薄层色谱讲座第二讲薄层扫描法及影响定量的因素

薄层色谱法是一种简便、快速、灵敏的分离分析方法,但由于仪器自动化程度、分辨率及重现性等方面的不足,较长时期停留在定性及半定量的水平。为了发挥这一技术的优势,七十年代开始为薄层色谱技术的仪器化、高效化、定量化进行了大量工作。目前已进入分离高效化、定量仪器化、数据处理自动化的阶段,从而使薄层色谱技术在色谱领域中又重新被重视起来。这一讲将讨论薄层色谱定量用的仪器及有关内容。     

外标原位扫描定量双向薄层色谱测定氨基酸

本文在利用微晶纤维素—硅胶G薄层板对氨基酸获得了良好的分离基础上,进一步探索了用亚双向分离外标原位扫描定量测定双向薄层色谱上的氨基酸含量的可行性。结果表明此方法较方便可靠,重复性好。(亚双向分离外标校正,就是外标混合液点,一向充分展开分离,而另一向只展开短距离,约1厘米左右)。     

薄层色谱扫描定量分析原理

用于薄层色谱扫描的Kubelka-Munk方程式是测量参数反射比或透射比对定量参数吸光系数的较复杂的非线性函数。不能直接用于定量计算,本文综述了求算其反函数,建立定量分析工作曲线的四种数学处理方法,并对扫描光源、方式、噪音及背景信号作了一些探讨。     

痕量尼莫地平测定的紫外薄层色谱扫描法

以Ｖ氯仿∶Ｖ甲醇∶Ｖ二氯甲烷∶Ｖ正己烷＝２．６∶１．２∶１∶５为展开剂，建立了薄层色谱扫描法测定痕量药物尼莫地平的新方法。其Ｒｆ值为０．４８。扫描波长为３６５ｎｍ，该法的最低检出限为０．００５μｇ，相对标准偏差为２．９４％，工作曲线的线性范围为０．００５～１μｇ。用该法测定了加有尼莫地平的血清和尿样，尼莫地平的平均回收率为９６．７％～１０３％。     

河豚毒素的薄层色谱扫描法测定

河豚毒素(Tetrodotoxin,简称TTX)是存在于河豚鱼类卵巢和肝脏等组织的一种天然剧毒物质。其化学结果如下:     

薄层扫描色谱分离测定轻稀土

H.Specker等曾用硅烷化硅胶薄层色谱分离稀土元素,陈永熙等报道了薄层——吸光度测定法。本方法用低活性硅胶在异丙醚:四氢呋喃:磷酸三丁酯:浓硝酸=10:6:1:1(体积比)溶液中连续展开分离了轻稀土,用扫描仪进行了原位测定,从而提高了灵敏度,简化了步骤,缩短了测定时间。 本试验用光谱纯轻稀土氧化物配成10毫克/毫升的溶液,取镧、铈溶液各3毫升,镨、钕、钐溶液各1毫升,分别加1毫升水,以配制稀土标准溶液。展开剂用重蒸处理的异丙     

薄层色谱扫描法测定复印纸中单糖的研究

建立了通过薄层色谱扫描法测定复印纸样品水解液中的单糖含量鉴别纸张的新方法。复印纸样品水解后点样在以丙酮处理过的硅胶G薄层板上,以V(正丁醇)∶V(乙酸乙酯)∶V(异丙醇)∶V(乙酸)∶V(吡啶)∶V(水)=7∶20∶12∶7∶6∶5为展开剂,以苯胺-草酸为显色剂,测定了单糖的Rf值,以双波长反射吸收锯齿扫描测定(λS=510 nm,λS=610 nm),外标法定量。该法的线性关系较好,木糖和葡萄糖的检出线分别为4.1、2.5 ng,混合单糖标准品在同一薄层板上的峰面积的相对标准偏差(RSD)为2.3%和2.1%,两种单糖的样品加标回收率为98.09%和98.18%。该方法具有分离效果好,操作简便,可用于复印纸样品水解液中两种单糖的同时测定,从而为法庭科学中复印纸的检验提供了可靠的依据。     

定量薄层色谱法的现状与展望

今天,薄层色谱法是指仪器化高效薄层色谱法。它已成为公认的、应用广泛的通用分析方法。1989年创办了国际性薄层色谱杂志(J.Planar Chromatogr.—Modern TLC)。在涉及分离分析内容的出版物中,几乎都能找到有关薄层色谱法的章节     

薄层色谱讲座第一讲薄层色谱法的基本技术

薄层色谱法(Thin-Layer Chromatography,简称TLC)是Kirchner等人在五十年代从经典柱色谱法及纸色谱法的基础上发展起来的一种色谱技术。六十年代后,Stahl等人对薄层色谱法的标准化、规格化及扩大应用等方面进行了许多工作,使该法日趋成熟。薄层色谱法具有设备简单、操作方便、分离快速、灵敏度及分辨率高、显色剂选择性大,以及制备薄层载量较纸色谱大,而切割色带较柱色谱方便等优点。因此,在分离分析及小量制备工作中基本取代了纸色谱法及经典柱色谱法。     

洗脱法制备薄层色谱

前言色谱是一种有效的分离手段,但分离后的组分一般色谱自身不能定性,定性要借助于标准样品或者其它仪器。薄层色谱对于气相色谱和液相色谱而言它是开放床,可以直接对分离组分显色定性。若分析未知样品,或者又无标样时,就需要把分离的各个组分从薄层板上提取下来,用其它仪器如红外光谱、紫外光谱、质谱、核磁共振波谱测定结构。应用制备薄层色谱提纯或者制备少量样品是很必要的。制备薄层色谱     

同时测定体液中咖啡因和茶碱的薄层色谱扫描法

研究了同时测定血清、尿样中的咖啡因和茶碱的薄层色谱定量法。在ＧＦ２５４硅胶板上，用乙酸乙酯－氨水（Ｖ乙酸乙酯∶Ｖ氨水＝９６∶４）的二元展开体系能将这两种生物碱有效地分离。其Ｒｆ值为咖啡因０．４６，茶碱０．１６。分离后的试样用薄层色谱扫描仪进行扫描定量，测定波长２７２ｎｍ，线性范围咖啡因０．００９７～１．９４μｇ，茶碱０．００９０～１．８０μｇ。血清及尿样的加标回收率在９５．８％～１０６．５％之间，相对标准偏差２．９５％～３．５０％。本法较为简便、快速、准确     

薄层色谱扫描法测定光诱导反应生成的N-(α-吡啶基)咔唑

近年来,有机化学家对单电子转移的自由基链式亲核取代反应——S_(RN)1进行了广泛的研究。在这一反应中,由于作为亲核体的有机氮负离子的亲核性较弱,使反应产率低且不易分离,给产物的定量分析工作带来困难,从而影响了对该反应机理的探讨。为此,我们用薄层色谱扫描法对有机氮负离子参与的光诱导S_(RN)1反应产物的测定进行了研究。本工作对由咔唑钾氮负离子与α-溴代吡啶进行S_(RN)1反应的产     

薄层色谱扫描法测定乙氧硬化醇

应用薄层色谱法测定制剂中乙氧硬化醇的含量.测定中采用CS-930型双波长薄层色谱扫描仪,将由硅胶G及羧甲基纤维素钠溶液制成的浆状液均匀涂布于色谱板上,涂布薄层的大小为10 cm×10 cm.晾干后,置于105 ℃控温的烘箱中活化30 min,用毛细管定量点样管将试样及标准的乙氧硬化醇溶液点于薄层板上,每点溶液的体积为5μL.经展开和晾干后,将试样点及标准点置于碘蒸气中显色.显色后立即取出,密封,并放置30 min后按试验方法进行单波长扫描,选择显色物的吸收峰430 nm作为测定波长.点面积的积分值和点浓度在10～50 μg/点之间呈线性关系,连续测定6次,计算测得结果的RSD值为1.28%,5次测定所得的回收率平均值为100.3%.     

苦荞叶片中芸香甙的薄层色谱定量研究

根据芸香甙的理化性质，建立了一种测定植物样品中芸香甙含量的薄层紫外扫描法，采用硅胶ＧＦ２５４薄层板，样品经甲醇提取浓缩后点样，展开剂为乙酸乙酯－甲酸－水（８＋１＋１）。用薄层色谱扫描仪在波长３５５ｎｍ处测定芸香甙的吸收强度并直接定量。该法操作简便，灵敏度高，定量准确，结果稳定，应用于苦荞叶片中芸香甙含量测定，得到良好结果，线性范围为０～２．０μｇ／μＬ，斑点的最低检出限为５．０ｎｇ，回收率１０２％     

扫描薄层色谱法测定胆结石的结合胆汁酸

在扫描薄层色谱法测定胆结石中游离胆汁酸含量工作的基础上,进一步建立了结合胆汁酸的扫描薄层色谱测定法,并对人胆结石中含量进行了测定。实验部分 1.样品和试剂: 胆结石样品:外科手术取出的胆结石44份,用自来水清洗后空气中干燥。红外光谱(溴化钾压片)测定结果表明其中有胆红素钙结石16份,胆红素钙胆固醇结石4份,胆固醇结石20份,碳酸钙结石4份。标准液:将牛磺胆酸TCA、牛磺脱氧胆酸TDCA、牛磺鹅脱氧胆酸TCDCA、甘氨胆     

色谱中分离不完全峰的定量研究——双检测器定量法(Ⅰ)

应用Knauer高效液相色谱仪中的双检测器(Dual detector)对分离不完全的组分(R<1)具有不同的响应值(或定量因子),求解线性联立方程进行定量.选用分离度R=0.4的蒽和菲及R=0.16的间-二甲苯和对-二甲苯作为样品,得到较为满意的结果.此法原则上也适用于气相色谱.     

薄层色谱综合分离程度的定量量度

薄层色谱对多元组分的分离程度,目前常用信息量~[1]来度量.但由于计算信息量时需人为地固定R_f值的分段,且认为同一区段内的R_f值等同,而不考虑每相邻两组分的R_f差值,也忽略了同一R_f区段内不同R_f值的细微差异.同时,由于薄层色谱分离的信息量并非连续函数,它只能取很有限的若干个分立值.因此,导致有时相同的信息量值却对应着相去甚远     

两种薄层色谱直接拆分美托洛尔的方法研究

β-受体阻断药物美托洛尔有两个对映异构体,其药理学、毒理学及药代动力学具有极大的差异。研究建立了以D-10樟脑磺酸铵作为流动相手性离子对添加剂拆分美托洛尔对映体的薄层色谱方法,其最佳色谱条件为:D-10-樟脑磺酸铵溶液(0.17mmol/L,pH7.5)/二氯甲烷/甲醇(0.3/2.06/0.64,V/V/V),室温(15℃)下预饱和30m in,样品pH为8.0;研究建立了以β-环糊精固载薄层色谱拆分美托洛尔的方法,最佳色谱条件为:按硅胶GF254∶β-环糊精质量为30∶1的比例铺板,甲醇/二氯甲烷(0.87/2.13,V/V),室温(17℃)。两种方法均具有操作简便、经济、重现性好、结果可靠的特点。     

薄层色谱扫描法同时测定增效联磺片中三组分含量的研究

提出了增效联磺片中磺胺甲基异唑（ＳＭＺ）、磺胺嘧啶（ＳＤ）及甲氧节胺嘧啶（ＴＭＰ）三组分薄层色谱同时测定的新方法。该法以水饱和的乙酸乙酯－氯仿（２：１）的混合溶剂为展开剂,在硅胶ＧＦ＿（２５４）板上将被测各组分分离后,直接进行薄层色谱扫描测定,操作简便、快速,灵敏度高,重现性好。