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相似文献
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1.
该书是第一部全面和系统地论述采用液相色谱对变性蛋白折叠并同时进行复性的专著。其内容涉及蛋白折叠液相色谱的原理、方法、设备、典型实验及其在化学、化工、生物化学、分子生物学、基因工程及生物制药等方面的应用。除了对蛋白的分子结构及用于变性蛋白折叠的一般方法进行简要介绍外,该书主要论述将液相色谱用于变性蛋白折叠、分子构象变化及其工业化中所遇到的新理论、新方法、新设备和新技术。该书可供化学化工、生物化学、生物分子学、基因工程及生物制药等领域科研人员、工程师参考,也可作为大专院校相关专业教师和研究生用书。该书…  相似文献   

2.
基因工程中的液相色谱   总被引:9,自引:0,他引:9  
刘彤  耿信笃 《色谱》2000,18(1):30-34
 对液相色谱用于基因工程生产蛋白质分子构象、变性蛋白的复性、蛋白折叠中间体等方面的研究进展,以及液相色谱在基因工程样品的质量 检验、制备方面的新进展分别加以评述。全文引用了42篇文献。  相似文献   

3.
用疏水色谱复性并同时纯化蛋白质的机理及其应用   总被引:13,自引:0,他引:13       下载免费PDF全文
耿信笃  白泉 《中国科学B辑》2002,32(5):460-471
变性蛋白表面的疏水氨基酸残基有与疏水色谱固定相(STHIC)颗粒相互作用的倾向, 两者之间的疏水相互作用能够抑制变性蛋白分子间的相互聚集. 同时疏水色谱固定相还能在分子水平上给变性蛋白分子提供足够高的能量, 使其瞬时脱水并折叠成其天然构象或不同的折叠中间体. 变性蛋白在疏水界面上的折叠不仅取决于其氨基酸之间的特异性相互作用及疏水色谱固定相的结构, 而且还取决于固定相和流动相之间的协同作用. 同时, 还提出了高效疏水相互色谱(HPHIC)进行蛋白折叠的机理及其进行蛋白折叠时能实现质量控制的原理. 在适当的色谱条件下, HPHIC 可使几种变性蛋白一步实现复性及同时纯化. 此外, 还设计制造出了直径比柱长大得多的实验室型和制备型“变性蛋白复性及同时纯化装置, USRPP”, 该“装置”具有完全除去变性剂、使蛋白质复性, 与杂蛋白分离及易于回收变性剂的“一石四鸟”功能. 该“装置”对变性蛋白的复性和纯化效率与通常使用的长柱相当. 在制备规模情况下, 该“装置”可以在低压梯度条件下简便、快速、而经济地应用于重组蛋白药物的制备. 文中以重组人干扰素-γ为例, 说明了制备型“装置”在其复性及同时纯化生产工艺中的应用.  相似文献   

4.
《色谱》2005,23(5):476-476
本书系统地阐述了一种与组分在界面上迁移有关地全新理论——计量置换理论(SDT)及其在化学、化工、生物化学、分子生物学、基因工程、药学等正在发展的高新技术中的应用。全书共计12章,涉及4个方面的内容:从提出新概念到计量置换模型的建立,再到从理论上推导出液相色谱和物理化学中组分保留机理和吸附机理;  相似文献   

5.
源于大肠杆菌蛋白的表达、液相色谱复性与纯化新进展   总被引:1,自引:0,他引:1  
对近两年来源于大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)的蛋白表达和用蛋白折叠液相色谱(protein folding liquid chromatography,PFLC)法对所形成的包涵体目标蛋白的复性并同时纯化的新近发展做了简要的介绍和评述.PFLC法用于包涵体蛋白分离、纯化很广,其特点是除了在色谱柱上将目标蛋白与其他组分分开,还同时要在色谱柱上进行包涵体蛋白折叠.可以说,现代生物技术中所用的大多数有价值蛋白产品的制备仍然有赖于不同机理的液相色谱(Lc)法.而用PFLC法对源于E.coli的蛋白的制备方法更具可塑性和容易达到规模化,其生成本可以成倍地降低.该文主要内容包括了E.coli蛋白的表达及样品前处理、PFLC的实用范围、PFLC的优化、PFLC中的新技术、新设备和新方法、PFLC的分子学机理、应用事例及对未来的展望.  相似文献   

6.
反相液相色谱中温度对蛋白分子构象变化的新表征   总被引:7,自引:0,他引:7  
液相色谱中溶质计量置换保留模型的Z值可用来对反相高效液相色谱中热变蛋白的分子构象进行表片。发现在异丙醇-甲酸44%(V/V)-水体系为流动相对完全变性蛋白的Z值随温度升高而降低。且Z值与绝对温度例数(1/T)成正比,因此蛋白分子构象变化可用Z对1/T作图所得两条直线的斜率差值来表征,差值愈大,蛋白分子构象变化愈甚。该两直线的交点即为蛋白分子构象的突变温度。与通常采用的1gK'对1/T的作图相比,用  相似文献   

7.
光聚合整体式咖啡因印迹毛细管柱的制备及分离性能   总被引:6,自引:0,他引:6  
分子印迹技术作为一种制备对目标分子具有专一识别能力的功能高分子的方法 ,近年来在化学化工、生物化学与生物技术的许多领域中得到广泛应用 [1~ 4 ] .分子印迹技术与微分离方法 (包括微柱液相色谱、毛细管电泳、毛细管电色谱和芯片分离等 )结合已引起人们极大的兴趣和关注[5,6] .毛细管柱是毛细管电色谱和微柱液相色谱的关键部件 ,目前普遍使用的是烷基键合硅胶微粒的填充柱 ,存在制备时须烧塞和填充两大困难 ,以及使用时易产生气泡和易折断等缺点 .将含被识别分子 (印迹分子 )、交联剂、溶剂、功能单体和引发剂的混合液注入毛细管 ,经光…  相似文献   

8.
用疏水色谱对还原型胍变性牛胰岛素的折叠特性研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
用疏水相互色谱(HPHIC)对还原胍变性牛胰岛素在疏水界面上的折叠与复性进行了研究.结果表明,采用普通流动相时,对还原胍变胰岛素的复性效果较差,而采用氧化型流动相可使其复性效率提高到66%,并用反相色谱(RPLC)、紫外吸收光谱、荧光光谱及MALDI-TOF对其复性效果进行了验证.同时与体积排阻色谱(SEC)和稀释法对还原胍变胰岛素的复性结果进行了比较.结果表明,SEC根本无法使还原胍变胰岛素复性,而稀释法的复性效率仅有2%.这进一步表明HPHIC是变性蛋白复性的有效工具,变性蛋白在疏水界面折叠过程中,蛋白质与固定相之间的疏水相互作用对蛋白折叠起着关键性的作用,是蛋白折叠的主要驱动力.  相似文献   

9.
水相凝胶色谱仪的改装与应用   总被引:3,自引:0,他引:3  
甘纯玑  林松  蔡乐 《色谱》1991,9(6):394-396
凝胶色谱是一种用途广泛的液相色谱。在生物化学与高分子化学研究中,是测定分子量及其分布的一种重要方法。国内常见的几种凝胶色谱仪,如:Waters GPC-200、SN-01A型,这类仪器结构简单,容易操作,但是通常多用于有相溶剂相中测定,并且对  相似文献   

10.
《分析化学》2002,30(10)
分子探针与检测试剂 (“十五”国家重点图书出版规划项目 )张华山等编著   2 0 0 2年 8月出版  定价 :4 5元本书内容丰富 ,取材新颖 ,充分反映了有机试剂基础理论研究的新进展和新成果。本书共分 12章 ,较全面系统地阐述分析化学及生物分析中的有机试剂、分子及离子荧光探针。内容包括 :光度分析中的有机显色剂、荧光试剂、发光试剂、超分子显色剂的作用原理及应用 ;离子荧光探针、分子荧光探针及其生物活性物质的测定和生命科学研究中的应用 ;高效液相色谱和气相色谱中的衍生试剂及应用。本书可供化学化工、生物技术、冶金、地质、农业…  相似文献   

11.
《分析化学》2009,37(1)
该书为再版的《色谱技术丛书》之一。该书对色谱的各个分支做了简要地阐述,概论性地介绍了色谱的基本知识、仪器概况和方法要点,在气相色谱、液相色谱和毛细管电泳方面做了较多的论述。该书在第一版的基础上,增加了“色谱定性与定量分析”和“制备色谱”两章。该书可供实验室从事物理或化学检测人员使用,也可供高等院校与分析化学相关专业师生参考。  相似文献   

12.
《分析化学》2007,35(3):876-876
毛细管电色谱是近年发展起来的一种新型微分离技术,它整合了毛细管电泳与微径柱液相色谱的优点,通过在填充微细颗粒液相色谱填料的微径柱色谱柱两端施加直流高压电场,达到对痕量复杂生物及化学体系样品良好地分离。该书是作者近年来从事毛细管电色谱领域研究的积累和总结,全面介绍了毛细管电色谱基本原理、分离机理和分离行为,各类毛细管柱的制备方法和性能评价,加压毛细管电色谱仪的研制及应用实例。该书可供化学和生物专业研究生和科研人员参考阅读。  相似文献   

13.
《分析化学》2005,33(11):1564-1564
毛细管电色谱是近年发展起来的一种新型微分离技术,它整合了毛细管电泳与微径柱液相色谱的优点,通过在填充微细颗粒液相色谱填料的微径柱色谱柱两端施加直流高压电场,达到对痕量复杂生物及化学体系样品良好地分离。该书是作者近年来从事毛细管电色谱领域研究的积累和总结,全面介绍了毛细管电色谱基本原理、分离机理和分离行为,各类毛细管柱的制备方法和性能评价,加压毛细管电色谱仪的研制及应用实例。该书可供化学和生物专业研究生和科研人员参考阅读。  相似文献   

14.
《分析化学》2005,33(10):1416-1416
毛细管电色谱是近年发展起来的一种新型微分离技术,它整合了毛细管电泳与微径柱液相色谱的优点,通过在填充微细颗粒液相色谱填料的微径柱色谱柱两端施加直流高压电场,达到对痕量复杂生物及化学体系样品良好地分离。该书是作者近年来从事毛细管电色谱领域研究的积累和总结,全面介绍了毛细管电色谱基本原理、分离机理和分离行为,各类毛细管柱的制备方法和性能评价,加压毛细管电色谱仪的研制及应用实例。该书可供化学和生物专业研究生和科研人员参考阅读。  相似文献   

15.
对全二维气相色谱(GC×GC)、全二维液相色谱(HPLC×HPLC)、多维毛细管电泳等多维分离技术在生物制药研究中的应用进行了综述,其中对作者所在研究组在全二维气相色谱应用于中药及固相萃取-液相色谱联用分析系统等方面的工作做了重点介绍。由所综述的生物制药研究得出结论:多维分离方法以其高分辨、快速、自动化等特点已经在生物制药领域显示出它的巨大优势,并将发挥更大的作用。  相似文献   

16.
离子排斥色谱用于低分子羧酸分析的进展   总被引:5,自引:2,他引:3  
严晋婴  施荫玉 《色谱》1993,11(1):13-16
低分子羧酸在电力工业、化学工业、食品工业、环境保护、生物化学、生物医学和生命科学等领域中有着重要的分析价值。低分子羧酸的高效液相色谱分析方法有离子色谱法、反相色谱法和离子对色谱法等。离子色谱是分析低分子羧酸的主要方法,根据离子色谱分离低分子羧酸的机理,大致可以分为离子交换色谱分离法(HPIC)和离子排斥色谱分离法(HPIEC)两大类。70年代后期,由于弱离子化低浓度有机酸定量分析的需要,导致以离子排斥色谱为基础的离子色谱分离方法的发展。本文着重评述了近年来国内外离子排斥色谱用于低分子羧酸分析的进展状况。 五十一六十年代Wheaton和Bauman建议使用离子交换树脂将溶液中的离子化组分与非离子化组分分离,并且首先将离子排斥概念用于这一分离方  相似文献   

17.
《分析化学》2007,35(8):1024-1024
该书主要介绍了色谱-质谱、色谱-傅立叶变换红外光谱、色谱-原子光谱和色谱-色谱联用技术。该书简述了质谱、傅立叶变换红外光谱、原子光谱和核磁共振仪器的结构、工作原理、以及与色谱联用时对接口的一般要求。该书内容丰富,包括:液相色谱-质谱、毛细管电泳-质谱、色谱-傅立叶变换红外光谱、液相色谱-傅立叶变换红外光谱、薄层色谱-傅立叶变换红外光谱、色谱-原子光谱等联用技术,以及液相色谱-液相色谱、气相色谱-气相色谱、气相色谱-液相色谱等不同的分离模式色谱联用技术的应用实例。该书是《色谱技术丛书》之分册,在第一版基础上作了修改和充实,补充了新近发展的仪器、技术与应用实例。  相似文献   

18.
肿瘤标志物与诊断技术   总被引:3,自引:0,他引:3  
从化学和生物化学角度分别叙述了蛋白质、酶及同工酶、激素、基因等类肿瘤标志物 ,并介绍了包括免疫学、生物化学、分子生物学技术在内的用于诊断肿瘤标志物的研究进展 ,指出了当前在肿瘤标志物检测中存在的问题及其可行的解决途径  相似文献   

19.
《分析化学》2008,36(10)
该书为再版的《色谱技术丛书》之一。该书对色谱的各个分支做了简要地阐述,概论性地介绍了色谱的基本知识、仪器概况和方法要点,在气相色谱、液相色谱和毛细管电泳方面做了较多的论述。该书在第一版的基础上,增加了“色谱定性与定量分析”和“制备色谱”两章。该书可供实验室从  相似文献   

20.
《分析化学》2008,36(12)
该书为再版的《色谱技术丛书》之一。该书对色谱的各个分支做了简要地阐述,概论性地介绍了色谱的基本知识、仪器概况和方法要点,在气相色谱、液相色谱和毛细管电泳方面做了较多的论述。该书在第一版的基础上,增加了“色谱定性与定量分析”和“制备色谱”两章。该书可供实验室从  相似文献   

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