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相似文献
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1.
在生物及生物技术的研究和应用中,RNA的提取已经成为重要的基本实验技术。本研究对CTAB法提取RNA的过程中影响因素进行分析,尝试采用改良的CTAB方法从动物组织中提取总RNA。通过紫外分光光度法和凝胶电泳检测分析可知,采用该方法提取的总RNA纯度高,完整性好,电泳条带完整清晰,可以进行下一步的分子生物学研究。结果表明,用改良的CTAB法提取动物组织RNA是切实可行的,它具有简便、实用性强的特点,是一个符合分子生物学实验教学要求的新方法。  相似文献   

2.
从石蜡包埋组织高效提取RNA的优化及Shh的RT-PCR检测   总被引:2,自引:0,他引:2  
从石蜡包埋组织中提取高质量的RNA是对肿瘤实体组织进行分子生物学研究的重要方法之一.利用人的胃肠道肿瘤材料,通过蛋白酶K消化,经酚-氯仿、异戊醇抽提去蛋白及异丙醇沉淀,优化了1套从石蜡包埋组织中提取RNA的方法,提高了所提取RNA的质量和产量.所得RNA经电泳检测,并进行RT-PCR扩增Shh(sonic hedgehog)信号分子,结果良好.故认为此提取RNA的方法值得推广.  相似文献   

3.
富含多糖番茄果实组织中总RNA的有效提取方法   总被引:8,自引:0,他引:8  
本文介绍了一种从富含多糖的番茄果实组织中提取总RNA的有效方法,其产率约为每200 m g组织80μg RNA,并且RNA的吸光值的比值A260/A230在1.5~2.0之间,A260/A280在1.6~1.9之间.提取的RNA能够用于RT-PCR反应.这种方法也能有效地应用于富含次级代谢产物的真菌总RNA提取.  相似文献   

4.
5.
香蕉不同组织中总RNA提取方法的研究   总被引:9,自引:0,他引:9  
针对香蕉组织中多糖、多酚等次生物质含量高的特点,以香蕉根、茎、叶、果实为试材,对其总RNA提取进行研究.比较了SDS法、改良SDS法、改良CTAB法和Trizol试剂盒法提取总RNA的效果,结果分析表明:改良SDS法能从香蕉根、茎、叶中获得质量高、完整性较好的总RNA,而改良CTAB法对果实的提取效果较佳,所得A260/A280均高于1.8,A260/A230大于2,0,28 S rRNA带的亮度约是18 S rRNA的2倍.其产率在根、茎、叶中均在400μg·g^-1以上,果实中可达49.34μg·g-^1.以上2种方法所得的总RNA均能满足RTPCR、Northern blot和cDNA文库建立等分子生物学研究,且具有快速、简便易行、成本较低的特点,适合于富含多糖、多酚的植物材料.  相似文献   

6.
一种从骨组织提取RNA的新方法的研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
1 材料与方法1 .1 主要试剂 异硫氰酸胍、β -巯基乙醇、DEPC为 Promega产品 .十二烷基磺酸钠、琼脂糖均为本室进口试剂 .其它试剂均为国产分析纯 .1 .2 仪器 贺利台式冷冻离心机 ( centrifuge 1 7RS) ,冰冻切片机 ( AO histostat microtomeAmerican) ,紫外分光光度计 (日本岛津 UV2 5 0 1 ) ,L KB激光密度扫描仪 ,内切式组织匀浆器( ZS83- 1型 ,浙西机械厂 ) .1 .3 骨标本的制备 取材前室内紫外灯照射 1 h.组织剪、包埋盒、冻存管、镊子、刀片均用75 %酒精浸泡 1 h后 ,0 .1 %焦碳酸二异酯 ( DEPC)浸泡 2 h,再用灭菌水冲洗…  相似文献   

7.
RNA提取过程中DEPC的毒性   总被引:1,自引:0,他引:1  
在RNA提取的过程中,如采用DEPC进行无RNA酶处理,DEPC可能对人体产生毒害。通过查阅国际大量毒理学食品保健以及环境保护等相关法规资料,对DEPC性质及其毒性进行了分析,并总结得出DEPC对人体的毒害结论。  相似文献   

8.
目的:寻求从福尔马林固定的癌组织中提取RNA的合理方法.方法:运用Trizol法从福尔马林固定的胃癌组织中提取RNA,用分光光度计测定RNA的产量和纯度;通过RT-PCR对不同长度的管家基因-actin进行扩增.结果:100 bp和300 bp的-actin均能顺利扩增出特异性条带,500 bp的-actin未能扩增.结论:用Trizol法从福尔马林固定的癌组织中提取RNA是可行的;进行RT-PCR时应尽量设计小片段引物(100~300 bp)以获得更好的扩增效果.  相似文献   

9.
一种从富含次生物质的植物中提取RNA的方法   总被引:14,自引:0,他引:14  
该实验以草莓为材料,建立了一种适合于提取富含多酚、多糖等次生物质的植物RNA的方法,此方法在酸性条件下用苯酚/氯仿/异戊醇进行抽提去除DNA,并用乙二醇丁醚来除去植物组织提取液中的多糖、多酚等次生物质,得到了质量很好的RNA样品。  相似文献   

10.
从动物固定标本中提取DNA方法研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
作者主要介绍了一种在福尔马林固定标本中提取DNA的方法,利用该方法从固定了半年以上的标本中提取到大于2kb的DNA片段,并利用通用引物获得了16S rRNA的扩增片段.并讨论了福尔马林固定标本中提取DNA该注意的问题.  相似文献   

11.
作者借鉴高山红景天总RNA提取方法,成功提取了蓖麻的总RNA,并对出现的问题进行了分析.  相似文献   

12.
日本沼虾血淋巴RNA提取方法的改进   总被引:1,自引:0,他引:1  
介绍了一种提取日本沼虾(Macrobrachium nipponensis)血淋巴RNA的改进方法.针对日本沼虾血淋巴中RNA含量较少,易被降解的问题,比较了常规的血淋巴RNA提取方法和改进后的RNA血淋巴提取方法,并进行了血淋巴酚氧化酶的扩增.结果表明,用改进的方法提取的RNA降解少,含量多,纯度高,可用于进一步分子生物学的操作,有着重要的实际意义.  相似文献   

13.
从青霉菌丝体中提取核糖核酸的研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
文中研究了从青霉菌丝体中提取纯化核糖核酸的工艺条件。采用盐碱法破碎细胞,调抽提液 pH值至4.6以沉淀部分蛋白质,然后用中性蛋白酶AS1.398处理分级沉淀后的上清液,详细考察了蛋白酶用量、反应温度、初始pH值和反应时间对核酸纯度的影响。酶解液经截留相对分子质量为6.0×104的超滤膜过滤后,核糖核酸的纯度和得率分别是72.1%和0.42%。  相似文献   

14.
RNA的提取及3种RNA提取试剂盒的比较   总被引:3,自引:0,他引:3  
概述了RNA的提取以及一些注意事项,并对实验室常用的3种RNA提取试剂盒进行了比较。  相似文献   

15.
16.
新疆核桃种隔膜中棕色素的提取及理化性检验   总被引:3,自引:0,他引:3  
本介绍了核桃种隔为原料,用蒸馏水浸泡提取,棕色素的研究。实验结果表明,光照,各种食品添加剂对色素影响不太大,但Cu^2 和Fe^3 离子对色素的影响较大。  相似文献   

17.
免疫沉淀法分离纯化感染细胞中的甲肝病毒RNA   总被引:1,自引:0,他引:1  
本研究采用抗血清(多抗血清)沉淀甲肝病毒,并用盐酸胍酸性酚,氯仿一步法分离纯化病毒RNA.此方法能排除非病毒RNA的污染,操作简单,要求条件较低,RNA的纯度和完整性都较好  相似文献   

18.
以白芥为材料,分别采用柱式植物总RNA抽提纯化试剂盒法、RNAisoPlus法和CTAB-异丙醇法3种方法提取白芥叶片总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计及RT-PCR反应进行检测,最后对3种方法得到的结果进行分析比较.结果表明,RNAisoPlus法提取出的总RNA条带与其他方法相比更为清晰,A260/A280比值介于1.9~2.1之间,该方法更适合用于白芥叶片总RNA的提取.  相似文献   

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