某些染料隐色体等。这类反应不仅可提供检测H₂O₂的灵敏方法,还可与产生H₂O₂的其它酶反应系统联用,测定葡萄糖、半乳糖、氨基酸、尿酸及胆醇等生物物质。     

偶合反应伏安酶联免疫分析测定人血清乙型肝炎E抗体的研究

本文提出用竞争性抑制偶合反应伏安酶联免疫分析法测定人血清乙型肝炎Ｅ抗体（ＨＢｅＡｂ）方法基于酶标ＨＢｅＡｂ辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）催化Ｈ２Ｏ２氧化邻联甲苯胺（ＯＴ）的反应与邻联甲苯胺氧化产物在电极上的还原反应相偶合，测定标记在ＨＢｅＡｂ上ＨＲＰ量，以求得抑制免疫反应的乙型肝炎Ｅ抗体含量本法测定酶标ＨＢｅＡｂＨＲＰ及ＨＢｅＡｂ的灵敏度均高于经典的ＥＬＩＳＡ光度法方法用于病人血清样品分析，与ＥＬＩＳＡ光度法对照，其相关性很好     

生物素-亲和素放大酶联免疫吸附法测定氯胺酮

建立了检测氯胺酮的生物素-亲和素放大酶联免疫吸附测定法(BA-ELISA)。实验最佳测定条件:抗原包被浓度为2.0mg/L、氯胺酮单克隆抗体浓度为10.2mg/L,生物素化羊抗小鼠IgG(Biotin-IgG)和酶标链霉亲和素(SA-HRP)的最佳反应浓度分别为0.29和1.0mg/L。在此优化条件下,方法的线性范围为0.1～1000μg/L;检出限为0.03μg/L。氯胺酮生物样品的加标回收率为94%～102%。与酶标二抗体系ELISA法相比,BA-ELISA具有更高的灵敏度,适于低浓度氯胺酮的检测。     

微生物诱导碳酸钡沉淀

利用巴斯德芽孢杆菌繁殖过程产生的酶化作用,适时引入Ba2+,形成碳酸钡沉淀,通过用X射线粉末衍射(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、综合热分析仪(DSC-TG)对碳酸钙样品形貌、结构、热性质等进行表征。结果表明,巴斯德芽孢杆菌诱导沉淀的碳酸钡与纯水中的不同,含有少量有机物质,晶形转变温度降低。主要为花簇状和放射状,属于正交晶系。菌体和代谢物在碳酸钡晶体成核、生长及堆积过程中扮演重要的角色。     

不同工艺处理的烟草中游离氨基酸含量的反相HPLC分析

烟草中的含氮化合物对烟草的感官评吸质量和吸者健康都有重要的影响。氨基酸含量与烟草的品质有着密切的关系,是重要的致香前体物质。烟草中氨基酸有20余种。在烟草调制、醇化或发酵、加工乃至燃烧过程中,游离氨基酸与还原糖之间可发生酶催化及非酶催化的棕色反应,即梅拉德反应     

丁卡因在玻碳电极上的伏安行为及测定

对丁卡因在玻碳电极上的伏安行为进行了研究，发现在０．１ｍｏｌ／Ｌ高氯酸溶液中，于１．０４Ｖ左右产生一个与丁卡因叶良好线笥关系的阳极氧化伏安峰，大多数金属离子和２０多种有机生物物质不干扰测定。方法用于注射针剂和加标尿样中丁卡因的测定，结果满意，对电极反应也进行了初步探讨。     

人血多形核白细胞呼吸爆发中活性氧与活性氧模拟酶的关系研究

用多形核白细胞－鲁米诺化学发光法测定具有超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和过氧化氢酶（ＣＡＴ）双功能模拟酶－金属卟啉（四磺酸基苯基铁卟啉、四磺酸基苯基铜卟啉、四磺酸基苯基锰卟啉、四磺酸基苯基钴卟啉）对呼吸爆发所产生的活性氧的影响,结果表明,模拟酶对爆发反应中细胞发光产生抑制,即对活性氧有清除作用;且同一物质随着浓度由１０＾－７－１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ,上升而增强。     

碱性条件下L-抗坏血酸自降解的非酶褐变研究

在偏碱性溶液环境下,对L-抗坏血酸(ASA)自降解过程的非酶褐变反应进行了研究。考察了反应因素(温度、时间、p H值)对其非酶褐变过程的影响,主要考察了各反应因素对ASA自降解过程中的底物消耗及生成物(挥发性产物、无色中间体和褐色物质)生成的影响;利用经典动力学模型分析了ASA自降解过程中底物消耗、生成无色中间体和褐色物质的动力学特征。结果表明:较高温度、较长时间和较强碱性均会促进ASA的自降解,同时也有利于挥发性物质、无色中间本和褐色物质的生成。在碱性条件下挥发性产物主要为呋喃类化合物。ASA非酶褐变自降解过程的动力学表现为其自降解符合一级动力学特征,而无色中间体和褐色物质的生成符合零级动力学特征。     

分子模拟计算研究辅酶B12及其类似物光解产生的自由基加合物与β-环糊精的作用

辅酶Ｂ１２,即５′－脱氧腺苷钴铵素（ＡｄｏＢ１２）,作为辅因子参加生物体内多种酶反应的关键步骤是在酶诱导下ＡｄｏＢ１２的Ｃｏ－Ｃ键断裂产生５′－脱氧腺苷自由基ＡｄｏＣＨ２·。与许多Ｂ１２有关的酶反应相似,辅酶Ｂ１２及其类似物的光解反应也产生Ｂ１２ｒ和...