人T细胞中核酸结合亲环素(hCyP33)与 poly(A)+RNA(mRNA)特异性结合

人亲环素33(human cyclophilin 33, hCyP 33)是1996年发现的一个蛋白质. 它由1个N-端的RNA结合团块、1个C-端的亲环素团块和两者之间的连接部分组成. RNA结合蛋白(RNA-binding protein, RBP)是参与真核生物RNA转录后剪接(splicing)、修饰(modification)和输送(transport)等功能的一类蛋白质. 亲环素具有肽脯氨酰顺反异构酶活性, 在蛋白质折叠、输送和相互作用过程中起着关键作用. 器官移植时使用的免疫抑制剂环胞菌素A (cyclosporin A, CsA)能与亲环素类蛋白质结合, 并抑制它们的酶活性. 但是同时具有这两种不同功能的亲环素33在细胞生理过程中到底起了什么作用, 至今尚不清楚. 用离子交换色谱法和亲和吸附的方法研究了人亲环素33与各种细胞RNA的结合特异性, 证实了人亲环素33只同具有poly(A)尾序列结构的mRNA, 即poly(A)⁺ RNA发生特异性结合.     

糖-蛋白质特异性识别在生物材料领域的应用

糖类不仅是组成生命体的基本物质之一,还是很多生理和病理过程中分子识别和细胞间相互作用的基础。糖的生物学功能可通过与蛋白质的相互作用来实现。这种可逆的特异性识别在信号传导、细胞粘附、增殖、分化、病菌感染和免疫应答等生命过程中具有重要意义。本文着重介绍了糖-蛋白质相互作用的种类和机理,综述了糖-蛋白质特异性识别作用在生物材料领域的应用进展,包括将糖类作为靶向分子修饰到纳米粒子或载体分子表面进行药物传递和基因转染,利用糖-蛋白质非共价作用力进行分子组装,以及制备糖基化表面用于调控蛋白粘附和细胞行为。由于糖类特殊的生物学性能和种类的多样性,基于糖-蛋白质特异性识别有望用于制备更加实用和智能的生物材料。     

新型双孔蛋白质离子交换剂的制备及性能研究

本文以甲基丙烯酸缩水甘油酯为单体，三聚异氰尿酸三烯丙酯和二乙烯基苯为交联剂，甲苯和正庚烷为有机致孔剂，用原位聚合的方法合成新水性高分子载体。胺化反应后，得到含二乙胺基羟丙基的阴离子交换剂（树脂A）。研究了不同的合成配比对该树脂吸附牛血清白蛋白行为的影响，从而获得一个较佳的合成配方。在此基础上，采用固体颗粒与有机溶剂联合致孔模式，以硫酸钠颗粒为固体致孔剂，制备新型双孔离子交换剂（树脂B）。比较了两种树脂的孔结构及其对牛血清蛋白的吸附行为。结果表明，树脂A和树脂B均具有较高的吸附容量和较好的机械性能。由于树脂B内含有流动相可以对流通过的大孔结构，因此同时还具有相对较好的吸附动力学性能。     

RNA结合蛋白的组学解析与功能探索

转录后调控在生理过程中占据十分重要的地位,其分子机制包含大量的核糖核酸(RNA)与蛋白质之间的相互作用.在RNA的整个生命周期中, RNA结合蛋白(RBPs)是相当关键的参与者和执行者,影响了细胞生理过程的运行及机体稳态的维持.研究RNA结合蛋白质组,可以为发掘生物标志物、寻找疾病治疗的靶标提供重要信息.近年来,捕捉RBPs的手段推陈出新,从只能富集特定RNA的结合蛋白发展至可以实现全局性的RBPs鉴定,并对RBP的性质如空间分布、翻译后修饰所产生的影响进行了探索.聚焦于RBPs的组学解析手段以及功能蛋白质组探索,介绍现有的技术,总结技术特点并分析其所存在的问题,最后展望RBP组学研究技术改进的方向和应用前景.     

蛋白质相互作用: 界面分析, 结合自由能计算与相互作用设计

蛋白质相互作用在生命活动中起着重要作用. 研究蛋白质间相互作用的本质有助于了解生命活动中这些基本单元的作用. 本文主要综述了近期蛋白质相互作用研究的进展, 包括蛋白质相互作用界面的基本性质, 蛋白质结合自由能的计算方法, 不同相互作用在蛋白质结合/解离中的角色和差异, 以及上述知识在蛋白质相互作用设计中的应用. 蛋白质相互作用界面的特性, 例如界面大小、保守性以及结构的动态性质, 使得具有生物功能的蛋白质相互作用界面区别于非特异性的晶体堆积界面. 生物功能界面的一个重要结构特征是界面上存在着关键残基以及相对独立的相互作用模块. 利用多种方法, 如MM-PBSA、统计平均势以及不同的相互作用自由能模型, 可以在不同的精度上计算蛋白质相互作用自由能. 利用蛋白质相互作用界面的特点, 从不同的角度进行蛋白质相互作用对的设计与改造, 近年来已经有了不少成功的例子, 但还存在着很大的挑战. 我们认为在今后的蛋白质相互作用设计中, 考虑各种因素对蛋白质结合与解离的动力学过程的影响将有助于提高人类控制蛋白质相互作用的能力.     

在高效离子交换色谱上蛋白质累加进样分离法的研究

研究了离子交换色谱上的累加进样法，并用选择性累加进样法在ＳＣＸ－６柱上经了尿激酶粗品，结果较好。     

分离蛋白质的高效离子交换色谱填料的研究（Ⅱ）：新型弱阳…

将硅胶与环氧基有机硅烷反应的产物与聚乙烯亚胺交联，再与环状酸酐反应制得高效弱阳离子交换色谱填料ＷＣＸ－５和ＷＣＸ－６；交联产物与聚琥珀酰亚胺反应，然后碱性水解制得填料ＷＣＸ－７，研究了它们的性能，ＷＣＸ－５的分离性能优于ＷＣＸ－５，ＷＣＸ－７有一些不同于前两者的色谱特性，三者皆可用于蛋白质的分离，溶菌酶的活性回收率大于９４％。     

利用尺寸排阻色谱法研究蛋白质的变性

通过比较蛋白质变性时的色谱行为和生物物理特性，提出利用尺寸排阻色谱法研究蛋白质变性时的构象变化，根据色谱参数中保留时间，比较蛋白质变性时体积的相对变化，利用色谱峰数，确定形成变体的数目，根据峰形和峰数的变化，描述蛋白质的伸展程度，利用不同波长下峰高的变化，推断蛋白质变性芳香族基酸残基的暴露情况，利用建立的尺寸排阻色谱观察了液体和固液α－淀粉酶在低温下放置时的变性情况，讨论了变性时间和变性温度对蛋白     

分离蛋白质的高效离子交换色谱填料的研究（Ⅳ）：强阴离子交换色…

含环氧基的硅与二乙胺或聚乙烯亚胺反应，其产物再与碘甲烷或氯化苄反应，得到含季铵离子的强阴离子交换色谱填料，该埴料可用于蛋白质和生物工程产品（如基因重组人干扰素γ，粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子和人绒毛膜促性腺素等）的分离纯化，其中，环氧基硅胶与二乙胺加成后再用氯化季铵化的产物是较好的强阴离子交换色谱填料。     

微透析-液相色谱法研究药物与蛋白竞争结合

以酮基布洛芬 (ketoprofen)与人血清白蛋白为例 ,利用微透析取样技术建立了药物与蛋白质相互作用研究的新方法 .结果表明酮基布洛芬与人血清白蛋白的结合有两类非等价结合位点 ,以Scatchard方程拟合 ,一级结合的位点数和亲合常数分别为 0 .799,3.1 8× 1 0 6(mol·L-1) -1,二级结合的位点数和亲合常数分别为 2 .1 5 ,2 .0 1×1 0 5 (mol·L-1) -1.同时还考察了药物与人血清白蛋白结合的置换效应 ,表明布洛芬(ibuprofen)与酮基布洛芬的一级结合位点相同可使酮基布洛芬的结合率大大降低 ,两者间有较强的置换效应 .酮基布洛芬与华法令 (warfarin)的一级结合位点不同 ,彼此没有明显的置换效应 .采用液相色谱中的顶替吸附理论较好地表达了药物间的置换效应 .微透析取样技术测定药物与蛋白质相互作用具有简单、快速、易于自动化的优点 .     

亲和层析研究进展

亲和层析具有高选择性,高活性回收率和高纯度等特点,已成为纯化蛋白质等生物大分子最有效的技术之一,本文综述了亲和层析的类型,配基的种类,选择方法以及亲和层技术的最新研究进展,重点介绍了多肽作为亲和配基的制备及筛选方法及其在生物大分了职的应用,并比较了不同亲和层析方法的优缺点及其发展趋势。     

批量离子交换层析和凝胶过滤层析在类人胶原蛋白I纯化中的应用

研究了利用批量离子交换层析与凝胶过滤层析相结合的方法纯化类人胶原蛋白I的最佳条件。分别考察了不同离子交换树脂、缓冲溶液pH、离子强度、进料蛋白浓度对批量离子交换的影响,以及不同凝胶过滤介质对凝胶过滤层析的影响。结果表明,采用阴离子交换树脂DEAE52吸附杂蛋白,缓冲液pH为7.0,NaCl浓度为0.2mol/L,进料蛋白浓度为40mg/mL,并采用凝胶过滤介质SephadexG-100进一步纯化后,类人胶原蛋白I的纯度可达到98.2%,总纯化倍数为3.1,总回收率为80.6%。SDS-PAGE分子量分析和N末端氨基酸序列分析均表明纯化后的类人胶原蛋白I与基因设计一致。     

PURIFICATION OF Cd-BINDING PROTEIN FROM MAIZE ROOTS BY REVERSE-PHASE HIGH-PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY

An efficient procedure of purification of Cd-binding protein in roots of maize has been established. Young seedlings of maize were exposed to a medium containing CdCl2 to induce the production of Cd-binding protein in their roots. The protein was purified after heat treatment by ion-exchange chromatography and reverse-phase HPLC. The resulting protein was identified as a purified product by N-terminal amino acid with the dansyl method. Its molecular weight was 3200 dalton, the cysteine content was 29.5%, about 3 Cd atoms were bound to one molecule of the protein and the Cd : cystine ratio was 1 : 2.3. According to its character, this protein could be a kind of plant metallothionein-like protein.     

THE POSSIBLE MECHANISM OF BINDING INTERACTION OF INSULIN MOLECULE WITH ITS RECEPTOR

Detailed structural comparisons and investigation of DPI, 2Zn insulin and some other derivatives of insulin were performed by the least-squares superimposition technique and the graphics technique. It is pointed out in this paper that the binding interaction with the receptor molecule should take place mainly on an amphipathic surface of the insulin molecule. In the middle, there is a hydrophobic surface with an area of about 150 consisting of many hydrophobic residues; while the polar or charged groups distributing around the hydro. phobic surface construct a hydrophilic zone. The hydrophobic surface is usually covered by the extended B-chain C-terminal peptides with great mobility and protected from the solvent molecules. The angle between the amphipathic surface and the surface of dimerization is about 20 degrees. The results from the detailed structural comparison between A1-(L-Trp) insulin and A1-(D-Trp) insulin have provided a very good explanation to their great difference in biological activity,     

氢键吸附及其展望

本文述及了氢键吸附的一般规律及最新发展情况，提供参考文献27篇。     

环境空气中痕量硝基苯测定方法研究

建立了Tenax富集-气相色谱仪测定环境空气中痕量硝基苯的方法。用Tenax采样管吸附环境空气中的痕量硝基苯,用1.0mL石油醚淋洗解析吸附的硝基苯,用气相色谱-电子捕获检测器进行检测,外标法定量,线性相关系数为0.9992,平均回收率为95.9%～97.1%,RSD不大于5.2%(n=5)。按采样10L计算,检出限为0.0002mg/m3,经实际样品测定完全能满足环境空气中痕量硝基苯监测的要求。     

吹扫捕集气相色谱法测定水中苯系物

采用吹扫捕集-气相色谱法测定生活饮用水中苯系物(笨、甲苯、乙苯、邻、间、对二甲苯、异丙苯、苯乙烯),并对吹扫捕集的条件进行优化,缩短了分析周期,提高了方法的灵敏度和准确度.方法的最低检出浓度为0.9～1.7μg/L,相对标准偏差为0.63%～1.36%(n=7),平均加标回收率为97.4%～101.3%.本方法适合于地表水和生活饮用水中苯系物的测定.     

癸二酸—二苯并—18—冠—6共聚物的络合特性

以溶剂萃取的方法研究了癸二酸-二苯并-18-冠-6共聚物（CEP－1）的离子络合效率和选择性，测定了苦味酸盐在水与二氯甲烷中的平衡浓度，求得了草取平衡常数，并与其小分子模型物及酚醛树脂型冠醚聚合物（CEP-2）作了对比。结果表明，酮型冠醚聚合物虽然在离子萃取能力上有所下降，但其对K 却显示出更大的选择性。     

离子色谱法在城市和背景区域SO2监测中的应用

介绍用无动力采样技术采集样品、离子色谱法分析SO2污染物浓度的监测方法。国际实验室间分析结果的比对实验表明，离子色谱法具有快捷、准确及自动化程度较高等优点。该方法在城市和背景区域环境空气背景值研究，如SO2污染物迁移规律、空气质量预测预报模型验证及远距离传输等方面具有很大的实用价值。