羊栖菜多糖对小鼠免疫功能的影响

采用从羊栖菜提取物分离获得的 4个组分中选择其中不同分子量 ,且得率较高的F1、f1组分 ,观察它们对小鼠免疫功能的影响 .结果显示按 4 0mg/(kg·d)剂量腹腔注射 7d后 ,对小鼠抗SRBC抗体生成有促进作用 ,同时明显提高小鼠脾指数 ,其中f1组最明显 .对f1组分按不同剂量注射 ,结果显示对小鼠胸腺T淋巴细胞增殖促进作用呈明显量效关系 .     

白毛藤多糖的分离和生物免疫活性研究

干燥白毛藤全草经粉碎、乙醇脱脂后,残渣用热水提取得到2种多糖SL-1、SL-2,凝胶渗透色谱(GPC)法测定其分子量.生物免疫活性实验证明:白毛藤多糖SL-1、SL-2均在体外具有明显提高正常小鼠胸腺淋巴细胞免疫活性的作用,其中SL-2的作用要强于SL-1.另外,SL-1对正常小鼠胸腺淋巴细胞的作用在40～80μg/mL达到峰值,而SL-2在80～120μg/mL达到峰值,且均与用药时间成正比.     

紫草多糖的免疫调节和肿瘤抑制活性研究

为研究紫草多糖在体外对小鼠脾淋巴细胞的免疫调节活性及对肿瘤细胞的细胞毒作用,本实验采用水提醇沉法,经脱蛋白、脱色、透析等方法提取紫草多糖,MTT法检测紫草多糖对淋巴细胞增殖及对HepG2、SPC-A-1肿瘤细胞的杀伤作用.实验结果显示:当质量浓度在121～364 μg*mL-1时,紫草多糖能显著的促进ConA刺激的T淋巴细胞增殖(P<0.01),对HepG2肿瘤细胞有显著杀伤作用(P<0.01),对SPC-A-1肿瘤细胞有明显的杀伤作用(P<0.05),且随着浓度的提高,增殖作用或抑制作用增强.在质量浓度为364 μg*mL-1时,对HepG2细胞的抑制作用明显高于对SPC-A-1细胞的抑制作用,而在质量浓度为24 μg*mL-1时,对HepG2细胞的抑制作用低于SPC-A-1细胞,紫草多糖对HepG2细胞的抑制表现出更强的剂量-效应依赖性.以上结果表明,紫草多糖不仅有免疫调节活性,还对肿瘤细胞具有一定的细胞毒作用.     

密码子优化的人溶菌酶基因在毕赤酵母中的分泌表达及抗菌活性分析

人溶菌酶（human lysozyme,hLYZ）是一种天然活性蛋白质,具有抗菌性,目前主要应用于食品添加剂、动物饲料、药物治疗领域。根据毕赤酵母表达偏爱密码子特点,通过优化hlyz基因密码子,人工合成目的基因,构建了分泌表达载体pPIC9K-hlyz。通过电击转化法将pPIC9K-hly质粒重组至毕赤酵母GS115染色体中,经筛选得到重组毕赤酵母GS115-pPIC9K-hlyz。在28 ℃、pH 6.0、转速240 r·min^-1、1%甲醇诱导下表达120 h,发酵液上清酶活达到最高,为（2 414.9±108.1）U·mL^-1,蛋白浓度为166.7 μg·mL^-1。发酵液上清经过Sephadex G50纯化,获得较纯的hLYZ,经SDS-PAGE分析,在近14.7 kDa处显示单一条带。抗菌实验结果表明,重组hLYZ对革兰氏阳性菌的抗菌效果大于革兰氏阴性菌;重组hLYZ的抗菌效果是hLYZ标准品的10~20倍。     

细茎石斛多糖的降血糖活性作用

观察细茎石斛(Dendrobium moniliforme(L.)Sw.)多糖对多种模型小鼠血糖水平的影响,探讨其降血糖作用机理.采用昆明种小鼠分组,分别以细茎石斛多糖(100 mg·kg^-1、200mg·kg^-1)、格列苯脲片(50 mg·kg^-1)、盐酸苯乙双胍(50 mg·kg^-1)或生理盐水灌胃,测定各正常小鼠、肾上腺素性糖尿病和四氧嘧啶性糖尿病小鼠的血糖水平.结果100 mg·kg^-1、200mg·kg^-1两个剂量的细茎石斛多糖均能显著降低肾上腺素、四氧嘧啶引起的糖尿病小鼠的血糖水平(p<0.01),提高四氧嘧啶性糖尿病小鼠的葡萄糖耐量((p<0.01),但对正常小鼠的血糖水平无影响.细茎石斛多糖具有明显的降血糖作用,是一种值得开发利用的降糖植物多糖.     

细茎石斛多糖的降血糖活性作用

观察细茎石斛 ( Dendrobium moniliforme ( L .) Sw .)多糖对多种模型小鼠血糖水平的影响 ,探讨其降血糖作 用机理 .采用昆明种小鼠分组 ,分别以细茎石斛多糖 (100 mg· kg - 1 、200 mg· kg - 1 )、格列苯脲片 (50 mg· kg - 1 )、盐 酸苯乙双胍 (50 mg· kg - 1 )或生理盐水灌胃 ,测定各正常小鼠、肾上腺素性糖尿病和四氧嘧啶性糖尿病小鼠的血糖 水平 .结果 100 mg · kg - 1 、200 mg · kg - 1 两个剂量的细茎石斛多糖均能显著降低肾上腺素、四氧嘧啶引起的糖尿病 小鼠的血糖水平 (p < 0. 01) ,提高四氧嘧啶性糖尿病小鼠的葡萄糖耐量 (p < 0. 01),但对正常小鼠的血糖水平无影 响 .细茎石斛多糖具有明显的降血糖作用 ,是一种值得开发利用的降糖植物多糖.     

无花果多糖的分离、纯化和鉴定

经脱脂、沸水抽提、乙醇沉淀、酶-Sevag法脱蛋白得到粗多糖,再经DEAE-Sepharose fast flow阴离子交换层析和Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱层析得到纯化的无花果多糖(FCPS),用红外光谱和紫外光谱分析鉴定该多糖.红外光谱分析具有典型的多糖特征吸收峰,紫外光谱分析未见蛋白质(280 nm)与核酸(260 nm)的特征吸收峰.结果表明,所提取的无花果多糖为单一组分的多糖.     

莲子心多糖的提取、分离和抗氧化活性研究

干燥的莲子心经机械粉碎、乙醇脱脂、沸水提取、乙醇沉淀及中性酶和Sevag法除蛋白得其粗多糖,经DEAE-Cellulose-32阴离子交换和SephacrylTM S-200凝胶过滤层析得组份ELPS-Ⅰ和混合物Ⅱ,Ⅱ再经过DEAE-Cellulose-32柱层析得组份ELPS-Ⅱ.GC-MS法测定粗多糖、ELPS-Ⅰ和ELPS-Ⅱ的中性糖组成.凝胶过滤色谱(GPC)法测得ELPS-Ⅰ和ELPS-Ⅱ的重均分子量分别为4.97×104 Da和2.96×106 Da.β-胡萝卜素漂白实验结果显示莲子心粗多糖具有显著的抗氧化活性(维生素C作为阳性对照).     

莲铜锌超氧化物歧化酶cDNA的克隆和序列分析

用RT-PCR方法,从中国莲(Nelumbo nucifera)幼叶cDNA中成功扩增出铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)全长序列,并进行测序分析.该cDNA序列全长461 bp,包括起始密码子和终止密码子.其中编码区段为456 bp,共编码152个氨基酸,其编码蛋白的相对分子质量为1.552×104,等电点为4.515.与GenBank中其他物种的CuZnSOD进行同源性比较,发现其核苷酸序列相似性高达80%~86%,氨基酸序列相似性达89%~94%.所有已知的CuZnSOD的关键活性位点在该蛋白中均保守存在.将其与一些典型的单子叶和双子叶植物的该蛋白进行进化树分析,为富有争议的莲的系统学地位的确定,在分子生物学上为莲的系统学地位的确定提供了一个依据.该基因已在GenBank登记,序列号为DQ227345.     

鱼腥草水溶性多糖的理化性质及体外抗氧化活性

从鱼腥草中提取出一种水溶性多糖,运用化学分析法、光谱学法、色谱法及扫描电镜法对鱼腥草多糖（Houttuynia cordata polysaccharide, HCP）的基本理化性质、相对分子量、单糖组成及固态形貌等进行分析并对其体外抗氧化活性进行研究。结果显示HCP为含吡喃糖结构的酸性果胶类均一多糖,其重均相对分子量为3.87×105 Da,且该多糖由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸8种单糖组成。扫描电镜分析发现HCP主要由杆状、丝状和球状物质组成。体外抗氧化实验表明HCP有明显的DPPH自由基和·OH的清除作用,其清除活性可分别高达到87.18%和31.37%。因此,本研究的结果可为HCP的生物活性研究奠定基础,且有利于鱼腥草资源的开发应用。     

饥饿胁迫对日本蟳抗氧化酶活性和细胞超微结构的影响

采用透射电镜技术和分光光度法研究了饥饿胁迫对日本蟳(Charybdis japonica)鳃、肝胰腺、心脏和肌肉组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及其超微结构的影响. 抗氧化酶研究结果表明: 日本蟳体内SOD和CAT的活性显示出高度的组织特异性, SOD活性在组织间分布大小顺序为心脏>鳃>肌肉>肝胰腺, CAT大小顺序为肝胰腺>心脏>鳃>肌肉. 两种酶在饥饿胁迫下发生了相应的变化, 16d内SOD整体表现出刺激作用, 鳃中CAT呈现明显的抑制作用, 肝胰腺中CAT活性先降后增. 细胞超微结构观察显示: 饥饿胁迫下日本蟳4种组织细胞的超微结构都有不同程度的变化. 鳃细胞的损害表现为鳃丝水肿、角质层变薄、线粒体部分溶解; 肝胰脏细胞的主要损害特征为肝管微绒毛减少、部分线粒体解体、内质网扩张以及少量细胞核不规则; 心脏细胞中部分线粒体溶解、肌原纤维肿胀; 肌肉细胞部分细胞核染色质固缩. 由此可见, 日本蟳机体本身对饥饿胁迫具有有限的防御能力.     

3种海产蟹类血淋巴酶活性的初步研究

利用API ZYM试剂盒和酶活力测试盒检测了拟穴青蟹、三疣梭子蟹和日本好3种海产蟹血淋巴中的19种酶及血清中6种免疫相关酶的活性.结果表明:有5种酶在3种蟹血淋巴中含量较高,有3种酶在3种蟹血淋巴中含量较少或没有.血清中酚氧化酶(PO)和溶花菌酶(LZM)活力日本(虫寻)最高,拟穴青蟹最低,拟穴青蟹与其他 2种蟹差异显著(P<0.01),三疣梭子蟹和日本(虫寻)之间无明显差异;碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活力拟穴青蟹最高,三疣梭子蟹最低,拟穴青蟹与三疣梭子蟹差异显著(P<0.05),日本(虫寻)与其他2种蟹无明显差异;酸性磷酸酶(ACP)活力在3种海蟹之间无显著差异.     

饲料蛋白质水平对日本无针乌贼生长性能和肌肉营养成分的影响

为研究饲料中不同蛋白质水平对日本无针乌贼生长性能及肌肉营养成分的影响, 试验配制了蛋白质水平为35%、40%、45%、50%、55%共5组试验饲料, 对初始体重为(37.86±5.63)g的(P>0.05). 当饲料蛋白质水平为50%时, 肌肉中粗蛋白(82.09%)、氨基酸总量(80.45%)达最大值, 而肌肉粗脂肪在饲料蛋白质55%组达到最大(6.33%), 均显著高于其他4组(P<0.05). 对肌肉氨基酸和脂肪酸的分析结果表明: 肌肉中必需氨基酸量(28.29%)和鲜味氨基酸量(33.03%)在45%和50%两组间无显著性差异(P>0.05),但显著高于其他3组(P<0.05); 总不饱和脂肪酸(EPA+DHA)呈先降后升的趋势, 在45%组和50%组显著低于其他组(P<0.05). 根据SGR折线模型拟合回归方程分析得出, 日本无针乌贼对饲料蛋白质的需求量为44.73%     

纳米羟基磷灰石对大鼠肝线粒体酶活性的影响

探讨了纳米羟基磷灰石（nHAP）作用于大鼠肝线粒体时对线粒体酶活性的影响.将不同浓度的nHAP与线粒体直接作用,测定了线粒体标志酶琥珀酸脱氢酶（SDH）与超氧化物歧化酶（SOD）的比活性.结果显示：nHAP中水含量〈10%时,线粒体酶活性保持稳定;nHAP浓度≤0.56 g.L-1时,无吸光度值;在相同作用时间内,nHAP随浓度的增大,对线粒体SDH的比活性抑制作用增强;在不同作用时间（1~28 h）段,琥珀酸脱氢酶（SDH）的比活性较对照组有显著差异性（p〈0.05）,组内两两相互比较有显著差异性（p〈0.01）.nHAP对SOD比活性的影响随着时间的延长而增强,对SOD的比活性抑制作用随浓度的增加而增强,与对照组相比有显著差异性（p〈0.05）.因此,nHAP对线粒体SDH及SOD比活性的抑制有剂量和时间的依赖性.     

电动生物修复底泥中电场对微生物活性的影响

采用电动生物复合技术修复底泥,探讨了电场对底泥污染物中微生物的生长活性、营养物质的迁移等的影响.实验发现,强电场(3V.cm-1)会降低细菌的活性,而弱电场(1V.cm-1)可激活微生物的活性.相应地,弱电场下的底泥中脱氢酶活性高于强电场下的底泥;电场作用下阳极附近的异养菌生长会受到抑制;较高频率的电极正负极交替有助于消除电场作用对阳极附近异养菌总数的影响.用电动方法向底泥中注入营养物质,发现含氮化合物能在底泥中电动迁移,其中硝酸根的迁移性强于铵盐,而阴极室中磷含量下降,但磷酸根在底泥中未发生迁移.     

温度和pH对不同日龄蓝点马鲛鱼仔鱼消化酶活性的影响

用生化方法研究温度和p H对蓝点马鲛鱼仔鱼蛋白酶和淀粉酶活力的影响.结果表明:随着p H值的升高,蓝点马鲛鱼仔鱼的蛋白酶先升高后下降,淀粉酶先升高后下降.其中,1日龄仔鱼蛋白酶最适p H值为8,7日龄和15日龄的蛋白酶最适p H值为2;1日龄的淀粉酶最适p H值为7,7日龄的淀粉酶最适p H值为7~7.5,15日龄的淀粉酶最适p H值为7.5.随着温度升高,蓝点马鲛鱼仔鱼的蛋白酶先升高后下降,淀粉酶随温度先升高后下降.其中,1日龄和7日龄仔鱼的蛋白酶最适温度为37℃,15日龄的蛋白酶最适温度为42℃;1日龄的淀粉酶最适温度为42℃,7日龄的淀粉酶最适温度为37~42℃,15日龄的淀粉酶最适温度为42℃.     

共轭亚油酸体外及大鼠体内的氧化性

为研究共轭亚油酸（CLA）的氧化稳定性,采用硫代巴比妥酸法测定CLA的氧化性实验,动物实验为用不同剂量的CLA添加到老龄大鼠饮食中,测定大鼠血清中MDA和SOD的改变。实验表明CLA具有较强的被氧化性能;体内实验表明CLA会升高大鼠血清的MDA和SOD值。     

紫外线照射对褶皱臂尾轮虫运动、存活分布与繁殖的影响

采用急性致死、单个体和群体培养实验，研究紫外线照射对褶皱臂尾轮虫（Brachionus plicatilis）运动、存活分布与繁殖的影响．结果表明，随着照射时间的增长（0～30min），轮虫的运动能力下降并产生急性致死效应，死亡率与照射时间关系符合Sigmoid模型．紫外线照射下（0～120s），轮虫的生存数据符合weibull分布，紫外线使各处理组轮虫寿命（1．7～8．8d）、生殖期（0～5．3d）、生殖期的平均繁殖率（0～2．0ind·（female·d）^-1）显著下降（P〈0．001），种群增长特征参数rm、R0、λ和T也呈下降趋势．群体培养与单个体培养结果相似，卵密度、幼体密度和种群增长率均随照射时间（0～120s）的延长而呈显著的下降（P〈0．001）．     

水溶性壳聚糖浸种对小麦幼苗抗性相关酶活性的影响

利用0.5 g/L的5 种水溶性壳聚糖分别对小麦进行浸种处理,在幼苗发育的5 个时期对叶内苯丙氨酸解氨酶、多酚氧化酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶的活性进行测定.壳聚糖处理降低叶内苯丙氨酸解氨酶活性.多酚氧化酶活性变化不显著,初期酶活性较对照高,随幼苗发育先降后升.壳聚糖浸种处理显著提高叶内过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性.5种分子量中以10×103的壳聚糖C浸种处理小麦幼苗叶内抗性相关酶活性强.     

饲料中添加复合芽孢杆菌对三疣梭子蟹生长性能和消化酶活性的影响

通过室内和室外养殖试验,探讨饲料中添加复合芽孢杆菌(纳豆芽孢杆菌+枯草芽孢杆菌)对三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus Miers)生长性能、消化酶活性及养殖效益的影响.试验结果表明:添加1‰(T1)和21‰(T2)的复合芽孢杆菌饲料组幼蟹的蜕壳率、成活率和增重率均高于对照组(T0);摄食率随着芽孢杆菌浓度上升而呈现下降趋势;T1和T2组分别降低幼蟹饲料系数为15.38%和18.80%.芽孢杆菌添加显著影响胃、胰蛋白酶以及肝胰腺脂肪酶活性,但淀粉酶活性没有明显变化.室外池塘养殖结果表明:商品饲料中添加2‰复合芽孢杆菌的饲料组(D2)平均产量最高,比只投喂商品饲料组(D1)增产14.4%;D2组起捕时蟹平均壳宽比D1组大3.4%.饲料系数方面,D1组和D2组差异不大.认为三疣梭子蟹养殖饲料中添加2‰的芽孢杆菌具有较好的效果.