浙江地区汉族人群 IL-27p28基因多态性与克罗恩病的相关性研究

目的探讨IL-27p28基因启动子区g.-964 T＞C、第2外显子区g.2905T＞G和第4外显子区g.4730T＞C 3个位点的多态性与浙江地区人群克罗恩病（CD）的相关性。方法选取75例浙江地区汉族CD患者（病例组）及80例健康体检者（对照组）,采用聚合酶链反应-连接酶检测,分析两组基因型频率及等位基因频率。结果对照组的基因型分布符合Hardy- Weinberg平衡定律。两组g.-964位点的基因型频率及等位基因频率的差异有统计学意义（P＜0.05）,而g.2905和g.4730位点的基因频率及等位基因频率的差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 IL-27p28基因多态位点g.-964 T＞C可能与浙江地区汉族人群CD易感性有关, g.2905T＞G和g.4730T＞C多态性与浙江地区汉族人群CD无关。     

视黄醇结合蛋白4与糖尿病视网膜病变的相关性研究

目的 探讨2 型糖尿病（T2DM）患者的视黄醇结合蛋白4（RBP4）水平与糖尿病视网膜病变（DR）的关系。方法 应 用酶联免疫吸附法测定31 例无DR 的糖尿病患者（NDR 组）、33例非增殖性DR 患者（NPDR 组）、34 例增殖性DR 患者（PDR组）和36例无糖尿病的健康体检者（对照组）的血清RBP4 水平,比较4组RBP4水平,并分析其与BMI、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、TG 等的关系。结果 NDR 组、NPDR 组和PDR组患者血清RBP4 水平分别为（18.76±5.17）、（25.33±4.68）、（31.57±5.98）mg/L,与对照组[（11.65±4.32）mg/L]比较,差异有统计学意义（P＜0.05 或0.01）;NPDR 组、PDR组患者血清RBP4水平高于NDR 组,差异有统计学意义（P＜0.05 或0.01）。相关分析显示血清RBP4 水平与BMI、hs-CRP、TG 及HOMA-IR 呈显著正相关（r= 0.714、0.837、0.796、0.801,均P＜0.05）,多元逐步回归分析显示hs-CRP 和HOMA-IR 显著影响RBP4 水平（P＜0.05）。结论 血清RBP4 在糖尿病患者中显著升高,其水平变化与DR 的发生、发展密切相关。     

FasL基因-844T/C单核苷酸多态性与浙江地区食管鳞癌易感性关系的研究

目的：研究FasL基因启动子区-844T/C单核苷酸多态性（SNP）与食管鳞癌易感性的关系。方法提取248例食管鳞癌患者（患者组）和297例健康体检者（对照组）外周血基因组DNA,以PCR-RFLP检测FasL-844T/CSNP。分析、比较两组该位点SNP的表达差异。结果食管鳞癌患者与健康体检者的FasL基因启动子区-844位点基因型分布差异有统计学意义（P＜0.01）。以TT基因型为对照,TC基因型不增加食管鳞癌患病风险（P＞0.05）,而CC基因型则显著减少食管鳞癌患病风险（调整后OR=0.425,95%CI=0.255-0.708,P＜0.01）。以T等位基因为对照,C等位基因显著减少食管鳞癌患病风险（调整后OR=0.597,95%CI=0.460-0.776,P＜0.01）。结论在浙江地区人群中FasL基因-844T/CSNP与食管鳞癌的易感性有关。     

PARK18基因多态性与中国汉族人帕金森病的相关性

目的研究PARK18基因多态性与中国汉族人群帕金森病(PD)的相关性,旨在探讨PD的发病机制,为PD的风险预测提供新的遗传标记.方法选取224例PD患者(PD组)及同期体检健康者309例(对照组),采用PCR、DNA测序等方法检测比较两组PARK18基因多态性位点,分析rs3129882与PD遗传易感性的相关性.结果两组对象rs3129882基因型频率和等位基因频率分布的差异均无统计学意义(均P>0.05).rs3129882多态性与PD发生风险的关联性在3种遗传模式下均无统计学意义(均P>0.05).结论本研究暂不支持中国汉族人群中PARKl8区域rs3129882位点单核苷酸多态性与PD的发生有显著关联性.     

白介素-27 rs153109多态性与免疫性血小板减少症患者发病相关性研究

目的探讨白介素-27(IL-27)rs153109单核苷酸多态性与免疫性血小板减少症(ITP)发病的相关性.方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术对100例患者和100例健康对照者进行IL-27 rs153109基因定型.结果整体分析提示ITP患者的IL-27 rs153109基因多态性与发病无相关性.根据年龄将患者分为儿童ITP和成人ITP时,两组与对照组比较,该基因的基因型和等位基因频率均没有统计学差异(均P>0.05).再根据病程,将ITP患者分为急性儿童ITP、慢性儿童ITP、急性成人ITP和慢性成人ITP时,4组分别与对照组比较,该基因的基因型和等位基因频率也均没有统计学差异(均P>0.05).结论 IL-27 rs153109基因多态性在ITP患者和健康对照者中有相似的分布,表明该基因多态性可能与ITP的发病无关.     

维生素D受体基因BsmI位点多态性与桥本甲状腺炎的关系

随着人们对维生素D认识的不断加深,现已发现维生素D不但参与钙磷代谢的调节,而且参与细胞免疫的调节。研究已证实活性维生素D[1,25（OH）2D3]与众多的自身免疫性疾病发病相关,其可以阻止实验性桥本甲状腺炎（HT）等自身免疫性甲状腺疾病的发生[1],其生物学作用是通过维生素D受体蛋白（VDR）所介导的。本研究将VDR基因作为候选基因,探讨VDR基因Bs-mI位点多态性与HT的关系。     

钙蛋白酶-10 基因SNP-19 与多囊卵巢综合征相关性研究

目的 探讨钙蛋白酶-10 基因（CAPN-10）单核苷酸多态性-19（SNP-19）与多囊卵巢综合征（PCOS）的相关性。 方法 采用聚合酶链反应- 限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术,对107 例PCOS患者（PCOS 组）及111 例健康体检者（对照组）的CAPN-10 SNP-19 进行分析,并测定其性激素和生化指标。PCOS组再根据BMI与胰岛素抵抗（IR）稳态模型指数（HOMA-IR）分为肥胖组与非肥胖组、IR 组与非IR 组,分析CAPN-10 SNP-19 与其关系。结果 与对照组相比,PCOS 组BMI、空腹血糖（FPG）、TG、TC、LDL、黄体生成素（LH）、黄体生成素/ 卵泡刺激素（LH/FSH）、睾酮（T）均升高（均P＜0.01）。PCOS 组CAPN-10 SNP-19 1等位基因及1/2基因型频率均高于对照组（均P＜0.05）;且CAPN-10 SNP-19 1/2基因型PCOS 发病风险较1/1、2/2 基因型增加约2倍（OR=1.9,95％CI=1.1~3.3,P＜0.05）。CAPN-10 SNP-19 1、2等位基因频率PCOS 肥胖组与非肥胖组、IR 组与非IR组比较均无统 计学差异（均P＞0.05）;PCOS 肥胖组和IR组CAPN-10 SNP-19 1/2基因型频率分别高于非肥胖组和非IR 组,但差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论 CAPN-10 SNP-19 与PCOS 遗传易感性有关,可能与PCOS 肥胖及IR 无关。     

先天性白内障一家系的致病基因研究

目的 对一个来自浙江省杭州地区的三代先天性白内障家系进行常染色体显性遗传基因的突变分析,以寻找其可能的致病基因及突变位点。方法 该家系共10例成员,其中包括4例患者。10 例家系成员在浙江省人民医院眼科中心接受眼科专科检查及全身检查,以排除存在白内障以外的眼部及全身疾患。10例家系成员各抽取外周血5ml,提取基因组DNA。针对国内外文献报道的与常染色体显性遗传先天性白内障相关的18 个基因（CRYAA、CRYAB、CRYBA1、CRYBA2、CRYBA4、CRYBB1、CRYBB2、CRYGC、CRYGD、CRYGS、GJA3、GJA8、MIP、BFSP、HSF4、PITX3、EPHA2、PAX6）设计引物,进行PCR 扩增,对扩产物进行测序和序列分析,了解这10例家系成员的以上基因是否存在相应的序列。结果 临床眼科检查显示该家系先天性白内障类型为粉尘状白内障。候选基因序列测定显示在CRYAA 第1 个外显子中第6 位碱基发生C→T 置换,氨基酸同为天门冬氨酸。该家系中所有患者均有此改变,而所有的正常家系成员均无此改变。结论 CRYAA 第1个外显子中第6位碱基发生C→T的同义突变可能是导致该家系先天性白内障发生的致病原因。     

帕立骨化醇对糖尿病肾病肾小管 上皮间充质转化的干预作用研究

目的 探讨帕立骨化醇对糖尿病肾病（DKD）肾小管上皮间充质转化（EMT）的作用及内在机制。方法 将24 只SD 大鼠按随机数字表法分为帕立骨化醇干预组（P 组）、糖尿病肾病组（D 组）和正常对照组（C 组）,每组各8 只。P 组和D 组大鼠腹腔注射链脲佐菌素65mg/kg建立糖尿病肾病模型,造模成功后第2天P 组腹腔注射帕立骨化醇（溶于丙二醇中）0.4滋g/kg,3 次/ 周,D 组予等体积丙二醇;C组仅予等体积丙二醇。4 周后测血、尿生化指标;进行肾脏病理学检查;免疫组化及Western blot 技术检测肾组织E- 钙粘蛋白（E-cadherin）、α- 平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、纤连蛋白（FN）、转化生长因子-β1（TGF-β1）及Klotho 的表达,并进行指标间的相关性分析。结果 D组大鼠血清肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）及24 h尿蛋白水平均高于C 组,P 组均低于D 组（均P＜ 0.05）。C 组大鼠肾小管结构完整清晰,无明显病理改变;D 组可见肾小管间质局部炎症细胞浸润,肾小管上皮细胞脱落,小管扩张,基底膜断裂;P 组肾小管间质病理改变较D 组减轻。D 组大鼠肾组织E-cadherin 与Klotho表达低于C组,而P组高于D组（均P＜0.05）;与C 组比较,D 组大鼠肾组织α-SMA、FN 及TGF-β1 表达增加,而P 组表达均较D 组减少（均P＜0.05）。Klotho 表达与E-cadherin呈正相关（r=0.924,P＜0.05）,而与α-SMA、FN 及TGF-β1 均呈负相关（r=-0.806、-0.623、-0.856,均P＜0.05）。结论 帕立骨化醇可抑制糖尿病肾病大鼠肾小管上皮EMT,其作用可能与增加肾组织Klotho表达,同时减少TGF-β1合成相关。     

体质指数与2型糖尿病发病率的关系研究

对体质指数与2型糖尿病发病率的关系进行了详细研究,并建立了相应的数学模型.结果表明:超重与肥胖人群易患糖尿病.因此积极控制超重和肥胖是预防糖尿病的有效措施.     

亚临床甲状腺功能减退症对2型糖尿病患者微血管病变的影响

目的探讨亚临床甲状腺功能减退症（SCH）与2型糖尿病（T2DM）患者糖尿病肾病（DN）、视网膜病变（DR）和周围神经病变（DP）的关联。方法选取T2DM患者436例,根据甲状腺功能是否正常分为SCH组39例和甲状腺功能正常组（EUT组）397例。采用问卷调查的形式记录患者的年龄、糖尿病病程和吸烟史,测量身高、体重和血压,计算体重指数。空腹采血测定血糖（FBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）、丙氨酸转氨酶（ALT）、促甲状腺素（TSH）、甲状腺激素和血肌酐（Scr）。取中段晨尿行尿白蛋白和Scr检测,计算尿白蛋白肌酐比率（UACR）。SCH与DN、DR及DP等糖尿病微血管并发症的关联采用logistic回归法。结果 SCH组患者的年龄、性别、糖尿病病程、吸烟史、TC、LDL-C、Scr、UACR和TSH水平明显高于EUT组,差异均有统计学意义（P＜0.05或0.01）。通过多因素logistic回归法校正多种影响因素后,发现SCH与DN具有明显相关性（P＜0.05）,SCH与DR和DP均无明显相关性（均P＞0.05）。结论 SCH为T2DM患者DN的独立危险因素,与T2DM患者DR和DP病变无关。     

人钠/碘转运体基因转染结肠癌SW480细胞及相关蛋白表达的检测

目的以重组人钠/碘转运体（hNIS）基因转染结肠癌SW480细胞并检测hNIS mRNA及蛋白的表达,为放射性碘治疗非甲状腺肿瘤提供新思路。方法将构建好的重组质粒（pcDNA3.1+-hNIS）进行酶切、测序鉴定并扩增、提取。SW480细胞分为重组质粒（pcDNA3.1+-hNIS）转染组、空白质粒（pcDNA3.1+）转染组、空白对照组,转染后以RT-PCR和Western blot检测各组细胞hNIS mRNA和蛋白的表达。结果酶切和测序结果显示插入的hNIS基因大小和方向均正确。RT-PCR和Western blot显示重组质粒转染组SW480细胞可见hNIS mRNA和蛋白的表达,而空白对照组和空白质粒转染组均未检测到hNIS mRNA和蛋白的表达。结论脂质体法可有效地将hNIS基因转染至SW480细胞并成功表达hNIS蛋白。     

KLF6基因在原发性肝癌中遗传不稳定性的研究

目的研究KLF6基因M1、M2、M4、D10S1716位点的微卫星不稳定性（MSI）和杂合性缺失（LOH）与原发性肝癌进展的关系,为揭示抑癌基因作用机制和肿瘤发生、发展机制提供实验依据。方法从肝癌组织标本中抽提DNA,应用PCR-单链构象多态性（PCR-SSCP）法进行KLF6基因遗传不稳定性的研究。结果肝癌KLF6基因微卫星位点LOH的检出率为35.71%（10/28）,与肝癌分化程度、有无包膜无相关性（均P＞0.05）,但与临床TNM分期密切相关（P＜0.01）,LOH在肝癌Ⅲ～Ⅳ期检出率为（75.00%,6/8）明显高于Ⅰ～Ⅱ期（20.00%,4/20）。MSI检出率为17.86%（5/28）,MSI与肝癌分化程度、淋巴转移、临床TNM分期和有无包膜均无相关性（均P＞0.05）。结论 KLF6基因的遗传不稳定性可能是原发性肝癌发生、发展的一个重要机制,KLF6基因LOH的发生率与临床TNM分期正相关。LOH在KLF6杂合性缺失的过程中起了重要作用,可作为肝癌恶化及进展的一个指标,MSI则可能影响肿瘤的预后。     

带球形空腔的广义热弹性无限大材料的弹性模量和传热系数与材料参考温度的相关性

利用具某一松弛时间的广义热弹性方程求解了带球形空腔的无限大材料问题．该材料的弹性模量和传热系数是可变的．空腔的内表面没有力作用,但有热冲击作用．利用Laplace变换求得直接逼近解．数值求解了Laplace逆变换．给出了温度、位移和应力的分布图．     

非小细胞肺癌EGFR基因第一内含子（CA）n多态性与基因突变及预后的关系

目的研究非小细胞肺癌（NSCLC）患者表皮生长因子受体（EGFR）基因第一内含子（CA）n[intron 1（CA）n]多态性与EGFR基因突变的关系,并观察患者的预后。方法观察129例NSCLC患者生存情况,检测患者手术切除新鲜癌组织或石蜡包埋组织EGFR基因intron 1（CA）n及19、21外显子突变。结果129例NSCLC患者中,检出EGFR基因突变35例（27.1%）,其中EGFR19外显子21例（16.3%）,21外显子15例（11.6%）。EGFR intron 1（CA）n出现频率最多的等位基因为（CA）20（38.8%）,其次为（CA）16（26.4%）。短（CA）n与EGFR基因突变有关,特别是19外显子突变,差异有统计学意义（均P＜0.05）,但与21外显子突变无明显相关,差异无统计学意义（P＞0.05）。（CA）16与19外显子突变有关,差异有统计学意义（P＜0.05）。EGFR基因intron 1短（CA）n与长（CA）n NSCLC患者总生存时间差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 EGFR第一内含子短（CA）n,特别是（CA）16重复序列可能是影响19外显子缺失突变的一个重要因素。（CA）n多态性不是NSCLC患者预后的危险因素（P＞0.05）。     

糖尿病患者血浆同型半胱氨酸与围术期心血管事件的相关性分析

目的探讨糖尿病患者血浆同型半胱氨酸（homocysteine,Hcy）水平与围术期心血管事件（PCE）的相关性。方法2011年10月至2012年10月,合并糖尿病的择期非心脏手术患者300例,根据Hcy水平分为N组（Hcy＜15.4滋mol/L,217例）和H组（Hcy≥15.4滋mol/L,83例）。记录患者一般临床资料及心血管危险因素,通过动态心电图（DCG）持续监测术后48h的PCE发生情况。结果59例发生PCE,发生率为19.7%;其中,N组PCE的发生率为15.7%,H组PCE的发生率为30.1%,两组差异有统计学意义（t=7.937,P=0.005）;两组患者hs- CRP、LDL、TG浓度和ECG异常比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论糖尿病患者Hcy水平与PCE的发生率及心血管危险因素的控制密切相关。     

胃癌细胞MGC803中LTF基因的表达及其启动子甲基化相关性研究

目的 检测胃癌细胞株MGC803内乳铁蛋白（LTF）基因的甲基化和表达情况,探讨LTF的DNA 启动子区甲基化异常 与其在胃癌内表达的相关性。方法 用亚硫酸氢盐测序PCR 方法检测MGC803 启动子区甲基化状态,使用real-time PCR 和Western blot 分别检测LTF 在MGC803内的mRNA 和蛋白表达水平。同时使用去甲基化剂5-aza-CdR 处理胃癌细胞株,观察给药前后的DNA 甲基化状态和mRNA 表达情况。结果 MGC803 启动子甲基化率达59.8%,使用5-aza-CdR 处理的两组（2滋mol/L组和10滋mol/L组）和空白对照组甲基化率差异、LTF 的mRNA表达差异均有统计学意义（均P＜0.05）,并且随着MGC803启动子甲基化程度的下降,其mRNA 和蛋白表达增加;而不同浓度药物处理组间差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论 LTF 基因在胃癌细胞株MGC803 内表现为较高甲基化状态,而且LTF的表达和其启动子区甲基化情况相关,使用去甲基化剂能逆转DNA 的甲基化情况从而使其mRNA 重新表达。     

2型糖尿病患者尿液的代谢组学研究

目的 从代谢组学角度分析并寻找2型糖尿病（T2DM）患者可能的代谢标记物。方法 选取30例初诊、或有糖尿病史经药物治疗控制不理想且无并发症的T2DM 患者,另选取30例性别、年龄匹配的健康者为正常对照。收集清晨空腹中段尿,以气相色谱- 质谱联用（GC-MS）技术对尿液样本进行代谢图谱分析,正交偏最小二乘法判别研究尿液内源性化合物在两组间的差异。结果 T2DM 组和正常对照组尿液代谢谱明显分离。与正常对照组比较,T2DM 组尿液2,3,4- 三羟基丁酸、肌醇、D- 葡萄糖、D- 葡萄糖酸及尿素含量升高（P＜0.05 或0.01）,马尿酸含量减少（P＜0.01）。结论 代谢组学检查提示T2DM 患者尿液中代谢标志物为2,3,4- 三羟基丁酸、肌醇、马尿酸、D-葡萄糖、D- 葡萄糖酸及尿素,观察这些标志物含量的变化有助于T2DM 的临床诊断及发病机制研究。