共振散射光谱法测定多巴胺的分析应用研究

研究了I3-与孔雀石绿(MG)间的相互作用,并用于共振散射光谱法测定痕量多巴胺。在pH 4.5的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液中,在聚乙烯醇(PVA)与聚乙二醇辛基苯基醚(OP)存在的条件下,孔雀石绿与I3-通过静电作用力生成络合比为1∶2的离子缔合物MG(I3)2,而多巴胺具有还原性,可将I3-还原成I-,从而导致I3--孔雀石绿体系的共振散射强度下降。据此建立了一种灵敏度高、重现性好、快速测定多巴胺的共振散射光谱新方法。在优化的实验条件下,多巴胺的线性范围为2.0×10-7～4.5×10-6mol.L-1,相关系数(r)为0.999 1;检出限(3S/k)为9.5×10-8mol.L-1。将方法应用于针剂和人血清中多巴胺含量的测定,其加标回收率为100.1%～102.4%,相对标准偏差为0.41%～4.8%。     

大肠杆菌的共振散射光谱研究

研究了大肠杆菌的共振散射光谱.它在470nm、510nm和730nm产生三个瑞利散射峰.当激发波长为470nm(6.38×1014Hz)时,大肠杆菌溶液在470nm(6.38×1014Hz)和940nm(1/2×6.38×1014Hz)分别产生一个瑞利散射峰和一个1/2分频散射峰;当激发波长为510nm(5.88×1014Hz)时,在510nm产生一个共振散射峰;当激发波长为730nm(4.11×1014Hz)时在365nm(2×4.11×1014Hz)和730nm(4.11×1014Hz)分别产生一个2倍频散射峰和一个共振散射峰.分频散射和倍频散峰与共振散射峰具有相似的散射行为.大肠杆菌的浓度在0.074～38×108个/mL范围内与共振光散射强度I470nm、I510nm、I730nm成良好线性关系.     

蛋白质与三氯乙酸相互作用的共振散射光谱研究及分析应用

三氯乙酸（TCA）与酪蛋白、明胶、γ－球蛋白、HSA、BSA结合形成缔合微粒，均使体系的共振散射信号显著增强，在470nm处产生一共振散射峰。在选定条件下，几种蛋白质在一定浓度范围内与I470nm呈线性关系。建立了定量测定蛋白质的共振散射光谱分析新方法。该法操作简便，灵敏度高，线性范围宽，重现性较好，可用于多种蛋白质的测定。本法应用于合成样品及人血清样品中蛋白质的定量分析，结果满意。     

共振散射光谱法测定卡波姆

基于卡波姆在强酸性介质中产生自聚集作用导致其共振散射光显著增强,建立了测定卡波姆的共振散射光谱法。在优化的试验条件下,卡波姆940,971P,974P质量浓度的线性范围分别为20~120mg·L-1,50~300 mg·L-1,20~300 mg·L-1,检出限(3σ)分别为0.2,0.03,0.14μg·L-1。方法用于样品分析,加标回收率在96.9%~100%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在1.2%~2.3%之间。     

荧光素的共振光散射光谱研究

研究了荧光素(nu)的共振光散射(RLS)光谱的形成机理与影响因素.在中性和碱性条件下,Flu溶液的共振散射光显著增强.实验发现,随着溶液pH的增加,Flu溶液的RLS光谱与其荧光光谱、吸收光谱在强度大小、最大吸收峰位移上变化趋势一致.荧光素的荧光激发光谱与发射光谱有部分重叠,共振散射峰处于荧光激发峰与荧光发射峰之间.在光偏振实验中,测得共振散射光的偏振度P≈0.020.碱性环境中,随Flu溶液浓度的增加,其RLS光谱和荧光光谱的变化情况,同样表明两者之间有密切联系.上述实验结果揭示Flu的共振散射光就是共振荧光.     

酿酒酵母细胞的共振散射光谱研究

酿酒酵母在磷酸缓冲溶液中与培养基中都有很强的共振瑞利散射,在缓冲溶液中最大散射峰在392 nm处,在310 nm、420 nm、445 nm、457 nm、469 nm、482nm处也有弱的散射峰;在培养基中最大散射峰在483 nm处,在507 nm、527 nm、541 nm处有弱的共振散射峰.在最大散射峰处,共振散射强度与细胞浓度有良好的线性关系,线性范围分别是0～2.2×106个/mL、0～1.3×107个/mL,检出限分别为4.7×104个/mL、1.0×105个/mL.将共振瑞利散射技术应用于检测细胞数,具有操作简便、灵敏度高等的优点.     

共振瑞利散射光谱法测定异烟肼

基于在PH=1.5的CL缓冲溶液中异烟肼的加入使曙红Y的共振瑞利散射信号增强,建立了一种异烟肼测定方法.异烟肼浓度在0.02～4.2μg/mL范围内与体系散射强度的增强呈线性关系,检出限为0.01851μg/mL.该方法用于异烟肼片剂的测定,结果满意.     

共振光散射光谱的校正

以罗丹明6G在pH7.40时的共振光散射光谱（RLS）为例,引进仪器特性因子和分子吸收因子讨论荧光分光光度计的检测灵敏度和体系分子吸收对RLS光谱的影响,提出光谱校正方程。在吸收体系中,吸收带附近的散射光强度降低,并导致散射光谱发生畸变。通过光谱校正,除消除了不同仪器因光源和检测系统的差异对RLS光谱特性影响外,有效地消除了分子吸收的影响,提高了测定灵敏度。     

刚果红共振散射光谱法测定血红蛋白

在pH 4.0 Britton-Robinson缓冲溶液中,室温条件下,刚果红和血红蛋白反应生成缔合微粒,使体系的共振散射信号明显增强,并在529 nm处有一最大的共振散射峰。在选定的条件下,血红蛋白质量浓度在0.060～1.680μg/mL范围内与ΔI呈良好的线性关系,据此建立了一种测定血红蛋白含量的新方法。该方法的线性回归方程为ΔI=39.24ρ-1.776,相关系数r为0.9998,检出限为7.0×10-3μg/mL,将方法应用于尿样中血红蛋白含量的检测,回收率为94.2%～95.2%。     

共振光散射光谱法测定沙丁胺醇的研究

在B-R缓冲液的酸性条件下,以十二烷基苯磺酸钠作稳定剂,研究了沙丁胺醇的共振光散射光谱,在λex=λem=460 nm处得到一个共振光散射峰,其光谱强度与沙丁胺醇浓度呈线性关系,以此建立了测定沙丁胺醇的共振光散射光谱法。工作曲线的线性回归方程为I_(RLS)=114.67C_(SAL)+39.42,其线性范围为4.18×10~(-7)~5.43×10~(-6)mol·L~(-1),相关系数R为0.9994,以3倍标准偏差(3σ)而计算出的检出限为2.09×10~(-7)mol·L~(-1),相对标准偏差RSD为1.8,用于检测实际样品沙丁胺醇气雾剂得到了令人满意的结果。     

碳纳米微粒的共振散射光谱研究

液相碳纳米微粒的共振散射光谱实验表明,当碳浓度小于360mg/L时,它在400、470、510和940nm产生4个共振散射峰;浓度大于900mg/L时无共振散射、碳微粒浓度在0．45－45mg/L范围内与共振散射光强度I470nm成良好的性关系,研究了光源和扫描速度对液相碳纳米微粒共振散射光谱的影响。结果表明,光源的发射强度分布不一是产生共振散射光谱峰的一个重要因素,并结合已有的实验结果提出了界面共振吸收和黑白纳米微粒共振散射概念,解释了碳纳米微粒体系的共振散射光谱。     

Ag-CV的表面增强共振散射光谱研究

采用共振散射光谱和紫外可见光谱研究了银胶与结晶紫的相互作用。在ＰＨ为４．０的ＨＡｃ－ＮａＡｃ缓冲溶液中,奶胶在３４５ｎｍ和７００ｎｍ有两个共振散射峰;当加入带下辈民的阳离子染料结晶紫后,产生表面增强效应,３４５ｎｍ和７００ｎｍ处的共振散身信号大为增强,从而获得灵敏的表面增强共振散射光谱。     

维多利亚蓝B-安乃近的共振瑞利散射光谱及应用

建立了测定安乃近的共振瑞利散射(RRS)法。在弱碱性的Tris-HCl缓冲介质中,安乃近与维多利亚蓝B的结合物使共振瑞利散射显著增强并产生新的RRS光谱,且在364nm波长处的共振散射强度△IRRS最强。安乃近的浓度在0.2×10-6~1.2×10-6mol/L范围内与△IRRS呈线性关系,相关系数为0.9987,检出限(3Sb/S)为2.6×10-8mol/L。该方法简便、快速、灵敏,用于市售安乃近药物中安乃近含量的测定,结果满意。     

V(Ⅴ)-I~--十六烷基三甲基溴化铵体系共振散射光谱及分析应用

研究了在盐酸介质中,V(Ⅴ)-I--十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)离子缔合物的共振散射光谱。实验发现,当有V(Ⅴ)存在时,V(Ⅴ)与过量的I-反应生成I3-,I3-与CTMAB形成离子缔合物微粒(CTMAB+.I3-)n,使I--CTMAB溶液的共振光散射强度显著增加。在波长563nm处,共振散射光强度最大且光散射强度与钒浓度在2～60ng/mL范围内呈正比,据此建立了测定环境样品中痕量钒的共振散射光谱分析新方法,方法检出限为0.66ng/mL。用拟定的方法测定环境样品中微量钒,相对标准偏差小于7.5%,回收率在97.8%～102.4%。     

花菁-脱氧核糖核酸的共振光散射光谱及其分析应用

研究了一种苯并噻唑阳离子花菁与脱氧核糖核酸(DNA)作用的共振光散射光谱,在pH 6.0的六次甲基四胺-HCl缓冲介质中,痕量DNA的加入使花菁在590nm的共振光散射强度显著增强。在最佳实验条件下,增强的共振光散射强度与DNA浓度具有良好的线性关系,据此建立了一种测定DNA的共振光散射光谱法。方法的线性范围为:小牛胸腺DNA(CT DNA),0～20μg/mL,鱼精子DNA(FS DNA),0～15μg/mL;检出限分别为0.005μg/mL和0.008μg/mL。该方法已用于合成样品中DNA的测定。     

钯(Ⅱ)-泛昔洛韦螯合物与铬天青S相互作用的共振瑞利散射光谱及其分析应用

在pH值为2.5～3.5的Britton-Robinson缓冲溶液中,泛昔洛韦与钯(Ⅱ)相互作用形成1∶1的螯合阳离子,并进一步与铬天青S反应形成1∶1的离子缔合物。该反应可引起共振瑞利散射(RRS)光谱的显著增强并产生新的RRS光谱,最大RRS波长位于367 nm。在一定范围内,共振瑞利散射增强(ΔIRRS)与泛昔洛韦的质量浓度成正比,其线性范围为0.02～2.4 mg/L。该方法的灵敏度高,对泛昔洛韦的检出限为3.6μg/L。实验考察了适宜的反应条件以及共存物质的影响。应用计算化学软件Gaussview3.07和Gaussian03W,采用密度泛函法,在B3LYP/6-31G基组水平上计算了泛昔洛韦的电荷分布,对反应机理和RRS增强的原因进行了讨论。基于Pd(Ⅱ)-泛昔洛韦-铬天青S体系三元离子缔合物的RRS光谱,发展了一种简便、快速、灵敏测定泛昔洛韦的新方法。此方法用于胶囊和尿样中泛昔洛韦的测定,结果满意。     

胰蛋白酶与DNA相互作用的共振瑞利散射光谱及其分析应用研究

当胰蛋白酶与鲱鱼精DNA(hsDNA)、 鲑鱼精DNA(sDNA)以及小牛胸腺DNA(ctDNA)之间发生相互作用时,共振瑞利散射(RRS)会显著增强,并产生新的RRS光谱. 三者有近似的光谱特征,其最大RRS峰分别位于307 nm(hsDNA和sDNA体系)和290 nm处(ctDNA体系),另一散射峰位于350 nm处,其散射强度(ΔI)与DNA或者胰蛋白酶的浓度成正比,因此可用于蛋白质和DNA的相互测定. 当用胰蛋白酶测定DNA时,hsDNA,sDNA和ctDNA的检测范围分别为1.4×10^-3～2.3, 2.1×10^-3～2.5和3.5×10^-3～1.9 μg/mL(ctDNA),它们的检出限分别为0.4,0.7和1.1 ng/mL. 当用hsDNA测定胰蛋白酶时,其线性范围为0.1～30.0 μg/mL,检出限为39.0 ng/mL. 研究了最佳的反应条件、 影响因素和结合产物的化学性质,考察了胰蛋白酶与DNA的结合比,推测了它们的结合方式,并以胰蛋白酶作RRS探针,发展了一种高灵敏、 简便和快速测定痕量DNA的新方法.     

溴百里酚蓝-蛋白质体系的共振瑞利散射光谱的研究及分析应用

基于蛋白质对溴百里酚蓝共振瑞利散射的增强作用,建立了一种测定蛋白质的方法.在酸性B-R缓冲溶液中,溴百里酚蓝在365 nm波长处的共振光散射增强与蛋白质浓度呈线性关系.对人血清白蛋白、牛血清白蛋白、γ-人球蛋白、卵白蛋白测定的线性范围分别为0.04～2.4,0.04～2.4,0.04～1.6,0.04～1.8 mg·L-1;相应的检出限分别为23.9,23.O,25.0,30.4μg·L-1.用于人血清、尿液中总蛋白质含量的测定,分析结果的RSD依次为1.5%和3.3%,且与考马斯亮蓝法的结果相符.     

共振光散射光谱法测定痕量氯离子

定量测定氯离子的传统重量法、滴定法、硫氰酸汞比色法、比浊法的灵敏度和精密度均不够理想。共振光散射光谱法(Resonance Light Scattering RlS)是一种新的分子光谱技术,灵敏度高,可用普通的荧光分光光度计测量。本文用它测定痕量氯离子,结果令人满意。     

柑桔溃疡菌的共振散射光谱

研究了柑桔溃疡菌的共振散射光谱,在330、425、465和695 nm产生四个共振散射峰.当激发波长为330 nm （9.09×1014 Hz）时,溃疡菌溶液在330 nm（9.09×1014 Hz）、660 nm（1/2×9.09×1014 Hz）和990 nm（1/3×9.09×1014 Hz）分别产生一共振散射峰和1/2、1/3两个分频散射峰;当激发波长为465 nm（6.45×1014 Hz）时,在456 nm(6.45×1014 Hz)和930 nm(1/2×6.45×1014 Hz)分别产生一个共振散射峰和一个1/2分频射峰; 当激发波长为930 nm(3.23×1014 Hz)时,在930 nm (3.23×1014 Hz)、620 nm(3/2×3.23×1014 Hz)、465 nm(2×3.23×1014 Hz) 和310 nm (3×3.23×1014 Hz)分别产生一个共振散射峰,一个3/2分频共振散射峰,一个2倍频共振散射峰和一个3倍频共振散射峰.柑桔溃疡菌是一种非线性散射光学介质.分频散射和倍频散射峰与共振散射峰具有相似的散射行为.