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反相高效液相色谱法测定乳清蛋白中的α-乳白蛋白和β-乳球蛋白 总被引:1,自引:0,他引:1
乳清蛋白是牛奶中的一种主要蛋白质,β-乳球蛋白和α-乳白蛋白是其主要成分,分别占其总量的40%~50%和10%~20%。乳清蛋白具有较高的营养价值及功能特性,已经被越来越多地应用于食品工业,市场上已经出现了许多不同种类和品牌的乳清蛋白粉保健品,如儿童营养蛋白粉、婴儿配方奶粉等。但乳清蛋白又是一种常见的过敏原,β-乳球蛋白是最主要的过敏原,其次为α-乳白蛋白。因此,通过蛋白质改性的方法已经开发出了低过敏或无过敏的乳清蛋白质制品。反相高效液相色谱法(RP—HPLC)是分析乳清蛋白成分的有效方法之一,与其他色谱方法相比具有分辨率和回收率高、重复性好、操作简便等优势。 相似文献
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建立了超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)法测定乳清蛋白粉中α-乳白蛋白(α-La)和β-乳球蛋白(β-Lg)的分析方法。样品经碘代乙酰胺烷基化,再经碱性胰蛋白酶酶解。在Waters ACQUITY UPLC-BEH C18,300?色谱柱上分离,流动相为0.1%甲酸水和0.1%甲酸乙腈,采用梯度洗脱分离,正离子多反应监测模式(MRM)检测,内标法定量。结果表明,α-乳白蛋白和β-乳球蛋白分别在40~1 000 nmol/L和80~2 000 nmol/L范围内呈良好线性关系,定量下限(S/N=10)均为0.020 g/100 g;加标回收率为84.7%~95.6%,相对标准偏差(RSD,n=6)为1.6%~5.8%。基于上述方法对5个国家的4类乳清蛋白粉(脱盐乳清粉D70和D90、浓缩乳清蛋白粉和α-乳白蛋白粉)进行了含量测定和差异对比。该方法操作简便,定量准确,可用于乳清蛋白粉等蛋白类原料中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的测定。 相似文献
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Ca2+与乳清蛋白结合的亲和毛细管电泳研究 总被引:2,自引:0,他引:2
利用亲和毛细管电泳研究了Ca2+与α-人乳清蛋白(α-HLA)的结合情况.以恒定浓度α-HLA作为受体,运行缓冲溶液加入不同浓度的Ca2+作为配体,可观察到由于Ca2+的结合,α-HLA的电泳淌度发生了变化.通过Scatchard方程的淌度比(M)处理数据得到α-HLA与Ca2+的表观结合常数(Kapp)为2.0×107(mol/L)-1.同时考察了Ca2+对变性剂(尿素)和热诱导所引起的α-HLA去折叠的影响,结果表明,Ca2+的结合增强了α-HLA的稳定性,也即提高了α-HLA抗变性剂和热诱导的去折叠性能. 相似文献
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高效毛细管区带电泳法分离人血清蛋白质的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
研究了高效毛细管区带电泳分离人血清蛋白质的电泳行为及实验条件 ,建立了分离血清蛋白质的高效毛细管区带电泳法。血清样品经硼酸缓冲液 (5 0 mmol/L,p H8.80 )稀释后 ,以 0 .1 mol/L硼酸缓冲液 (p H9.3 5 ,含4g/L PEG80 0 0 )为电泳介质 ,在 5 0 μm i.d.× 3 7cm弹性石英毛细管柱 (有效柱长为 3 2 cm)中进行电泳分离 ,以2 0 0 nm紫外波长检测。方法简便、快速、重复性好 ,1 2 min内便可完成对血清中蛋白质的电泳分离。 相似文献
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同时测定α-萘酚和β-萘酚的毛细管区带电泳法 总被引:7,自引:0,他引:7
建立了用毛细管区带电泳分离和测定α_萘酚和 β_萘酚的方法 ,在70cm×50μmID毛细管中,采用pH10.0、浓度20mmol/L的硼砂缓冲溶液 ,可将该两异构体分离 ,紫外检测波长为214nm,α_萘酚和 β_萘酚的线性范围分别为7.5~300mg/L和10.0~400mg/L,检出限分别为1.5mg/L和2.0mg/L;当两者质量浓度比在30∶1~1∶53范围内 ,测定的准确度和精确度均令人满意 相似文献
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毛细管区带电泳法快速测定食品中的金属硫蛋白 总被引:2,自引:0,他引:2
采用毛细管区带电泳法 (CZE) ,以 5 0cm× 75 μmi d 毛细管柱作为分析柱 ,0 .0 2mol/L磷酸二氢钠 0 .0 2mol/L磷酸氢二钠混合体系 (pH 7.0 )作为背景电解质 ,以紫外检测器在波长 2 0 0nm的条件下检测 ,对具有生物活性的金属硫蛋白 (MT)的两种异构体 (MT1,MT2 )进行了分离。样品经过预处理后 ,采用外标法可对食品中的金属硫蛋白进行定量测定。该方法的最低检测质量浓度为 1mg/L ,相对标准偏差低于 10 % ,加标回收率为 82 .0 %~93.4%。 相似文献
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毛细管区带电泳法分离发酵液中的木糖和木糖醇 总被引:1,自引:0,他引:1
建立了利用毛细管区带电泳分离发酵液中木糖和木糖醇的新方法。研究表明 :采用硼砂缓冲溶液时 ,木糖和木糖醇的分离度随硼砂浓度的增高而加大 ,在室温下硼砂最高浓度为 130mmol/L ;分离度还与溶液的 pH有关 ,在pH 9 5 5处分离度有最大值 ;缓冲液中十六烷基三甲基溴化铵的浓度为 4× 10 -6mmol/L~ 8× 10 -4 mmol/L时对分离度无显著影响 ;在优化的分离条件下 ,木糖和木糖醇可在 6min内基线分离。测定了发酵过程中样品各组分的含量和加标回收率 ,5次测定木糖的相对标准偏差 (RSD)为 1 42 %~ 3 11% ,回收率为 96 0 %~ 10 8 0 % 。 相似文献
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β-酪蛋白(β-CN)是牛乳中的主要酪蛋白。它包含13种变异体,其中A2是牛β-CN的主要变异体之一。定量测定A2 β-CN对A2乳制品的评价十分重要。该文建立了对液态奶和奶粉中A2 β-CN及总β-CN分离并定量的毛细管区带电泳(CZE)分析方法。使用熔融石英毛细管(50μm×30/40 cm有效/总长度),以50 mmol/L Na2HPO4+140 mmol/L柠檬酸+0.2%(质量分数) HPMC+4 mol/L尿素溶液(pH为2.7)作为分离缓冲溶液,在214 nm下检测。总β-CN和A2 β-CN的校准峰面积与其质量浓度间呈良好的线性关系,相关系数在0.996 8~0.999 7之间,加标回收率为85.5%~106.4%。对两款巴氏奶和两款奶粉中A2 β-CN和总β-CN进行分析,A2 β-CN和总β-CN的日内精密度分别为2.4%~4.7%和2.6%~4.8%,日间精密度分别为4.0%~6.3%和3.9%~6.7%。所建立的CZE方法可分离液态奶及奶粉中的A2 β-CN,并可对A2 β-CN及总β-CN进行定量。通过计算A2 β... 相似文献
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水稻品种鉴别目前常采用种子形态分析、蛋白和同工酶的聚丙烯酸胺凝胶电泳分析等方法,其缺点是试剂有毒,分析时间长,且很难区别亲缘关系接近的同母异父杂交水稻种子.毛细管电泳是一种高效分离技术【‘’‘〕,具有快速、微量、自动化等优点.本文采用毛细管区带电泳(CZE)对国产13种水稻种子胚乳贮藏蛋白进行初步研究,探讨了作为品种鉴别模式的实际可操作性,以期能为品种鉴别提供新的有效手段.仪器:BiofocusTM3000型(Bio-RadUSA)毛细管电泳仪,配紫外可见检测器和恒温装置.13种水稻种子中包括两组同母异父杂交种子(每组… 相似文献
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毛细管区带电泳法快速分离硝基酚和除草剂 总被引:5,自引:1,他引:4
运用毛细管区带电泳法 ,通过在缓冲溶液中添加多阳离子化合物改变电渗流方向的方法 ,快速分离了 11种一取代、二取代和三取代硝基酚及 4种在德国常用的除草剂Bromoxynil,DNOC ,Dinoterb和Ioxynil。使用UV检测 ,这些化合物的检测限在 0 5mg/L~ 1 1mg/L。为满足环境样品分析的要求 ,使用固相萃取方法对样品进行了预处理 ,使硝基酚的检测限达到 1μg/L以下 ,并对实际样品进行了分析。 相似文献
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毛细管区带电泳用于多种类兴奋剂的同时快速分离检测 总被引:3,自引:2,他引:1
建立了一种同时分离检测包括利尿剂、蛋白同化剂、β-阻断剂、麻醉剂、β2-激动剂、刺激剂等6类8种兴奋剂的毛细管区带电泳-紫外检测法。优化的色谱条件为:以50 mmol/L甲酸铵-氨水(pH 7.8)缓冲液为运行液,于3 kPa下进样10 s,分离电压为20 kV,检测波长为214 nm。在此条件下,8种兴奋剂在7 min内实现了快速的基线分离。在相应的浓度范围内,8种组分的浓度与峰高呈良好的线性关系,检出限达为0.2~0.7 μg/mL。该方法快速,分析成本低,无污染,非常适用于多种类兴奋剂的同时快速检测。 相似文献