壳聚糖–精氨酸树脂固定化胰凝乳蛋白酶及其性质

以自制的多孔、具柔性亲水手臂的壳聚糖–精氨酸树脂为载体,戊二醛为交联剂固定胰凝乳蛋白酶,确定了酶与载体的最佳比例为20 mg酶/g湿树脂,交联剂的最佳用量为10 mL 1.0%戊二醛/1.5 g湿树脂,交联时间为60 min,所得固定化酶的活力回收率达68.95%。固定化胰凝乳蛋白酶的Km为8.36 mg/mL,比游离酶增大1.52倍,其酶促反应10 min达到最大速率,具有接近游离酶的催化时间进程曲线;其最适温度为70 ℃,比游离酶升高10 ℃;其最适pH值为5.92,比游离酶酸性偏移2个pH值。此外,固定化胰凝乳蛋白酶具有良好的热稳定性和贮存稳定性,75 ℃时的半衰期为8 h,4 ℃时的半衰期为46天。     

胰凝乳蛋白酶显色底物的合成及动力学

胰凝乳蛋白酶是一类重要的蛋白水解酶,在其纯化及应用时常常需要进行酶活性的测定;现在一般应用的底物存在溶解度不好、不稳定、灵敏度低或需要特殊的仪器等问题。本文设计合成了一类以对硝基苯胺为显色基团的底物,通过动力学测定研究了氨基酸结构对专一性的影响,该类显色底物可以较好地用于胰凝乳蛋白酶活性测定。     

用于α-胰凝乳蛋白酶固定化的氨基超顺磁纳米凝胶光化学合成与表征

通过霍夫曼降解光化学原位聚合制备的聚丙烯酰胺包覆的Fe3O4纳米粒子得到了氨基化磁性纳米凝胶,用缩合剂1-乙基-3-(3-二甲胺)碳二亚胺成功地将α-胰凝乳蛋白酶固定到氨基化磁性纳米凝胶上,并采用光子相关光谱、傅里叶变换红外光谱、透射电子显微镜、X射线粉末衍射和热重-示差扫描量热联用等多种手段对其进行了表征.固定化了的α-胰凝乳蛋白酶平均粒径约为31 nm;热重法测得每克凝胶上的载酶量为69 mg,BCA 法测得每克凝胶上的载酶量为61 mg;酶的固定化和氙灯辐照并未改变Fe3O4的晶形结构;固定化酶比活力为0.93 U/(mg·5min),为自由酶活力的59.3%;磁含量高达88%,具有优异的磁响应性能,可应用于诸多生物医药领域的快速检测、分离及酶的再生利用.     

交联壳聚糖微球及其接枝精氨酸树脂吸附性质的比较研究

研究了交联壳聚糖接枝精氨酸阴离子吸附树脂及交联壳聚糖微球吸附L-谷氨酸、β-内酰胺抗生素(青霉素G及氨苄青霉素)、尿素及Zn2+的动态吸附时间进程曲线及吸附容量。实验结果表明,交联壳聚糖接枝精氨酸阴离子吸附树脂对L-谷氨酸、青霉素G、氨苄青霉素、尿素及Zn2+的动态吸附平衡时间分别为120min、60min、75min、90min及50min,比交联壳聚糖微球分别缩短15min、15min、45min、45min、30min;对L-谷氨酸、青霉素G、氨苄青霉素、尿素及Zn2+的动态吸附容量分别是214.95mg/g干树脂、78.56mg/g干树脂、67.91mg/g干树脂、530mg/g干树脂及85.01mg/g干树脂,分别比交联壳聚糖微球提高了2.35倍、2.26倍、2.41倍、3.64倍和2.37倍。     

介孔分子筛SBA-15中α-胰凝乳蛋白酶组装及催化活性研究

介孔分子筛由于规则孔道或笼的存在 ,使其具有择形催化作用、高比表面积和强吸附性能 ,其孔道中可组装多种物质而改变其理化性能 .Thomas等 [1] 在介孔 Si O2 上接枝金属茂复合物 .白妮 [2 ] 和张雪峥 [3 ] 等分别将脂溶性金属酞菁衍生物和杂多酸封装在介孔分子筛中 ,得到的组装体催化性能优良 .近年来由于不断合成出 MCM- 41 [4 ] 和 SBA- 1 5 [5] 等孔径较大的介孔分子筛 ,使在介孔材料孔道中组装生物大分子成为可能 .Yen等 [6] 将细胞色素 c组装到孔道中 ,并使酶的稳定性得到提高 ,而α-胰凝乳蛋白酶 (Mr=2 5 0 0 0 ,分子动力学直径…     

α—胰凝乳蛋白酶的固定化及其对DL—苯丙氨酸的光学拆分

以氨丙基多孔球为载体，戊二醛为交联剂制得固定化α－胰凝乳蛋白酶。其含酶量为３．６ｍｇ／ｇ，米氏常数Ｋｍ＝１．２×１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ，最适宜温度为３５℃，ｐＨ值为７．０，对热、酸碱、甲醇以及尿素的稳定性有较大提高，Ｃａ＾２＋激活效应明显。用该固定化酶连续拆分ＤＬ－苯丙氨酸制备Ｌ－苯丙氨酸时，拆分产率高于９０％，产品纯度超过９６％；连续使用２个月后仍能保持较高酶活力。     

磺胺甲基异恶唑作配基的高效亲和色谱分离胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶

用磺胺甲基异恶唑作基基，大孔硅胶和为基质的高效亲和色谱分离纯化胰凝蛋白酶及胰蛋白酶。２０多种蛋白质和酶在该柱上无特异性吸附。     

用于α-胰凝乳蛋白酶固定化的氨基超顺磁纳米凝胶的光化学合成与表征

通过霍夫曼降解光化学原位聚合制备的聚丙烯酰胺包覆的Fe3O4纳米粒子得到了氨基化磁性纳米凝胶, 用缩合剂1-乙基-3-(3-二甲胺)碳二亚胺成功地将α-胰凝乳蛋白酶固定到氨基化磁性纳米凝胶上, 并采用光子相关光谱、傅里叶变换红外光谱、透射电子显微镜、X射线粉末衍射和热重-示差扫描量热联用等多种手段对其进行了表征. 固定化了的α-胰凝乳蛋白酶平均粒径约为31 nm; 热重法测得每克凝胶上的载酶量为69 mg, BCA 法测得每克凝胶上的载酶量为61 mg; 酶的固定化和氙灯辐照并未改变Fe3O4的晶形结构; 固定化酶比活力为0.93 U/(mg·min), 为自由酶活力的59.3%; 磁含量高达88%, 具有优异的磁响应性能, 可应用于诸多生物医药领域的快速检测、分离及酶的再生利用.     

四氢糠醇对α-胰凝乳蛋白酶在液相色谱中复性效率的影响

用高效疏水相互作用色谱（HPHIC）研究了将四氢糠醇加入盐酸胍（GuHCl)变性剂中或将四氢糠醇键合至硅胶基质时，对α－胰凝乳蛋白酶（α-Chy)复性效率的影响情况，并以α－Chy的生物活性回收率对结果进行了表征。用尺寸排阻色谱（SEG）与HPHIC的实验结果进行了比较，结果表明，四氢糠醇在变性剂中和键合至硅胶上时，均可提高α－Chy的复性效率，但提高的程度不同。四氢糠醇在溶液中或在HPHIC固定相表面时具有辅助α－Chy进行复性作用的机理可能是由于四氢糠醇与α－Chy形成了复合物的形式。实验中还对GuHCl中加入的四氢糠醇量进行了优化。     

壳聚糖固定化总状毛霉MR137-3蛋白酶的性质

以壳聚糖为载体,戊二醛作交联剂,将总状毛霉MR137—3蛋白酶固定在壳聚糖上。研究了戊二醛浓度,给酶量,处理时间对MR137—3蛋白酶固定化的影响。同时对固定化酶与游离酶的热稳定性、最适pH、最适温度以及脲、有机溶剂、金属离子的影响等理化性质进行了探讨。     

高容量亚胺基二乙酸型螯合树脂的制备及吸附性能

以甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)为单体, 氯甲基化的交联聚苯乙烯树脂(CMCPS)为大分子引发剂, CuBr/2,2'-联吡啶(Bpy)为催化剂, 采用表面引发原子转移自由基聚合(SI-ATRP)技术, 使甲基丙烯酸缩水甘油酯聚合在CMCPS树脂表面, 制得了环氧化聚合物. 将该聚合物与亚胺基二乙酸(IDA)反应, 制备了高容量亚胺基二乙酸型螯合树脂(IDA-PGMA-CMCPS), 用元素分析对其进行了表征. 考察了螯合树脂对Cu²⁺的吸附性能及动力学和热力学参数. 该螯合树脂表面IDA接枝密度达8.15 mg/m². 研究结果表明, 树脂对Cu²⁺的吸附量随离子浓度和温度的升高而增加, 当pH值为2.2时, 对Cu²⁺离子的吸附效果最佳. 树脂的静态饱和吸附容量为1339.66 mg/g, Langmuir和Freundlich方程均呈现良好的拟合度. 通过热力学平衡方程计算ΔG<0, ΔH=270.60 kJ/mol, ΔS>0, 表明该吸附过程是自发、 吸热、 熵增加的过程. 动力学研究结果表明, 准二级动力学方程能较好拟合动力学实验结果, 该过程符合准二级动力学模型.     

新型含氮螯合树脂的制备及其吸附性能

以三甘醇和苯磺酰氯为原料,二乙烯三胺为交联剂合成了新型含氮螯合树脂(5),其结构经IR表征.讨论了Ni2 浓度和pH对5吸附容量的影响.动力学研究表明,5对Ni2 的吸附速率符合鲛岛公式.     

漆树酶固定化及其性质研究

本文介绍了用过渡金属水合氧化物固定化漆树漆酶的方法。考察了整合法固定漆树酶的最适条件。对固定化前后漆酶的性质进行了比较,并分析了造成固定化酶与游离酶性质差异的原因。     

Merrifield树脂负载咪唑基离子液体磁性微球的制备与表征

制备了Merrifield树脂负载丙酸甲酯基咪唑基离子液体磁性微球。 采用FT-IR和XRD对结构进行了表征,采用TGA和VSM分别进行了热稳定性和磁性测试。 结果表明,丙酸甲酯基咪唑基离子液体成功负载到Merrifield树脂微球上,并通过共沉淀的方法实现了微球的磁性化,其磁组分为FeOOH和γ-Fe2O3混合物。 磁性微球的热稳定性优于无磁性的Merrifield树脂负载丙酸甲酯基咪唑基离子液体微球,在200 ℃以下不发生分解。 磁性微球的磁化强度为11.364 emu/g,显示出超顺磁性,无外磁场存在时不发生团聚。 沉降实验结果表明,在磁感应强度为3.0×10-4 T电磁场作用下,磁性微球10 s内即可从水相中基本分离完全,而没有磁场作用时磁性微球粒子基本不从水相中分离。     

Preparation and Characterization of Macroporous Resin Immobilized Pd－Cu Bimetallic Cluster Catalysts

ＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄＣｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆＭａｃｒｏｐｏｒｏｕｓＲｅｓｉｎＩｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄＰｄ－ＣｕＢｉｍｅｔａｌｌｉｃＣｌｕｓｔｅｒＣａｔａｌｙｓｔｓＷｕＳｈｉｈｕａ；ＺｈｕＣｈａｎｇｙｉｎｇ；ＨｕａｎｇＷｅｉｑｉｎｇ，...     

Rapid and Efficient Proteolysis for Protein Analysis by an Aptamer-Based Immobilized Chymotrypsin Microreactor

Efficient protein digestion is a key step for successful mass spectrometry identification. However, traditional in-solution digestion suffers some drawbacks, such as autolysis of protease, long analysis times and lack of control. Recently, specific single-stranded nucleic acids, aptamers, screened from random sequence pools, have been performed high affinity for targets. In this paper, we have developed a novel enzyme reactor, which immobilized chymotrypsin based on aptamer-grafted silica beads. Mixed proteins, which consist of bovine serum albumin, myoglobin, and cytochrome c, were used as samples, to evaluate the digestion performance of the enzymatic reactor. With the use of this novel tool, proteins were digested in 40 min to an extent similar to that achieved with soluble enzyme at 37°C after 16 h. Moreover, enzymatic reactor regeneration was carried out through chymotrypsin elution and re-immobilization. The advanced characteristics of the aptamer-based chymotrypsin reactor demonstrated that aptamers could serve as novel materials for rapid and efficient enzyme immobilization and application in protein studies.     

基于废弃固定化酶再利用的高容量强阳离子交换树脂及其对溶菌酶的吸附性能

采用表面引发-原子转移自由基聚合( SI-ATRP)技术,以废弃的固定化酶为基质、4-乙烯基苯磺酸钠为单体,30℃聚合3 h,制备了一种新型强阳离子交换树脂。采用傅里叶变换红外光谱( FT-IR)对合成的强阳离子交换树脂进行表征。以溶菌酶为模型蛋白,考察了溶菌酶初始浓度、离子强度、有机溶剂浓度、吸附时间及温度对吸附容量的影响。结果表明,强阳离子交换树脂对溶菌酶的吸附是一个放热的过程。在室温下对溶菌酶的最大吸附量可达240 mg/g,在30 min内快速达到吸附平衡,比文献报道的阳离子交换树脂具有更好的吸附性能。 Langmuir吸附模型与准二级动力学方程可以较好地对吸附过程进行拟合。     

硅炔杂化树脂改性有机硅树脂及其复合材料的性能

用一种硅炔杂化树脂聚（甲基硅烷-二乙炔基苯）（PSP）改性有机硅树脂（HS）,通过FT—IR和TGA研究了树脂体系的固化反应及耐热性,并对制备的复合材料进行力学性能、耐热性能和介电性能研究。结果表明：当HS与PSP的质量比为5：5时综合性能最优,树脂体系在氮气氛围下质量损失5％时的温度（T幽）为691℃,1000℃时质量保留率为88％;HS—PSP树脂短切玻纤复合材料冲击强度为21kJ／m^2,弯曲强度为65MPa,200℃时的弯曲强度高温保留率为78％,介电常数为4．6,介电损耗因数为7．9×10,体积电阻为6．7×10^13Ω。改性后的复合材料具有优异的力学、耐热和介电性能。     

Preparation and Properties of the Polyurethane Resin Modified by Rosin Glycerin Ester

为提高聚氨酯树脂的耐热性能和对颜料的润湿分散性能,采用松香甘油酯多元醇对聚氨酯进行改性。实验首先合成了松香甘油酯多元醇,然后将松香甘油酯与异氰酸酯基团发生化学反应,得到松香甘油酯改性聚氨酯树脂。通过红外光谱（FT-IR）、热重分析（TGA）及接触角仪对聚氨酯树脂的结构和性能进行表征,并对所配制的油墨的细度、粘度等指标进行检测。结果表明：松香甘油酯引入聚氨酯可显著提高聚氨酯的热稳定性和对酞菁蓝颜料的润湿分散性,聚氨酯的失重5％热分解温度由305．2℃提高至329．8℃;改性聚氨酯树脂对P．B54;1蓝颜料接触角为37．8°,油墨细度可达10mμ,油墨具有良好的流动性、稳定性和附着牢度。     

聚丙烯酰胺-埃洛石复合型高吸水性树脂的制备及其吸水性能

以丙烯酰胺(AM),丙烯酸(AA)和埃洛石(AL)为原料,环己烷(CYH)为油相,Span 60为分散剂,过硫酸铵(APS)为引发剂,N,N'-亚甲基双丙烯酰胺(MBA)为交联剂,经反相悬浮聚合法制备了聚丙烯酰胺-埃洛石复合型高吸水性树脂(1ηγ-ALTa),其结构经SEM表征。考察了单体质量比η[m(AM)∶m(AA)],油水体积比γ[V(油)∶V(水)],MBA用量和ALTa用量[T为煅烧温度,a为酸化浓度]对1ηγ-ALTa吸水性能的影响。在最佳反应条件[Span 60 1.2 g,CYH 154 m L,MBA 12 mg,AM 5.0 g,η=0.5,γ=3.5,AL90015225 mg,APS 0.12 g,于70℃反应3 h]下制备的10.53.5-AL90010吸水性能最好,吸水倍率,吸盐水倍率和溶胀速率分别为1 740.34 g·g-1,246.36 g·g-1和29.0 g·min-1。