川芎嗪对脑缺血下大鼠纹状体区痕量氨基酸类神经递质的影响

采用脑内微透析技术结合激光诱导荧光检测的高效毛细管电泳研究了脑缺血下盐酸川芎嗪注射液对大鼠纹状体区氨基酸类神经递质含量的影响.在优化的分离条件下,各氨基酸在1×10^-6-1×10^-8mol/L的浓度范围内与荧光强度呈良好的线性关系,线性相关系数达到0.99以上,检测限低于1.6×10^-9mol/L,适合于大鼠纹状体区微透析样品中的痕量氨基酸类神经递质的测量.实验结果表明,脑缺血时,使用盐酸川芎嗪注射液可显著降低细胞外兴奋性氨基酸神经递质谷氮酸(G lu)和天门冬氨酸(Asp)的浓度(P<0.05),同时可显著升高抑制性氨基酸神经递质γ-氨基丁酸(GABA)和甘氨酸(G ly)的浓度(P<0.05).这一结果将对阐明盐酸川芎嗪注射液治疗缺血性脑血管疾病的有关机理提供帮助.     

急性力竭运动对大鼠下丘脑氨基酸神经递质的影响

用激光诱导荧光检测的高效毛细管电泳结合微透析技术测定急性力竭运动前后的大鼠下丘脑区细胞外液中的氨基酸神经递质的含量. 实验结果表明, 急性力竭运动后大鼠下丘脑区的细胞外液中的6种氨基酸(精氨酸、甘氨酸、赖氨酸、谷氨酸、丙氨酸、γ-氨基丁酸)有统计意义的增加, 这一结果显示了下丘脑区的氨基酸在应激过程中很可能起着重要的作用.      

急性力竭运动对大鼠下丘脑氨基酸神经递质的影响

用激光诱导荧光检测的高效毛细管电泳结合微透析技术测定急性力竭运动前后的大鼠下丘脑区细胞外液中的氨基酸神经递质的含量。实验结果表明，急性力竭运动后大鼠下丘脑区的细胞外液中的6种氨基酸（精氨酸、甘氨酸、赖氨酸、谷氨酸、丙氨酸、γ－氨基丁酸）有统计意义的增加，这一结果显示了下丘脑区的氨基酸在应激过程中很可能起着重要的作用。     

雄黄染毒后大鼠脑组织中氨基酸类神经递质含量的变化

研究了雄黄对大鼠脑组织氨基酸类神经递质含量的影响.将32只Wistar大鼠随机分为对照组(0.5%CMC-Na)以及低剂量(0.3g/kg)、中剂量(0.9g/kg)、高剂量(2.7g/kg)雄黄染毒组,通过连续灌胃给予雄黄混悬液两周.采用高效液相色谱-柱前衍生化法测定了大鼠脑组织中氨基酸类神经递质含量的变化.结果表明,与对照组比较,低剂量组大鼠脑组织中丝氨酸、甘氨酸和γ-氨基丁酸含量明显增加.中、高剂量组大鼠脑组织中同型半胱氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸和天冬氨酸含量明显比对照组的低.总体而言,雄黄可对大鼠脑组织氨基酸类神经递质产生影响,氨基酸类神经递质可能是雄黄毒性作用的靶点之一.     

鼠脑尾核和海马区微透析液中儿茶酚胺类神经递质的高效液相色谱分析

采用反相液相色谱分离-脉冲安培检测和微透析取样技术,测定了取自鼠脑尾核和海马区微透析液中儿茶酚胺类神经递质的含量。对不同神经活动状态下取得微透析液中肾上腺素含量作了比较,将该法用于测定肾上腺素,灵敏度为25μg/L.     

微透析技术观测不同麻醉深度的大鼠嗅球氨基酸类神经递质变化

本文探讨了使用微透析技术揭示麻醉的神经化学基础的可行性。以水合氯醛为麻醉剂,脑电记录监视脑活动状态,从处于不同麻醉深度的大鼠嗅球中获得微透析样品,经邻苯二甲醛衍生后,利用高效液相色谱-荧光检测对谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)进行了分离分析。结果表明:微透析样品中Glu含量随着麻醉程度的加深逐渐减少,但GABA的含量基本不受麻醉程度的影响,揭示了水合氯醛麻醉过程中对氨基酸类神经递质的影响,并提示微透析是一种可以用于研究麻醉机理和监控麻醉深度的分析技术。     

毛细管电泳-激光诱导荧光测定大鼠血浆内痕量氨基酸类神经递质

用菁色素衍生物 (Cy5 )作为荧光衍生试剂 ,毛细管电泳结合激光诱导荧光分离测定痕量氨基酸类神经递质甘氨酸和谷氨酸。讨论了Cy5浓度 ,缓冲液浓度 ,pH值和反应时间等实验条件对衍生和分离的影响。衍生物的荧光强度和氨基酸的浓度在 7.5× 1 0 - 8～ 3 .5× 1 0 - 6 mol L范围内呈现良好的线性 ,线性相关系数均达到 0 .999。甘氨酸和谷氨酸的最低检出限浓度分别为 3 .3× 1 0 - 9mol L和 1 .0×1 0 - 9mol L。测定了大鼠血浆中甘氨酸和谷氨酸的浓度 ,分别为 (62± 1 4 )× 1 0 - 6 mol L和 (1 9± 2 )× 1 0 - 6 mol L。与其它氨基标记荧光试剂 ,如FITC和TRITC相比 ,Cy5与一级胺反应时间短 ,选择性高     

高效液相色谱-质谱-质谱法测定脑组织中氨基酸类神经递质

建立测定大鼠脑海马组织中氨基酸类神经递质的高效液相色谱-质谱-质谱(LC-MS-MS) 分析方法。海马组织匀浆后, 匀浆液经盐酸正丁醇衍生化反应形成氨基酸丁酯, 利用LC-MS-MS测定γ_氨基丁酸(GABA)、天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)的含量。GABA及Asp 在0.1~ 0.8μmol·mL- 1, Glu 在0.4~ 1.2μmol·mL-1 浓度范围内线性关系良好。GABA、Asp、Glu的回收率分别为95%、112%、109%。本法具有特异性高、灵敏度好、测定快速等优点, 适用于海马组织中的氨基酸类神经递质的测定。     

操作式条件反射训练对大鼠脑海马区游离氨基酸的影响

利用邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生-反相高效液相色谱(HPLC)分离-荧光检测的分析方法测定了海马区细胞外液中游离氨基酸的含量,对少至5μL的微透析液中的18种氨基酸进行了定性和定量分析。当信噪比为3时,各氨基酸的最小检出量在0.5～6.0pmol之间。实验结果表明,操作式条件反射学习训练和与之形成的巩固记忆可使海马区递质氨基酸及其它游离氨基酸的释放和/或代谢量增强。这一结果支持海马是与学习记忆有密切关系的脑神经核团的看法。     

老年性痴呆患者血浆中氨基酸类神经递质的HPLC荧光检测

采用邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生反相高效液相色谱法测定了老年痴呆患者(AD)血浆中4种氨基酸类神经递质(天门冬氨酸、谷氨酸、γ-氨基丁酸、甘氨酸)的含量.用Hanbon反相柱分离,荧光检测器检测;流动相A为四氢呋喃-甲醇-0.05 mol/L磷酸二氢钾(pH 6.0)(体积比2 : 35 : 63);流动相B为90%甲醇;采用二元梯度洗脱.天门冬氨酸、谷氨酸、γ-氨基丁酸、甘氨酸的检出限分别为0.21、0.01、0.05、0.02 pmol/L,在对应的浓度范围内线性关系良好,相关系数为0.997 5 ～0.999 1,峰面积的相对标准偏差分别为1.08%、1.24%、1.12%和1.35%,回收率为98% ～99%.AD患者血浆中天门冬氨酸和谷氨酸的浓度显著高于对照组(P＜0.05),甘氨酸与对照组无显著差异.     

氨基酸分析技术研究的进展

本文回顾了３０多年氨基酸分析技术的研究与进展。着重介绍了样品前处理、分析手段及分析精密度、准确度方面的新进展、新结论与新动向。     

氨基酸5-氟尿嘧啶酯类衍生物的合成及其抗肿瘤活性研究

以N-保护的氨基酸钾盐与1-(ω-溴丙基)-5-氟尿嘧啶和1-(ω-溴丁基)-5-氟尿嘧啶反应,制备了18种氨基酸的ω-(N¹-5-氟尿嘧啶基)-丙醇酯和丁醇酯的盐酸盐,并确定了它们的结构。动物试验的初步结果表明,酪氨酸、苯丙氨酸的3-(N¹-5-氟尿嘧啶基)-丙醇酯盐酸盐对小鼠艾氏腹水癌的抑制率分别为88.1%和86.7%。     

电容法研究卵磷脂/氨基酸/H_2O胶束和囊泡体系

运用电容法研究卵磷脂/氨基酸/H2O胶束和囊泡体系结构与性质.卵磷脂的临界胶束浓度和囊泡生成浓度可由体系电容-卵磷脂浓度关系曲线求得.随着卵磷脂浓度增加,体系电容增加,卵磷脂由胶束形成囊泡.随着氨基酸浓度增加,胶束、囊泡半径增大,体系电容减小.氨基酸能促进卵磷脂形成胶束和囊泡,使得卵磷脂临界胶束浓度和囊泡生成浓度减小,其影响的强弱顺序为组氨酸色氨酸垌甘氨酸.     

氨基酸衍生物催化的不对称Reformastky反应

首次使用侧链上带有配位基因的氨基酸组成的线二肽、环二肽及氨基酸酯作手性配体催化不对称的Reformatsky反应。考察了配体结构、反应底物结构以及反应条件等因素对反应产物ee值的影响。同其它两类配体相比,环肽具有更好的不对称催化效果,其中具有C2对称性的环肽3a效果最好,产物的ee值达到了64％。