辣根过氧化物酶催化动力学光度法测定汞

基于辣根过氧化物酶催化H2O2-4-氨基安替比林-2,4-二氯苯酚的反应中,汞离子对于酶催化的抑制作用,建立了用动力学分光光度法测定Hg2 新方法.测定范围为1.0-5.0μg/mL,检出限为5.78×10-7g/mL,优化了测定Hg2 的实验条件并讨论了共存离子对测定的影响.本法简单、快速.     

辣根过氧化物酶催化过氧化氢氧化邻苯二胺反应动力学的研究

本文对辣根过氧化物酶催化过氧化氢与氧化邻苯二胺合成 2 ,3 二氨基吩嗪反应动力学进行了研究。首先是用辣根过氧化物酶催化过氧化氢氧化邻苯二胺合成了氧化产物 ,并且对反应条件、酸度 ,温度 ,邻苯二胺 ,过氧化氢与辣根过氧化物酶不同的摩尔比等进行了研究。用紫外 可见光谱、红外光谱以及元素分析法对该产物进行了表征 ,结果表明 ,其产物为 2 ,3 二氨基吩嗪。然后用紫外可见分光光度法 ,根据Michaelis Menten(M M )方程研究了辣根过氧化物酶催化过氧化化氢氧化邻苯二胺反应 ,选择了最佳实验条件 ,确定了最大吸收波长λ =4 4 6 3nm ,pH =4 85和反应温度t=2 2℃ ,进行了一系列实验 ,从而确定了体系的反应级数 ,其结果表明 ,这个反应可以视为单底物反应进行处理 ,并且在实验和理论方面作出了论证 ,并且还求出Km =6 0 2× 10 - 3mol·L- 1 ,vm =7 2× 10 - 2 ΔA·min- 1 。     

烟草过氧化物酶Ⅰ的紫外-可见吸收光谱研究

通过对烟草过氧化物酶Ⅰ (TOPⅠ )的紫外 可见光谱进行分析 ,证实了TOPⅠ为一含血红素的酸性蛋白酶。发现pH变小 ,TOPⅠ的在紫外 可见区的Soret带特征吸收峰出现蓝移 ;当pH变大时 ,则产生红移。变性剂脲对TOPⅠ的紫外 可见光谱的影响结果表明 ,当加入变性剂后 ,变性的TOPⅠ可能发生了去折叠的结构变化 ,使肽链充分伸展。向脱铁烟草过氧化物酶TOPⅠ加入相同量的Fe(Ⅲ ) ,Fe(Ⅱ ) ,Cu(Ⅱ ) ,Zn(Ⅱ ) ,Co(Ⅱ ) ,Ni(Ⅱ ) ,Sn(Ⅱ )金属离子后 ,发现除Fe(Ⅲ )基本不变外 ,溶液的UV Vis谱图发生变化 ,Soret带的最大特征吸收峰均发生不同程度的蓝移 ,且峰强减弱 ,α带和 β带特征吸收峰位置基本不变 ,但二者的相对峰强均略有减弱。     

罗丹明染料荧光猝灭法测定超痕量辣根过氧化物酶

在HAC-NaAC缓冲液中,辣根过氧化物酶催化H₂O₂氧化KI生成I₂,过量的I-可与I₂结合形成I-₃,而I-₃分别与罗丹明S(RhS), 罗丹明G(Rh6G), 罗丹明B(RhB)和丁基罗丹明B(b-RhB)反应导致四体系在580,580,554和554 nm处的荧光强度降低。在选择条件下,对于RhS,Rh6G,RhB,b-RhB四体系,辣根过氧化物酶的浓度分别在8～6 400,40～4 000,32～3 200,40～6 400 pg·mL-1范围内与其荧光猝灭强度成线性关系,其检出限分别为3.2,3.0,2.4,3.7 pg·mL-1。其中RhS催化体系较好,用于酶联免疫乙肝试剂盒中辣根过氧化物酶活力的测定,结果比较满意。     

叠氮化钠对辣根过氧化物酶的荧光猝灭机制的研究

研究了辣根过氧化物酶 (HRP)和叠氮化钠 (NaN3 )作用前后的荧光光谱变化。探讨了HRP的荧光猝灭机制 ,首次运用了HRP的荧光猝灭行为确认了HRP和NaN3 之间生成了配合物。计算了HRP和NaN3 之间生成的配合物的形成常数为 7 9× 10 8L·mol-1,结合位点数为 1。研究还发现 ,NaN3 与HRP的结合 ,影响了分子构象 ,使酪氨酸和色氨酸残基的微环境受到不同程度的影响。     

双酶偶联催化分光光度法测定血清次黄嘌呤

依据黄嘌呤氧化酶和辣根过氧化物酶催化反应的特征,研究了以黄嘌呤氧化酶-辣根过氧化物酶-苯酚-4-氨基安替比林为反应显色体系,建立了检测血清和组织中次黄嘌呤浓度的新方法。通过对该测定体系影响因素的考察,确定最佳反应条件为：黄嘌呤氧化酶(XO, EC 1.2.3.22) 0.32 U·mL-1,辣根过氧化物酶(HRP) 7.0U·mL-1,4-氨基安替比林(AAP) 1 mmol·L-1,苯酚(PA) 6 mmol·L-1溶于100 mmol·L-1 Tris-HCL缓冲液(pH 8.3);反应温度为37 ℃,保温时间为8 min;检测波长为508 nm。测定次黄嘌呤浓度的线性范围为0.2～3.0 mmol·L-1,线性关系良好(r=0.997 9),检测限为0.05 mmol·L-1。方法操作简单易行,测定结果准确可靠。可有效应用于普通实验室和常规临床血液生化检测。     

一种可用于单色光谱检测的CMOS层叠传感器

一种可以对单色光谱进行检测的并基于标准CMOS工艺的新型器件结构进行了制作和测试.它的基本原理是:利用器件本身两层结构对偏蓝色的短波长光和偏红色的长波长光的不同响应特性,得到器件响应值对于波长的单调递增曲线并可由此得到输入光谱的单色波长信息.文章中介绍了器件的基本工作原理,设计制作了实验性器件并对其特性曲线进行了实际的标定,最终给出了可用于单色光谱测量的器件响应和波长的对应曲线.     

高能电子束辐照模式蛋白辣根过氧化物酶的损伤作用研究

作为一种载能粒子,高能电子束具有能量利用率高、贯穿深度大、方便实用等优点,可以用来杀灭细菌和抑制病原体生长,因而被广泛应用于食品保质储藏和医疗卫生等方面。但是,对于高能电子如何与生物及其生物分子发生作用,以及作用的过程、方式、效果和机理等方面,人们还缺乏深入、细致的了解。本研究利用高能电子束辐照模式蛋白酶辣根过氧化物酶(HRP:horseradish peroxidase),研究了电子束对它的损伤作用和机理。研究发现,电子束损伤HRP 的方式主要通过羟基自由基破坏蛋白质肽链,同时,辐照产生的活性氧物质也会作用于HRP 分子活性中心引起其辅基血红素的损伤。这与我们以前研究的等离子体放电辐照HRP其损伤主要通过H2O2 作用于变性蛋白血红素引起酶失活有所不同。进一步,通过利用活性氧和自由基清除剂的方法,具体分析和阐明了电子束辐射条件下同活性氧和自由基在损伤HRP 过程中所起的破坏作用。As one kind of charged energetic particles, high-energy electron-beam (e-beam) can kill bacteria effectively; and because of its advantages of low-cost and high-efficiency, e-beam has been widely applied in food sterilization and storage industry as well as biomedical areas. However, currently we still lack the in-depth understanding of the mechanism of the interactions between high-energy particles and biological systems. To this end, we thus initiated the study of e-beam induced damage of horseradish peroxidase (HRP: horseradish peroxidase). Our results revealed that the e-beam induced damage of HRP was mainly through the hydroxyl radical attack on the polypeptide chains, and at the same time, the heme active site of HRP was also injured by the reactive oxygen species (ROS) produced by the electron-beam. This hydroxyl radical damage mechanism is different from the hydrogen peroxide damage mechanism that plays the dominant role in non-thermal plasma treatment as we reported previously. Moreover, by using the ROS and free radical scavengers, we analyzed and identified the major factors that contributed to the HRP damages.     

吡罗红为底物的辣根过氧化物酶催化荧光反应测定葡萄糖

吡罗红在辣根过氧化物酶催化下可被过氧化氢氧化而使其荧光猝灭。在pH 7.2中性介质中,稳态催化速率由酶和底物浓度决定,催化体系服从Michaelis-Menten方程,用Lineweaver-Burk作图法求得米氏常数、最大反应速度、催化常数分别为2.4×10~(-5)mol·L-1,2.5×10~(-6)mol·L-1s-1,75.8 s-1。在最佳反应条件下,荧光F0/F的猝灭程度与过氧化氢浓度在0-3.6×10~(-7)mol·L-1范围内成线性关系,检测限为6.3×10~(-9)mol·L-1;当与葡萄糖氧化酶联用时,可定量检测葡萄糖,线性关系为0-8.0×10~(-7)mol·L-1,检测限为3.4×10~(-8)mol·L-1。方法用于分析人血清中葡萄糖含量,分析结果与苯酚-4-氨基安替比林法基本一致。     

应用圆二色光谱研究电场对辣根过氧化物酶二级结构的影响

辣根过氧化物酶(ＨＲＰ)经不同强度的电场处理,用圆二色光谱研究了电场对辣根过氧化物酶二级结构的影响。结果表明：在1.0～6.0 kV·cm-1范围, 不同强度的电场对辣根过氧化物酶的α-螺旋、β-折叠、β-转角及无规卷曲相对含量的影响程度不同。与对照组相比,处理组的α-螺旋、β-转角和无规卷曲含量降低,降幅范围分别为0.3%～11.4%,1.7%～15.3%和0.9%～20.4%;β-折叠含量增加,增幅范围为0.9%～82.7%。电场作用具有使辣根过氧化物酶的二级结构中α-螺旋、β-转角和无规卷曲向β-折叠转化的趋势。研究结果对解释电场处理种子生物效应具有重要意义。     

Poly(glycidylmethacrylate-co-vinyl ferrocene)-grafted iron oxide nanoparticles as an electron transfer mediator for amperometric phenol detection

An amperometric phenol biosensor was constructed by using poly(glycidylmethacrylate-co-vinyl ferrocene) grafted iron oxide nanoparticles for detection of different phenolic compounds (catechol, aminophenol, phenol, p-cresol, pyrogallol). The poly(glycidylmethacrylate-co-vinyl ferrocene) and nanoparticles were characterized by Fourier transform infrared (FT-IR), X-ray diffraction (XRD) and transmission electron microscopy (TEM). The copolymer grafted iron oxide nanoparticles and Horseradish peroxidase (HRP) were covalently attached on gold (Au) electrode surface. The effect of pH, temperature and characteristic features such as; reusability and storage stability were studied. The electrode showed good response time within ～3 s. The electrocatalytic response showed a linear dependence on the phenolic compounds concentration ranging from 0.5 to 17.0 mM.     

海洋真菌Gliocladium sp.中的甾体和酚类化合物

从山东乳山采集的海洋真菌Gliocladium sp.中分离得到2个甾体化合物和4个酚类化合物,经1H-NMR、13C-NMR和MS等现代波谱手段鉴定它们的结构分别为:麦角甾-5,7,22E-三烯-3β-醇(1)、23-甲基麦角甾-5,7,22E-三烯-3β-醇(2)、3-羟甲基苯酚(3)、4-甲基-1,2-二苯酚(4)、4-(2-羟乙基)苯酚(5)、2-羟基-6-甲基苯甲酸(6)。     

催化分光光度法测定辣根过氧化物酶新方法研究

本文基于微量辣根过氧化物酶 (HRP)对过氧化氢氧化还原型罗丹明B这一显色反应的催化作用 ,建立了一个高灵敏度测定HRP及其酶标记结合物的催化光度新方法 ,探讨了该催化反应体系的反应条件及干扰情况 ,实验表明 β CD能显著增强还原型罗丹明B的稳定性 ,邻苯二胺对该催化反应有催化诱导作用。应用于测定痕量辣根过氧化物酶 ,其检出限为 12pg·mL-1,其线性范围为 15～ 2 5 0pg·10mL-1,RSD为4 2 5 % (n =10 )。     

高密度酚醛泡沫绝热材料的低温膨胀率的测定

着重介绍了用相对比较法膨胀仪 ,在 77K～ 2 93K温度范围内测试高密度酚醛泡沫不燃绝热材料的低温热膨胀率的方法 ,给出了测试结果 ,并进行了误差分析和讨论。     

A Novel and Highly Sensitive Resonance Scattering Spectral Assay for Horseradish Peroxidase Using Cationic Surfactant

A novel and ultrasensitive resonance scattering (RS) spectral assay was proposed for detection of horseradish peroxidase (HRP) activity. It was based on that the HRP strongly catalyze H₂O₂ oxidation of excess I⁻ to form , the resulting combined with four cationic surfactant (CS), including tetradecyl pyridinium bromide (TPB), cetyltrimethyl ammonium bromide (CTMA), cetylpyridinium chloride (CPCM) and tetradecyl dimethylbenzyl ammonium chloride (TDMBA) to produce association particles (TPB-I₃) _n , (CTMA-I₃) _m , (CPCM-I₃)_l and (TDMBA-I₃) _k , which exhibit a strongest resonance scattering peak at 478, 423, 538 and 491 nm, respectively. For the four systems of TPB, CPCM, CTMBA and TDMBA, the HRP activity determined was in the linear range of 0.004–5.6, 0.04–3.2, 0.04–8.0, 0.08–8.0 ng/mL, with a detection limit of 0.0034, 0.040, 0.033, 0.016 ng/mL, respectively. The TPB resonance scattering spectral assay was best and has been applied to the analysis of HRP in real samples, with satisfactory results.     

水分荧光光纤化学传感器

将具有溶致变色特性的４‘－Ｎ,Ｎ－二甲氨基黄酮基团与聚丙烯酰胺膜基体一起共价固定化在石英玻片上,制成了测定水的光导纤维化学传感器。传感是基于水对膜的荧光有强的猝灭作用。文中提出了猝灭方程。传感器具有好的可逆性和稳定性,重复测定含水４．００％和１６．０％的乙醇样品的相对标准偏差分别为０．３３％和０．６０％,这说明传感器还具有好的重现性。传感器用于９５％乙醇中水分的含量测定,结果与气相色谱法一致。     

Dynamics Analysis of a Wireless Rechargeable Sensor Network for Virus Mutation Spreading

Virus spreading problems in wireless rechargeable sensor networks (WSNs) are becoming a hot topic, and the problem has been studied and discussed in recent years. Many epidemic spreading models have been introduced for revealing how a virus spreads and how a virus is suppressed. However, most of them assumed the sensors are not rechargeable sensors. In addition, most of existing works do not consider virus mutation problems. This paper proposes a novel epidemic model, including susceptible, infected, variant, low-energy and dead states, which considers the rechargeable sensors and the virus mutation factor. The stability of the proposed model is first analyzed by adopting the characteristic equation and constructing Lyapunov functions methods. Then, an optimal control problem is formulated to control the virus spread and decrease the cost of the networks by applying Pontryagin’s maximum principle. Finally, all of the theoretical results are confirmed by numerical simulation.     

结构光传感器模型及特性分析

给出了结构光传感器的数学模型，并依此模型详细分析了结构光传感器的各项参量，讨论了这些参量对结构光传感器性能的影响，得到了关于传感器参量和传感器特性之间关系的公式，给出了传感器设计必须遵守的条件。利用所给出的公式可以方便地讨论传感器的性能，对结构光传感器的设计起指导作用。