分离生物大分子的液相色谱固定相

本文介绍了各类用于生物大分子分离的液相色谱填料,并对它们在生物大分子分离及制备中的性能、基本特征作了评述。     

高分子色谱固定相

本文扼要介绍气相色谱和高效液相色谱所应用的各种高分子色谱固定相概况、原理、类型和制备等问题,高分子材料在色谱上的应用及其发展。     

铜离子固定金属亲和色谱在生物大分子中的应用

铜离子固定金属亲和色谱作为一种有效的分析方法,已普遍应用于生物大分子的分离与纯化.本文从理论和应用两个方面就新型基质、螯合配体、色谱动力学、联用技术以及蛋白质分离纯化、复性等方面进行了评述.     

新型聚合物单分散温敏色谱固定相的制备及其在生物大分子分离中的应用

以2.5 μm的单分散聚苯乙烯为种子,乙二醇二甲基丙烯酸酯 (EDMA)为交联剂,甲苯和环己醇为致孔剂,采用一步种子溶胀聚合法制备了单分散微球; 再以过硫酸钾为引发剂将水溶性温敏单体N-异丙基丙烯酰胺(NIPAM)分子引发聚合到微球表面,制备了粒径为7.0 μm、分散系数为0.02的单分散交联温敏色谱填料,温敏单体NIPAM的接枝率为5.2%.考察了该填料对标准蛋白质的分离性能、温敏性能、稳定性和重现性以及动态吸附容量对蛋白保留的影响.实验结果表明,该色谱填料对蛋白的分离性能、温敏性能、稳定性及重现性良好,且对溶菌酶的动态吸附容量为32.3 mg/g.在疏水模式下,该填料不但可以同时基线分离5种标准蛋白,而且通过改变温度可以有效地将3种在低温下保留时间重叠的蛋白(细胞色素-C、β-乳球蛋白和核糖核酸酶)完全分离.     

以氯甲基聚苯乙烯为基质的新型排阻色谱固定相的合成及在生物大分子分离中的应用

以单分散交联聚氯甲基苯乙烯为基质,先后与乙二胺和δ－葡萄糖酸内酯反应,得到了亲水性能良好的排阻色谱固定相,其表面羟基含量高达５．４ｍｍｏｌ／ｇ。本文评价了改性后树脂的亲水性、溶剂匹配性、耐压性能及化学稳定性,用三羟甲基氨基甲烷（Ｔｒｉｓ）缓冲溶液（ｐＨ＝７．０）为流动相,蛋白质,混合样的分离遵循排阻色谱分离机理。聚苯乙烯和蛋白质标准样的排阻色谱分离机理。聚苯乙烯和蛋白质标准样的排阻色谱校正曲线 范     

复合纤维素金属螯合膜色谱介质的制备及其分离生物大分子的研究

以棉纤维为基质 ,通过聚合、接枝、开环反应合成了亚氨二乙酸型金属螯合复合膜色谱介质 ,考察了反应温度 ,反应时间对合成介质性能的影响 ,并对复合纤维素膜的表面物理性能及蛋白质的结合性能进行了表征 .实验结果表明 ,膜色谱介质对蛋白质具有较大的吸附容量 ,分离效果与凝胶介质相当 ,但分离速度快 3～ 5倍 .复合膜色谱介质还具有负压低 ,成本低 ,使用寿命长等特点 ,适于生物大分子的快速大规模分离纯化 ,并用于高效液相色谱对生物大分子的快速定量分析 .     

合成高分子作为手性固定相在高效液相色谱中的应用

具有旋光活性的合成高分子基于它的手性结构而具有广泛的应用,其中最实际和广泛的应用是在高效液相色谱中作为手性固定相来拆分对映异构体,目前已成为合成化学、分析化学以及制药化学领域必不可少的分离材料.本文简要介绍了高效液相色谱手性固定相拆分法,综述了合成高分子,包括加聚物特别是聚甲基丙烯酸酯类和聚甲基丙烯酰胺类聚合物、聚酰胺...     

高分子色谱固定相GDX203的改性及其在色谱分离中的应用

通过对高分子色谱固定相GDX 2 0 3的硝化改性处理 ,得到新型色谱固定相改性GDX 2 0 3.该固定相用于甲醇羰基合成醋酸的反应产物分析 ,可在恒温条件下快速分离反应介质中的全部组分 ,尤其是乙酸甲酯和碘甲烷可得到完全分离     

以四唑为固定相配体的新型离子交换固定相的制备及色谱性能

用硅胶与γ-缩水甘油基丙基三乙氧基硅烷和3-羟基丙腈反应, 再采用链接化学(Click chemistry)中腈与叠氮化钠进行的3+2环加成反应, 合成了以四唑基为配体的弱阳离子交换色谱固定相. 结果表明, 所制得的色谱柱(4.6 mm×50 mm, i.d.)对蛋白质具有良好的分离性能, 且质量回收率大于93%. 蛋白质在该固定相上的保留符合弱阳离子交换色谱机理, 但保留值随流动相pH的变化规律与蛋白质在以羧基为交换基团的固定相上的保留值的变化规律不同, 并对此现象进行了初步解释.     

液相色谱和毛细管电色谱连续床固定相技术

连续床作为一种新型的色谱固定相，具有制备简单、渗透性好、柱效高等优点，已广泛应用于HPLC和CEC。本文重点评述了连续床制备技术的进展。附参考文献65篇。     

聚合物整体固定相的制备及条件优化

采用无搅动原位聚合模式,在聚醚醚酮柱管中直接制备了聚合物整体固定相。通过扫描电镜观察到该整体固定相的孔径分布呈双峰模式,且孔结构均匀。用压汞法测定了该固定相的孔径分布、孔隙率及比表面积等参数,考察了致孔剂组成、聚合温度及交联剂含量等参数对固定相孔结构的影响,并对制备条件进行了优化。测定了流速与柱前压的关系,实验表明此整体固定相具有良好的通透性。通过对山羊血清和低聚核苷酸的分离分析,证明了所制备的整体固定相适合用于生物大分子的分离纯化。     

新型纤维素衍生物手性固定相的制备及其对几种对映异构体的高效液相色谱分离

合成了一种经环十二烷修饰的纤维素酯，将其涂敷于小粒径的氨丙基化硅胶（APS）上，制备出高效液相色谱手性固定相，以正己烷、异丙醇为流动相拆分了2-对氯苯基丙腈、1-对氟苯基乙醇、1-对叔丁基苯氧基-2-丙醇、2-对氯苯基辛腈及三唑醇等5种外消旋对映体，并考察了流动相中异丙醇含量对分离效果的影响。     

硝酸纤维素手性固定相的制备及其在手性化合物拆分中的应用

将硝酸纤维素涂敷于硅烷化的硅胶表面,制备了一种新型的纤维素衍生物类涂渍型高效液相色谱手性固定相;采用湿法装柱,在正相色谱条件下将其用于手性化合物分离,取得了较好的分离效果.     

气相色谱键合固定相的制备及农药残留测定的应用研究

本文采用热反应键合法,将ＰＥＧ－２０Ｍ与４０５白色硅藻上载体进行热键合制备气相色谱键合固定相。用ＴＧ－ＤＴＡ法对固定相的键合量及温度特性进行研究,结果表明,键保固定相具有较好的色谱性能,能有效地应用于食品及农产品中多种有机磷类农药、氨基在农药以及拟除虫菊酯类农药残留量的分离测定。     

异喹啉酸衍生物配体交换色谱手性固定相的制备及应用

合成了2-(2-羟基十六烷基)-(S)-1,2,3,4-四氢-3-异喹啉羧酸手性选择子,并采用动态涂渍方法,制备了一种涂渍于ODS柱上的新型手性配体交换色谱固定相。采用醋酸铜水溶液为流动相,在柱温25℃和UV254nm检测条件下,拆分了16种D,L-氨基酸对映体,其对映体选择性α和分离度Rs分别在1.09~1.67和1.0~4.8之间,并观察到D-异构体在先,L-异构体在后的色谱流出顺序。讨论了柱温、流动相的流速、pH值、Cu2 浓度和NH4 对D,L-氨基酸对映体拆分的影响。     

新型手性配体交换色谱固定相的合成及其对DL-氨基酸的拆分

将β-(3,4-环氧环己基)乙基三甲氧基硅烷与硅胶反应,得到环氧化硅胶中间体,然后与L-异亮氨酸反应,再与铜离子进行配位,最后得到一种新型配体交换固定相。用DL-氨基酸对该固定相进行了色谱评价,同时探讨了分离机理。研究结果表明,该固定相在配体交换模式下,可对DL-氨基酸进行良好分离。     

用于碱性物质分离的高效液相色谱键合相的制备及评价

采用２,４－戊二酮与正辛烷基二甲基氯硅烷反应制成活泼的中间体——硅醚型硅烷中间体,然后再与硅胶进行键合。经元素分析、漫反射红外光谱和高效液相色谱法对键合相进行了鉴定和评价。结果表明,键合反应按预定路线进行,硅胶表面被键合相基团覆盖的较均匀、完全。键合相具有较好的色谱性能,可有效地用于碱性化合物的分离分析中。     

用于碱性物质分离的酰胺型反相色谱键合相的制备及评价

 采用先对硅胶进行氨丙基化 ,然后与辛酰氯键合的方法 ,在国内首次制备了“内嵌”极性官能团酰胺键的反相色谱填料。以甲醇 水为二元流动相 ,用含有中性、酸性和碱性有机化合物的混合物评价了该固定相的疏水性、选择性和亲硅醇基效应 ,并考察了该填料适用的 pH值范围及水解稳定性。结果表明 ,该固定相具有较好的色谱性能 ,且在 pH 2 5～ 7 5时稳定性能良好 ,可有效地用于碱性化合物的分离分析。     

涂敷三苯甲酰基纤维素酯手性固定相的制备和表征

以微晶纤维素为原料制备三苯甲酰基纤维素酯（ＣＴＢ）,通过电子透射显微分析考察涂敷ＣＴＢ手性固定相的表面分布和表面浓度,用ＣＴＢ涂敷大孔硅胶高效液相色谱法分离三对旋光异构体,（±）－α－苯乙醇对映体获得完全分离,降冰片烯乙酯和４－十六碳烷氧基－（１′－溴）正壬基苯对映体未完全分开。