中枢去甲肾上腺素与电针镇痛的耐受

本文报道大鼠经持续6小时电针后,镇痛作用逐渐减弱,形成电针耐受.电针耐受动物的脑和脊髓内NE的更新十分活跃.脊髓内的NE具有镇痛作用,但长时间电针使NE持续大量释放,可使脊髓神经元对NE的作用发生耐受.此时由脊髓蛛网膜下腔注入NE的前体以加强NE的作用,可部分翻转电针耐受.脑内NE所起的作用与脊髓内NE不同.给大鼠脑室注射α阻断剂可部分翻转电针耐受,说明这时脑内NE功能活动过强,通过α受体对抗电针镇痛.这种对抗作用可能与脑内NE对5-羟色胺神经元的抑制作用有关。     

钙离子在电针镇痛、电针耐受和吗啡耐受发展中的作用

本文研究了Ca~(2+)在电针镇痛、电针耐受和吗啡耐受发展中的作用,同时了解电针耐受发展是否能被蛋白质合成抑制剂抑制。实验结果表明,和吗啡耐受一样,电针耐受动物的脑Ca~(2+)和cAMP水平均明显增高。用蛋白质合成抑制剂茴香霉素(Anisomycin)、放线菌素(Actinomycin)或环己亚胺(Cycloheximide)处理后,电针镇痛耐受发展被抑制,同时使脑Ca~(2+)和cAMP水平降低.从脑Ca~(2+)和cAMP水平的变化看,电针、吗啡和镧系元素引起的镇痛,以及电针和吗啡的耐受发展不仅相似,很可能还有共同的离子基础和作用机理,同时提示蛋白质合成抑制剂阻断电针和吗啡的耐受发展似与新的多肽或RNA合成相关。     

电针耐受时大鼠脑内血管紧张素Ⅱ的生成和释放加速

本文研究表明,电针耐受时大鼠脑脊液中All样免疫活性物质(AII-ir)的浓度增高,脑内AII-ir和AI-ir的含量也明显增高。并观察到,电针1和3h的大鼠脑提取物经分子筛层析,发现大分子前体AII-ir峰明显右移,并出现小分子AII-ir峰。经高效液相层析鉴定,电针后出现的小分子AII-ir峰与AII标准品具有相同的保留时间。结果表明,长时间电针加速了脑内AII的生成和释放,这可能是AII参与电针耐受的机理之一。     

强啡肽在大鼠脊髓内的强烈镇痛作用

本文首次报告,将强啡肽注入大鼠脊髓蛛网膜下腔有强烈而持久的镇痛作用。用辐射热甩尾阈升高幅度和镇痛时程为指标,强啡肽镇痛作用在2.3—18.6毫微克分子范围内呈明确的剂量效应关系。若以等克分子计算,较吗啡的镇痛作用强6—10倍,较另一μ型阿片受体激动剂morphiceptin强65—100倍。应用强啡肽抗血清中提出的免疫球蛋白G可以完全对抗强啡肽的镇痛作用。纳洛酮也可对抗强啡肽镇痛,但作用慢而弱。在急性吗啡耐受的大鼠,强啡呔的镇痛作用依然存在,说明两者不产生交叉耐受。多方面的资料表明,强啡肽在脊髓的镇痛作用可能是通过k型阿片受体而实现的。与脊髓内注射不同,脑室内注射强啡肽并无镇痛作用。     

修饰丝网印刷电极的制备及抑郁小鼠大脑和血液样品中5-羟色胺含量的测定

制备了多壁碳纳米管和壳聚糖纳米复合材料(Multi-walled Carbon Nanotubes and Chitosan Nano-composites,MWCNTs-CHIN)修饰丝网印刷电极(MWCNTsCHIN/SPE),分别采用循环伏安法(CV)和方波伏安法(SWV)考察了5-HT在修饰丝网印刷电极上的电化学特性。在优化条件下,应用SWV法,5-羟色胺在0.30V处可产生灵敏的响应电流,且与其浓度呈线性,线性范围为0.01~1.00μmol/L,线性相关系数R为0.9969,检出限(S/N=3)为0.005μmol/L。用该方法测定慢性不可预见性应激抑郁模型(Chronic Unpredictable Mild Stress,CUMS)小鼠大脑和血液中5-HT的含量,结果表明,氟西汀组与空白组中5-HT的含量相当,模型组中5-HT的含量明显低于空白组(P0.01)。     

Discovery of a Novel 5-HT_(2A) Inhibitor by Pharmacophore-based Virtual Screening

The serotonin 2A(5-HT2A) receptor has been implicated in several neurological conditions and potent 5-HT2A antagonists have therapeutic effects in the treatment of schizo phrenia and depression.In this study,a potent novel 5-HT2A inhibitor 05245768 with a Ki value of (593.89±34.10) nmol/L was discovered by integrating a set of computational approaches and experiments(protein structure prediction,pharmacophore-based virtual screening,automated molecular docking and pharmacological bioassay).The 5-HT2A recept...     

5—羟色胺敏感膜电极的研究 Ⅰ.离子缔合型5—羟色胺膜电极的研制

5-羟色胺(5-HT)与许多疾病的发生和发展有关。应用正交试验,研究了离子缔合型5-HT敏感膜电极的最优化膜组成。筛选了由3种定域体,7种增塑剂组成的213个配方,选定了以四苯硼-5-HT离子缔合物为活性物、磷酸三(2-乙基己基)酯为增塑剂的涂碳PVC膜电极。电极各项性能良好,其线性范围为1.00×10~(-2)～1.58×10~(-5)mol/L,检测下限为4.17×10~(-6)mol/L,斜率为59.7mV/p5-HT。电极寿命超过39天,用混合溶液法测定了体液中可能存在的17种物质的选择性系数。已用该电极测定了牛血小板中的5-HT。     

高效液相色谱法测定血中游离、结合色氨酸及5-羟色胺

5-羟色胺(5-HT)是体内一种重要的生物活性物质,在神经系统中与递质功能密切相关,周围血中的5-HT除其有明显的血管活性外其它功能尚不清楚,但它的测定已广泛用于一些疾病的研究中。血液中的色氨酸(Trp)作为前体可影响5-HT代谢,同样与许多疾病有关;它以游离及结合两种形式存在,两者有不同的生理意义。其分离方法有透析、层析、超滤等。我们现报告一种用饱和硫酸铵沉淀蛋白以分离游离与结合色氨酸,用高效液相色谱(紫外及电化学检测器)测定5-HT及Trp的方法。     

高效液相色谱在生物医药研究中的应用第七讲生物胺的分离和测定（上）——儿茶酚胺、5-羟基色胺及其代谢产物的分离和测定

生物胺是机体代谢反应过程中所产生的胺类化合物,其中研究得较多的有两类:神经递质儿茶酚胺(CA)和5-羟基色胺(5-HT),以及多胺。CA和5-HT的功能与人们的健康和疾病有密切的关系,它们不仅直接参与行为活动(如运动功能、学习记忆等)以及参与血压、心率、呼吸和睡眠等植物神经功能的调控,还与一些功能性疾病如精神分裂症、忧郁症以及器质性病变(如巴金森氏综合症、心血管性疾病等)的出现有关,某些肿瘤如神经母细胞瘤及嗜铬细胞也会导致     

新型Ca2+探针用于5-HT诱导细胞钙动员的机制

采用激光共聚焦技术分别进行了新型Ca²⁺荧光试剂STDIn与Fluo-3对胃底平滑肌细胞的标记及其对胞内游离Ca²⁺浓度变化的响应等特性的研究. 结果表明, 与Fluo-3不同, 新型Ca²⁺荧光试剂STDIn对胞浆Ca²⁺具有靶向性, 是一种真正的胞浆Ca²⁺荧光探针, 对5-羟色胺(5-HT)诱导的胞内游离Ca²⁺浓度变化的响应更灵敏迅速. 应用STDIn对5-HT诱导胃底平滑肌细胞内游离Ca²⁺动员的机制研究发现, L型钙通道拮抗剂Mn9202对5-HT升高[Ca²⁺ ]_i有明显的抑制作用; 使用蛋白激酶(protein kinase C, PKC)抑制剂D-Sphingosine孵育后, 再加入5-HT胞内荧光强度明显升高, 而以磷脂酶(phospholipase C, PLC)抑制剂Compound48/80孵育后, 5-HT则不再引起荧光强度的变化. 表明5-HT通过促进外钙内流和内钙释放使[Ca²⁺ ]_i升高; 在胃底平滑肌5-HT升高[Ca²⁺]_i是通过5-HT₂受体介导的IP₃/Ca²⁺和DG/PKC双信使途径; 5-HT通过L型钙通道促进外钙内流; Mn9202亦能通过拮抗5-HT受体而起到抑制5-HT促胞内钙释放的作用.     

THE IMPLICATION OF CENTRAL SEROTONIN IN ELECTRO-ACUPUNCTURE TOLE

Electro-acupuncture (EA) applied to both legs for 30min raised the tail flick latencyof the rat significantly. This effect of EA analgesia became attenuated and finally disap-peared after repeated EA stimulations, which was termed EA tolerance. EA tolerance and itscross tolerance to morphine analgesia were found to be partially reversed by intracerebro-ventricular injection of 5-hydroxytryptophan (5-HTP), the precursor of 5-hydroxytryptamine(5-HT). However, there was no depletion in cerebral 5-HT, nor was there decrease ofthe number of 5-HT receptors in the brain of the EA tolerant animals. Results obtainedfrom different lines of analysis point to the conclusion that development of tolerance toprofoundly released 5-HT during prolonged EA stimulation may constitute one of themechanisms for EA tolerance.     

5-羟色胺(5-HT)和去甲肾上腺素(NE)重摄取抑制剂药效团模型的建立及比较分析

近年来的研究表明, 去甲肾上腺素(NE)能系统和5-羟色胺(5-HT)能系统可能共同参与了抑郁症的发病机制. 采用Catalyst软件的Hypogen方法, 利用22个不同结构类型的5-HT重摄取抑制剂和19个不同结构类型和活性的NE重摄取抑制剂分别建立了5-HT药效团模型和NE药效团模型, 它们的相关系数分别为0.935, 0.844, 这表明所得到的模型能较好地表征重摄取抑制剂化合物的特征; 此外, 我们还选择了四种不同活性的预测集分别对所建立的药效团模型进行检验, 结果表明所建立的药效团模型具有较好的预测能力. 对这两个药效团模型进行了比较分析, 其结果可以为设计高活性的双重5-HT和NE重摄取抑制剂提供依据.     

高效液相色谱法测定大鼠给药盐酸氟西汀后脑渗析液中的5-羟色胺

建立了高效液相色谱柱前衍生化法测定大鼠腹腔注射(i.p.)给药盐酸氟西汀前后脑渗析液中5-羟色胺(5-HT)的浓度变化情况。在大鼠给药盐酸氟西汀前和给药后不同时间点取其脑渗析液,加入衍生化试剂反应后,以乙腈-20 mmol/L醋酸盐缓冲液(pH 5.0)(体积比为45∶55)（含20 mmol/L辛烷磺酸钠）作为流动相,在Hypersil C18色谱柱 (250 mm×2.0 mm,5 μm)上进行分离,荧光检测波长为λex=330 nm,λem=455 nm。5-HT在浓度为0.25～5.0 nmol/L 范围内线性关系良好(r=0.9991);5-HT的最低定量限为0.25 nmol/L。本法准确可靠、简便,适用于生物样品中5-HT的浓度测定。     

New 3-（4-arylpiperazin-1-yl）-1-（benzo[b]thiophen-3-yl）-2-methylpropanol derivatives：Synthesis and evaluation for dual 5-HT1A/SSRI activities

A series of 3-（4-arylpiperazin-1-yl）-1-（benzo[b]thiophen-3-yl）-2-methylpropanol derivatives were designed and synthesized based on 5-HT1A/SSRI drugs design strategies.The synthesized compounds were evaluated for their dual 5-HT1A/5-HTT activities.     

鼠脑组织中6-羟基-1-甲基-1,2,3,4-四氢-β-咔啉及其相关生物胺的高效液相色谱-电化学检测

建立了大鼠脑组织中6-羟基-1-甲基-1,2,3,4-四氢-β-咔啉(6-OH-MTHβC)、5-羟色胺(5-HT)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量的高效液相色谱-库仑阵列电化学检测(HPLC-ECD)方法。采用的色谱柱为DiscoveryHS F5柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为缓冲液（40 mmol/L柠檬酸+20 mmol/L磷酸氢二钠+0.3 mmol/L乙二胺四乙酸二钠,pH 4.0）-甲醇（体积比为78∶22）混合液,流速为1 mL/min。6-OH-MTHβC、5-HT、5-HIAA在1.0～500.0 μg/L范围内线性关系良好(r>0.9992),检出限分别为0.56,0.26,0.53 μg/L,日内和日间精密度(以相对标准偏差表示)均低于6.1%,回收率分别为87.1%～98.2%,87.0%～95.3%,90.1%～97.7%。用该方法检测新生7 d的SD胎鼠脑内6-OH-MTHβC及5-HT、5-HIAA的含量,发现SD胎鼠在急性酒精中毒8 h后6-OH-MTHβC显著上升(P<0.05);而5-HT和5-HIAA的含量有所下降,但无显著性差异。该法简便、稳定、灵敏度高,适用于测定鼠脑组织中6-OH-MTHβC和5-HT,5-HIAA含量的相关研究。     

电针显著增加大鼠纹状体和垂体中脑啡肽原mRNA含量

电针能增加纹状体、下丘脑和脑脊液中脑啡肽的含量。进一步的研究表明大鼠纹状体内脑啡肽含量的上升伴有其前体和中间体水平的升高。为阐明这些现象,我们运用重组DNA技术测定了大鼠纹状体和垂体中脑啡肽原mRNA的水平。经点点杂交分析(Dot-blot Hybridization) 脑啡肽原 mRNA和人脑啡肽原cDNA探针专一性的结合,30min的电针后电针组大鼠纹状体中脑啡肽原mRNA升高3—5倍。这个增加发生在电针结束1h后,且可持续48h。但垂体中脑啡肽原mRNA则在电针一结束时就能观察到增加约3倍,在电针后1—24h约上升5—6倍。     

新型5-HT重摄取抑制剂的设计、合成及活性评价

在对已知各种结构类型的5-HT重摄取抑制剂分子结构全面分析的基础上, 建立了SSRIs药效团模型. 基于该模型应用UNITY程序对NCI-3D和Maybridge-3D数据库进行三维结构的限制性查询, 在获得的命中结构的信息指导下, 设计合成了3种全新结构类型的化合物, 并完成了初步的药理活性评价. 这些化合物均显示出不同程度的5-HT重摄取抑制活性, 其中5个化合物显示高抑制活性. 哌嗪取代的二苯脒类化合物的结构新颖, 较好地符合5-HT重摄取抑制剂药效团模型, 与SSRIs类化合物三维定量构效关系研究得到的CoMFA模型有较好的适配性.     

1-[2-（2-Methoxyphenylthio） benzyl]-4-arylpiperazines derivatives： Synthesis and evaluation for dual 5-HT1A/SSRI activities

A series of 1-[2-（2-methoxyphenylthio） benzyl]-4-arylpiperazines derivatives was designed and synthesized based on 5-HT1A/ SSRI drugs design strategies. The synthesized compounds were evaluated for their dual 5-HT1A/5-HTT activities. 2007 Ai Jun Li. Published by Elsevier B.V. on behalf of Chinese Chemical Society. All rights reserved.     

高效液相色谱-程序波长紫外检测法同时测定血浆中的色氨酸及其代谢物

建立了一种高效液相色谱-程序波长紫外检测法同时测定血浆中色氨酸(Trp)及其主要代谢产物犬尿氨酸(Kyn)和5-羟色胺(5-HT)。以茶碱为内标(IS),采用BDS-Hypersil-C8柱(150 mm×4.6 mm, 5 μm)分离。流动相为10 mmol/L醋酸钠缓冲液(pH 4.5)-乙腈(94:6, v/v),流速为0.6 mL/min;柱温为25 ℃;紫外检测波长设定: Kyn和IS为360 nm, 5-HT为220 nm, Trp为302 nm。3种物质的平均回收率为87%～113%;线性范围分别为3.97～400 μmol/L(Trp), 0.421～20.2 μmol/L(Kyn), 4.36～980 nmol/L(5-HT);检出限分别为0.134 μmol/L(Trp), 0.0160 μmol/L(Kyn), 2.03 nmol/L(5-HT)。利用该方法对15例抑郁症患者和15例健康志愿者的血浆进行测定,结果表明两组间Trp的代谢存在显著的差异。     

1-（N-（2-（2-Methoxyphenylthio）benzyl）-N-methylamino-3-aryloxypropan-2-ols： Synthesis and evaluation for dual 5-HT1A/SSRI activities

A series of 1-（N-（2-（2-methoxyphenylthio）benzyl）-N-methylamino-3-aryloxypropan-2-ols derivatives were designed and synthesized based on 5-HT1A/SSRI drugs design strategies. The synthesized compounds were evaluated for their dual 5-HT1A/ 5-HTT activities. 2007 Ai Jun Li. Published by Elsevier B.V. on behalf of Chinese Chemical Society. All rights reserved.